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hESC細胞培養(yǎng)教程

一.傳代條件

細胞滿足以下條件之一，即需要進行細胞傳代：

1. 細胞匯合度達85%左右，移動視野觀察細胞生長狀態(tài)，整個皿密度均勻，沒有過大的克隆或者克隆過于致密的部分，一般皿中心部分比邊緣密度略大;一般情況下每4天傳代一次，即使克隆團較小，匯合度不足，也建議不要連續(xù)培養(yǎng)超過5天；

2. 細胞匯合度較低，但干細胞集落過大，中央細胞生長不良；

二.傳代間隔和比例

1. 可根據細胞生長狀態(tài)和實驗需求按1:5~1:20的比列進行傳代；

2. 如果細胞正常，克隆匯合度85%, 大小均勻，建議按照1:10進行傳代；

3. 如果密度偏低，則可降低傳代比例，密度偏高，則增加傳代比例。