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2021
12-27

徠卡共聚焦課堂第四講：熒光壽命-一個適當?shù)倪x擇
SP8FALCON-即時產生熒光壽命成像（FLIM）我們經常聽到別人抱怨熒光壽命測量：“壽命分析太復雜了！”但這種情況即將改變！新技術和新概念的發(fā)展促進了數(shù)據評估，意味著熒光壽命成像(FLIM)的速度提高了10倍，可以媲美標準共聚焦成像，且操作簡單。圖為小鼠胚胎的壽命圖像。722個視野拼接，擬合出4個獨立的特征壽命。采集時間約1小時-傳統(tǒng)方法約1天。熒光成像遠超您的想象！熒光過程提供了兩個用于成像的測量參數(shù)：強度和熒光壽命。熒光壽命是指分子停留在激發(fā)態(tài)的時間?？梢酝ㄟ^觀察足夠大量的激發(fā)-發(fā)射事件
2021
12-23

徠卡共聚焦課堂第三講：光路篇
共聚焦顯微鏡是指一類可以記錄光學切片的特殊光學顯微鏡。通過照亮和觀察單個衍射極限點，在激光共焦系統(tǒng)中實現(xiàn)光學切片。這需要兩個光束段焦點一致，因此是“共焦的”。與寬場圖像相反，共聚焦圖像沒有散焦模糊情況。這本身就是一個優(yōu)勢，因為樣品深層的圖像顯示清晰，細節(jié)豐富。然而，最重要的優(yōu)勢是其具有微觀特征的三維可視化潛力。沿三維（z-stack）采集圖像序列后，由計算機重建和顯示三維物體。共焦照明，通過將光源聚焦在小孔徑（針孔）上，然后聚焦到樣品中，實現(xiàn)點光源照明。當孔徑足夠小時，照明點僅受衍射限制，不受光
2021
12-23

正置顯微鏡使用前要做好哪些工作
正置顯微鏡是物鏡的鏡頭向下的，物鏡的鏡頭下是顯微鏡載物臺，被觀察物放置在載物臺上并且處于物鏡下端，這種結構決定了被觀察物的厚度不能過厚，一般在2CM以內，超過2CM的話被觀察物可能無法放置到載物臺同物鏡之間，或是超出焦距范圍，無法聚焦成像，此種情況下就可采用倒置顯微鏡，倒置顯微鏡物鏡處于載物臺下端。一、操作前準備1、首先根據需要安裝好目鏡，物鏡和光源部分，將準備好的載玻片置于載物臺上2、旋轉物鏡轉換器，將物鏡置于光路中，先自低倍開始，根據被觀察物的特征，依次增高顯微鏡倍數(shù)。3、每次觀察前，先將物
2021
12-22

徠卡共聚焦課堂第二講：激發(fā)篇
從濾光片轉輪到聲光可調濾光器（AOTF）熒光的激發(fā)需要特定顏色的光：既要有效地激發(fā)探針（波長接近探針激發(fā)光譜的最大值），又要留下足夠的空間收集發(fā)射光而不會進入檢測器的光路中。在共聚焦顯微鏡中，通常使用多譜線激光器或激光電池作為激發(fā)光源，這需要設備既能夠自由選擇適合當前實驗所用熒光團的激發(fā)譜線又能夠控制該激發(fā)譜線的強度因為直接在光源處控制強度時，大多數(shù)激光器會出現(xiàn)噪音增強的現(xiàn)象。AOTF（聲光可調濾光器）的引入簡化了濾光過程，同時顯著提高了實驗的靈活性。AOTF對于耦合白激光源是明智選擇。濾光片轉
2021
12-21

徠卡共聚焦課堂第一講：針孔幾何形狀：美的四邊形
共聚焦成像的光學切片要求在光路發(fā)射部分的場共軛平面上有一個小孔。在簡單的情況下，這個孔徑為圓形，允許透射出照亮孔徑的艾里衍射圖案的中心部分?？讖酱笮搫偤每梢酝ㄟ^該圖案（“艾里斑”）的內圈。因此，孔徑的正確大小取決于波長和物鏡的數(shù)值孔徑，因為這些參數(shù)也定義了中間像平面中的（放大）衍射圖案。為了適應不同的顏色和分辨率，檢測針孔應該可變。要獲得精確的圓形孔徑，這意味著在機械設備上提供一組孔徑，以便在需要時可以改變大小。大多數(shù)共聚焦顯微鏡使用一種可調諧針孔代替，通常為雙葉片“虹膜”。因此，孔徑不是圓
2021
12-20

活細胞成像簡介
了解復雜且快速變化的細胞動力學是深入探索生物進程的重要一步。因此，現(xiàn)代生命科學研究越來越需要關注于在分子水平上實時發(fā)生的生理事件。觀察和分析活細胞時面臨的挑戰(zhàn)在固定細胞或組織中，獲取樣品“分子狀態(tài)”的信息已是一項艱巨的任務。如果需要獲取實時信息，，就必須盡可能在實驗過程中保證細胞自然地運行生理機制，因此將加大實驗的困難程度。此外，由于很多生理過程的持續(xù)時間僅有幾秒甚至幾毫秒（例如細胞內離子水平的變化），必須在相對較短的時間內采集大量信息。滿足這些挑戰(zhàn)性需求的一種方法是采用被統(tǒng)稱為活細胞成像的光學
2021
12-07

7個技巧改善神經外科手術中的人體工程學
神經外科醫(yī)生疼痛的常見原因包括頸椎后路或顱窩手術，其會對醫(yī)生的頭部、頸部和手臂造成壓力。長時間的開顱手術需要醫(yī)生在雙臂過伸的狀態(tài)下進行手術。此外，許多神經外科手術都需要長時間站立。所有這些不利姿勢都對外科醫(yī)生的身體造成了嚴重的負擔。例如，頭部每向前移動一英寸，頭部、頸部和上背部肌肉就必須代償性地支撐額外10磅的重量[2]。這可能會引起疼痛，并可能擴展至手臂，或是局部疼痛，并且可能導致頭痛、慢性疼痛和進一步的疲勞。即使是有經驗的外科醫(yī)生，也只有在為其良好身體條件的情況下，才能取得優(yōu)秀的結果。由符合
2021
11-29

如何為目視檢查選擇正確的解決方案
尋找常規(guī)檢查顯微鏡時要考慮的因素本文可幫助用戶在選擇顯微鏡作為常規(guī)目視檢查解決方案時做出決策。其中描述了應考慮的重要因素。在決定哪種顯微鏡適合用戶之前，了解檢查類型和用戶需求是關鍵。顯微鏡應具備實現(xiàn)高效準確檢查所需的性能，且易于學習和操作。根據用戶要求定制并幫助用戶以自信可靠的方式進行檢查至關重要。顯微鏡還應具備可輕松報告和共享結果的功能。最終，應使用所選顯微鏡實現(xiàn)最佳目視檢查。簡介通常借助顯微鏡對質量控制、故障分析或研發(fā)的組件或部件進行目視檢查。所用顯微鏡的性能會對檢查精度和效率產生很大影響。
2021
11-28

熒光顯微鏡的汞燈校準要注意什么
熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡是基于熒光成像進行光度分析的光學測量儀器，廣泛用于生命科學研究和臨床實驗室診斷等領域。熒光顯微鏡的校準熒光顯微鏡比普通顯微鏡復雜，使用也比較麻煩，但只要注意下面幾點，用戶自行作些校準還是很容易的。1、汞燈的校準基于熒光顯微鏡的原理，決定了選用汞燈作為其光源。由于標本產生的熒光比較弱，為了得到較亮的圖像，汞燈的校準至關重要。具體校準步驟如下：①開啟汞燈后，在熒光顯微鏡工作臺上放一張白紙，
2021
11-22

徠卡法醫(yī)學比對顯微鏡---助力得出科學的鑒定結論
法醫(yī)學比對顯微鏡介紹：徠卡FSC、FSM和FSCB系列法醫(yī)學比對顯微鏡可用于檢測彈道、工具痕跡、毛發(fā)、纖維和其他司法鑒定證據，并將提取的證據與所有物中發(fā)現(xiàn)的蛛絲馬跡進行比對。徠卡FS系列法醫(yī)學比對顯微鏡優(yōu)點一、便于記錄配備高性能相機和軟件應用，便于記錄、測量、注釋和存檔精確測量樣本，從不同角度觀察，可以在案例報告上添加注釋利用軟件拼接功能，輕松記錄超大視野利用高分辨率相機，記錄微小的細節(jié)二、多樣化的比對方法利用多功能比對橋，支持多種高精度比對利用可調節(jié)分割線，輕松改變比對方法，協(xié)助您的鑒證工作；
2021
11-17

激光顯微切割技術在中藥方面的應用
激光顯微切割技術是在顯微鏡下，依靠形態(tài)學區(qū)分樣品，依靠高能激光束切割獲取純化樣品技術。徠卡激光顯微切割采用激光掃描式切割和重力法收集相結合，是目前先進的一步法取材方式，實現(xiàn)了取材的精準快速，大大節(jié)省了實驗時間，保護了樣品。在腫瘤研究中，可以利用激光顯微切割獲取不同類型的細胞例如腫瘤細胞，分析腫瘤細胞中的DNA、RNA、蛋白質的變化，進一步了解疾病的發(fā)生、發(fā)展的過程，例如DNA突變、DNA的表達譜研究、蛋白表達譜研究等，同時也能發(fā)現(xiàn)一些診斷和治療的靶點。所有的這些都要求我們的樣品純化，樣品純化了，
2021
11-15

采用徠卡THUNDER-DM6B觀察宿主細胞及其復制過程
冠狀病毒2致重度急性呼吸綜合征(SARS-CoV-2)冠狀病毒2致重度急性呼吸綜合征(SARS-CoV-2)出現(xiàn)于2019年末，并快速傳播。由于其大面積的影響，研究人員對病毒的性質進行了深入的研究以期最終阻止大流行。一個重要的方面是病毒如何在宿主細胞中復制。Ogando及其同事的研究已經揭示了SARS-CoV-2的復制動力學、適應能力和細胞病理學。他們的工具之一是用熒光顯微鏡觀察SARS-CoV-2感染的VeroE6細胞。通過使用前一段時間產生的抗SARS-CoV（2002）的抗體，他們發(fā)現(xiàn)了與
2021
11-03

徠卡課堂 | 金相顯微鏡光學知識講解——體式顯微鏡的照明方式
反射光照明——光源位于樣品的上方環(huán)形燈照明（RL）為大視野提供明亮、均勻的照明。為減少眩光，可使用附加的勻光器和起偏鏡組可以減少不希望出現(xiàn)的光點。同軸照明(CXI)檢查精細隱裂紋和光滑和反光樣品的表面。光線通過光學器件被導入，并被樣品反射，實現(xiàn)較好的照明。近距離垂直照明(NVI)對于帶凹口或深孔的樣品，可實現(xiàn)無陰影照明。點光源照明(SLI)高對比度照明。有靈活的鵝頸，方便引導光線，適用于大部分樣品類型。漫射和高度漫射照明（DI和HDI）克服了彎曲、不平整或反射性樣品背光反射的難題。多對比度照明（
2021
11-01

相分離與顯微成像
相分離/相變（Phaseseparation，PhaseTransition）相分離/相變是近幾年生化、細胞生物學新興且十分火熱的研究領域。Hyman和Brangwynne2009年在Science發(fā)表了題為：GermlinePgranulesareliquiddropletsthatlocalizebycontrolleddissolution/condensation的文章，提出了細胞內通過“相分離”，可以提供一種特定的方式讓細胞內的特定分子聚集起來，從而在“混亂的”細胞內部形成一定“秩序”
2021
10-29

集光：顯微鏡中數(shù)值孔徑的重要性
在試圖區(qū)分顯微鏡下觀察到的樣本細節(jié)時，數(shù)值孔徑（縮寫為‘NA’）是一個重要考慮因素。NA是一個沒有單位的數(shù)，與透鏡收集的光角度有關。在計算NA（見下文）時還考慮了介質的折射率，通過將載玻片或細胞培養(yǎng)容器的折射率與浸沒介質相匹配就可以分辨出樣本的更多細節(jié)。光從一種介質傳播到另一種介質時的行為方式也與NA有關（稱為“折射”）。本文還介紹了折射的簡要歷史，以及這一概念如何成為實現(xiàn)高NA的限制因素。顯微鏡物鏡如果您細看顯微鏡上的物鏡，您會看到鏡筒處銘刻有多種不同的信息和數(shù)字。除了放大倍數(shù)和光學校正外，您
2021
10-28

顯微鏡分辨率：概念、因素和計算
在顯微鏡學中，‘分辨率’一詞用于闡述顯微鏡對細節(jié)進行區(qū)分的能力。換言之，這是樣本內兩個能被觀察人員或者顯微鏡攝像頭區(qū)分的實體點之間的理想的距離。顯微鏡的分辨率本質上與光學元件的數(shù)值孔徑（NA）以及用于觀察樣本標本的光波長有關。此外，我們必須考慮ErnstAbbe于1873年提出的衍射極限。本文章包含了這些概念的歷史介紹并使用相對簡單的術語對其進行了解釋。分辨率與數(shù)值孔徑數(shù)值孔徑（NA）與光通過的介質的折射率（n）以及給定物鏡的孔徑角（α）有關（NA=n×sinα）。顯微鏡的分辨率不僅取決于物鏡的
2021
10-26

熒光顯微鏡應用于細胞內物質的研究
熒光顯微鏡(Fluorescencemicroscope)：熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。細胞中有些物質，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)等主要部
2021
10-26

顯微鏡在工作場所中的人體工程學設計
了解符合人體工程學的操作十分重要工作中要做到佳，人們必須擁有健康的身體：這樣可以在較長的時間內更加專注、更有動力和更高的效率。符合人體工程學設計的工作場所有利于身體健康，符合人體工程學的設計對工作結果有直接的影響，減少了患者住院時間并提高了工作效率。因此，人體工程學配件的支出被可能節(jié)省的費用和工作效率的提高所抵消。在決定購買人體工程學配件時，決策者需要的不僅僅是常識——他們更需要統(tǒng)計數(shù)據。來自奧地利R?this的理療醫(yī)師JohnLudescher提供了有關該主題的信息。JohnLudescher
2021
10-22

體視顯微鏡是一種特殊的變焦距系統(tǒng)
體視顯微鏡是一種特殊的變焦距系統(tǒng)，也是一種具有正象立體感地目視儀器。作為人眼的輔助工具，體視顯微鏡具有工作距離遠、體視感強等特點。體視顯微鏡不僅可以觀察近處物體的微笑細節(jié)，其較強的體視效果還可以克服觀察者長時間單眼觀察造成的疲勞和體視能力下降。隨著體視變倍顯微鏡的不斷發(fā)展，其應用也得到不斷擴展。體視顯微鏡光學結構原理：由一個共用的初級物鏡，對物體成像后的兩個光束被兩組中間物鏡亦稱變焦鏡分開，并組成一定的角度稱為體視角一般為12度~15度，再經各自的目鏡成像，它的倍率變化是由改變中間鏡組之間的距離
2021
09-27

如何才能選到適合你的共聚焦顯微鏡？
共聚焦顯微鏡比寬場顯微鏡具有更多的優(yōu)勢，共聚焦顯微鏡可以對樣品做連續(xù)光學切片并排除非焦平面的信號干擾，為此共聚焦顯微鏡的應用也的確更為普遍。不過市面上各種各樣的共聚焦顯微鏡越來越多，要如何進行選擇呢？共聚焦顯微鏡比寬場顯微鏡具有更多的優(yōu)勢，共聚焦顯微鏡可以對樣品做連續(xù)光學切片并排除非焦平面的信號干擾，為此共聚焦顯微鏡的應用也的確更為普遍。不過市面上各種各樣的共聚焦顯微鏡越來越多，要如何進行選擇呢？在選擇共聚焦顯微鏡時，zui基本也zui重要的考慮因素主要有兩點：您想要研究的樣本類型（如：固定的細

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