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2022
09-26

檢測(cè)員如何做到液相色譜操作游刃有余
液相色譜儀是分析工作者常用的“一門技術(shù)”。本人工作15.5年，深感何時(shí)能將液相做到有“打游戲”感覺(jué)時(shí)，便是到了游刃有余、駕輕就熟的境界?，F(xiàn)今的液相軟件均已具備了強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理功能，如能庖丁解牛般使用，便可將此測(cè)定做到事半功倍、輕松自如。一、水相中的溶質(zhì)溶解方式水相中需溶解的無(wú)機(jī)鹽和表面活性劑等固體溶質(zhì)，建議采用加熱法，不建議采用振搖、超聲等方式。因此種方式的溶解，溶質(zhì)可能處于“臨界膠團(tuán)濃度”，其后一旦遇到某特殊情形（如遇有機(jī)溶劑、溫度劇降等），極易析出少量結(jié)晶；而一旦析出，便將損傷儀器和色譜柱，
2022
09-22

液相色譜使用者必須謹(jǐn)記的秘訣
液相色譜對(duì)于多數(shù)人來(lái)說(shuō)都是很好上手的儀器了，但是就算是用過(guò)幾年、經(jīng)驗(yàn)豐富的分析員都會(huì)習(xí)慣于一些錯(cuò)誤的操作（師傅教錯(cuò)了？），經(jīng)常導(dǎo)致一些儀器故障。方便快捷的分析過(guò)程固然重要，但是為了多做樣品而忽略了一些步驟，往往得不償失，哪些操作不能做？哪些懶兒不能偷？那些小概率的故障師傅沒(méi)教怎么辦？液相使用過(guò)程中有哪四大關(guān)鍵因素要注意？本文一一告訴你哦！流動(dòng)相不過(guò)濾因?yàn)閴m?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾，而常用的方法是濾過(guò)，
2022
09-20

與檢測(cè)器有關(guān)的故障及其排除
1)流動(dòng)池內(nèi)有氣泡如果有氣泡連續(xù)不斷地通過(guò)流動(dòng)池，將使噪音增大，如果氣泡較大，則會(huì)在基線上出現(xiàn)許多線狀“峰”，這是由于系統(tǒng)內(nèi)有氣泡，需要對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行充分的除氣，檢查整個(gè)色譜系統(tǒng)是否漏氣，再加大流量驅(qū)除系統(tǒng)內(nèi)的氣泡。如果氣泡停留在流動(dòng)池內(nèi)，也可能使噪音增大，可采用突然增大流量的辦法除去氣泡(最好不連接色譜柱);或者啟動(dòng)輸液泵的同時(shí)，用手指緊壓流動(dòng)池出口，使池內(nèi)增壓，然后放開?？煞磸?fù)操作數(shù)次，但要注意不使壓力增加太多，以免流動(dòng)池破裂。2)流動(dòng)池被污染無(wú)論參比池或樣品池被污染，都可能產(chǎn)生噪音或基線漂移
2022
09-16

逆流色譜的原理和發(fā)展
逆流色譜的原理和發(fā)展逆流色譜的原理和發(fā)展原文：F.EdwardChouThePrinciplesａndDevelopmentofCountercurrentChromatography逆流色譜的原理和發(fā)展任何熟悉液液萃取(使用分液漏斗)和色譜(例如HPLC)技術(shù)的人都很容易理解逆流色譜液液萃取的原理(countercurrentchromatography(CCC))。液液萃取為化學(xué)家們分離大量的化學(xué)物質(zhì)提供了一個(gè)簡(jiǎn)單的方法，而且使用的溶劑最少。把樣品溶在兩相溶劑系統(tǒng)中，振搖使兩相充分混合，靜置
2022
09-15

制備液相色譜儀注意事項(xiàng)
制備液相色譜儀廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加，制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴(kuò)大發(fā)展。制備液相色譜儀注意事項(xiàng):一、加裝保護(hù)柱保護(hù)柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污然,因此,加裝保護(hù)柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時(shí)更
2022
09-13

如何判斷色譜柱什么時(shí)候該換新柱了？
色譜工作者常會(huì)碰到這樣的問(wèn)題，什么時(shí)候該換色譜柱了?色譜柱的塔板數(shù)能體現(xiàn)色譜柱的狀態(tài)嗎?確定表明一支色譜柱應(yīng)該“退休”的標(biāo)準(zhǔn)，從經(jīng)驗(yàn)來(lái)看，當(dāng)一支色譜柱的塔板數(shù)降低到新柱子時(shí)的百分之多少時(shí)就可以認(rèn)為該色譜柱不能再使用了呢?只看塔板數(shù)作為評(píng)價(jià)色譜柱質(zhì)量的指標(biāo)合適嗎?在您的實(shí)驗(yàn)室里是如何判斷一根色譜柱不可以再用了呢?塔板數(shù)是一個(gè)粗略的指標(biāo)，不能作為評(píng)價(jià)色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。通常使用塔板數(shù)來(lái)考察色譜系統(tǒng)：將新柱子接到儀器上，根據(jù)色譜柱生產(chǎn)商提供的測(cè)試條件測(cè)試該色譜柱，你應(yīng)該得到和分析報(bào)告上同樣的結(jié)果。最差也應(yīng)該
2022
09-06

毛細(xì)管分析常見問(wèn)題的解決
一、峰丟失可能的原因及應(yīng)采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器驗(yàn)證。2.未接入檢測(cè)器，或檢測(cè)器不起作用，檢查設(shè)定值3.進(jìn)樣溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調(diào)整4.柱箱溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調(diào)整5.無(wú)載氣流，檢查壓力調(diào)節(jié)器，并檢查泄漏，驗(yàn)證柱進(jìn)品流速6.柱斷裂，如果柱斷裂是在柱進(jìn)口端或檢測(cè)器末端，是可以補(bǔ)救的，切去柱斷裂部分，重新安裝二、前沿峰1.柱超載，減少進(jìn)樣量2.兩個(gè)化合物共洗脫，提高靈敏度和減少進(jìn)樣量，使溫度降低10~20度，以使峰分開3.樣品冷凝，檢查進(jìn)樣口和柱溫，如有必要可升
2022
09-05

色譜柱正向使用反向沖洗優(yōu)勢(shì)和原理
先說(shuō)說(shuō)柱子能不能反沖的問(wèn)題，色譜柱到底能不能反沖?如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會(huì)有什么問(wèn)題的，從填料流失的角度來(lái)說(shuō)，粒徑為5um，而篩板孔徑為2um，這種情況下正沖反沖都不會(huì)造成填料的流失;此外，從柱子裝填的角度來(lái)說(shuō)，裝柱時(shí)是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的，與反沖時(shí)的液體流路方向相同，裝柱時(shí)那么高的壓力(通常大于40MPa)下用頂替液沖刷都沒(méi)有問(wèn)題，難道區(qū)區(qū)1ml/min流速下的十幾個(gè)MPa會(huì)造成柱床松動(dòng)?更何況反沖時(shí)通常用的要么是90%水、要么是90%或純的有機(jī)相，這么低的壓力又能對(duì)柱
2022
09-02

色譜分析方法偏離的限度∶pH值&流速&柱溫&進(jìn)樣量
在色譜分析域中，允許實(shí)驗(yàn)室出于提高檢測(cè)性能與效率的需要，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法或方法中規(guī)定的儀器操作條件進(jìn)行調(diào)整，但不能超出一定的規(guī)定。超出一定的調(diào)整都視為方法變動(dòng)。1、HPLC流動(dòng)相的pH值流動(dòng)相制備過(guò)程中，水溶性緩沖液pH值可在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值的±0.2pH單位范圍內(nèi)調(diào)整。2、HPLC緩沖液中鹽的濃度流動(dòng)相制備過(guò)程中，如果pH值變化滿足要求，則水溶性緩沖液中鹽濃度可在±10%范圍內(nèi)調(diào)整。3、HPLC流動(dòng)相中各組分的比例流動(dòng)相中組分的增減可以達(dá)到該組分在組成中所占比例的30%以上。流動(dòng)相中占較高比例的組分，調(diào)整
2022
08-31

教你如何選購(gòu)高效液相色譜
高效液相色譜系統(tǒng)一般由高壓輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測(cè)器是關(guān)鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、預(yù)柱或保護(hù)柱、柱溫控制器等。一、高壓輸液泵泵的種類很多，按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵；恒流泵按結(jié)構(gòu)又可分為螺旋注射泵、柱塞往復(fù)泵和隔膜往復(fù)泵。恒壓泵受柱阻影響，流量不穩(wěn)定；螺旋泵缸體太大，這兩種泵已被淘汰。目前應(yīng)用最多的是柱塞往復(fù)泵。二、進(jìn)樣器高效液相色譜早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器，裝在色譜柱入口處?，F(xiàn)在大都使用六通進(jìn)樣閥或自
2022
08-29

氨基柱測(cè)蔗糖是正向還是反向系統(tǒng)
氨基柱既可以正相使用，也可以反相使用，但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中，例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，但也有例外，像安捷倫的氨基柱保長(zhǎng)期保存要保存在純乙腈中，具體哪個(gè)廠家的柱子的保存方法要看柱子的說(shuō)明書，根據(jù)要求來(lái)保存。說(shuō)一下氨基柱的使用注意事項(xiàng)。1.正相使用1.1新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體
2022
08-28

分析型等度系統(tǒng)的組成和特點(diǎn)詳細(xì)介紹
分析型等度系統(tǒng)由高壓輸液泵、檢測(cè)器、進(jìn)樣閥、溶劑托盤（瓶）、色譜柱、工作站軟件等組成；安裝、調(diào)校及使用都非常簡(jiǎn)單。本套系統(tǒng)運(yùn)行可靠，操作方便，能夠勝任常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的使用要求。分析型等度系統(tǒng)的特點(diǎn)：優(yōu)化的輸液泵雙柱塞桿串聯(lián)設(shè)計(jì)，采用凸輪驅(qū)動(dòng)，懸浮式柱塞導(dǎo)向的安裝方式，數(shù)字脈動(dòng)阻尼器，使得輸液脈動(dòng)更底；步進(jìn)電機(jī)細(xì)分控制使泵運(yùn)行平穩(wěn)；進(jìn)口高質(zhì)量柱塞桿和密封圈，大大提高了儀器穩(wěn)定性和耐用性。保證系統(tǒng)低故障率，安全可靠性。穩(wěn)定可靠的溶液輸送系統(tǒng)，色譜泵持續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)，滿足實(shí)驗(yàn)室任何苛刻需求。優(yōu)質(zhì)的單向閥，保證液體
2022
08-24

流動(dòng)相使用注意事項(xiàng)
1.流動(dòng)相溶劑應(yīng)選擇HPLC的溶劑或依此為標(biāo)準(zhǔn)的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過(guò)濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內(nèi)，為了防止雜物（固體）進(jìn)入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過(guò)，這會(huì)導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過(guò)濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時(shí)，或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡，會(huì)導(dǎo)致泵誤動(dòng)作和輸液不暢，檢測(cè)器產(chǎn)生噪聲信號(hào)等。2.流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別
2022
08-22

液相常見問(wèn)題10小問(wèn)！
1.如何進(jìn)行色譜柱的維護(hù)？①建議檢測(cè)前樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾。②建議每天做完樣品后及時(shí)進(jìn)行清洗。③常規(guī)檢測(cè)：測(cè)試完后直接把色譜柱反向連接采用90%有機(jī)相沖洗45min，最后保存在純甲醇或純乙腈中。④使用緩沖鹽條件：a等度條件：使用緩沖鹽之前和之后都用過(guò)渡流動(dòng)相以1ml/min流速?zèng)_洗45min。b梯度條件：使用緩沖鹽之前與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1ml/min流速?zèng)_洗45min。注意：過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相比例與分析流動(dòng)相相同比例，只是不含有緩沖鹽。緩沖鹽沖洗干凈后，采用90%有機(jī)相反
2022
08-18

HPLC的酸清洗和鈍化
核心提示：HPLC系統(tǒng)內(nèi)部可能的污染物來(lái)自人的觸摸，暴露在實(shí)驗(yàn)室化學(xué)環(huán)境，與零部件制造相關(guān)的殘留物，或來(lái)自先前的流動(dòng)相和樣品的殘余物。HPLC系統(tǒng)內(nèi)部可能的污染物來(lái)自人的觸摸，暴露在實(shí)驗(yàn)室化學(xué)環(huán)境，與零部件制造相關(guān)的殘留物，或來(lái)自先前的流動(dòng)相和樣品的殘余物。雖然HPLC系統(tǒng)自身也會(huì)逐步地被流動(dòng)相清洗，但某些釋放出的雜質(zhì)會(huì)吸附在色譜柱上以及檢測(cè)器潤(rùn)濕的表面上，因而會(huì)降低總的性能。?磷酸清洗：通常用于從系統(tǒng)中除去有機(jī)雜質(zhì)。可能是由于洗滌作用，它似乎比強(qiáng)有機(jī)溶劑更好也更快。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前
2022
08-18

實(shí)驗(yàn)室制備梯度系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)和主要特性是怎樣的
實(shí)驗(yàn)室制備梯度系統(tǒng)由梯度線圈、梯度控制器、數(shù)模轉(zhuǎn)換器（DAC）、梯度放大器（又稱梯度電源）和梯度冷卻系統(tǒng)等部分組成。梯度線圈和放大器均有雙套設(shè)計(jì)方案，現(xiàn)有MRI設(shè)備中按照其梯度組合方式和工作模式可分為單梯度放大器單梯度線圈、雙梯度放大器單梯度線圈、單梯度放大器雙梯度線圈等三種梯度類型MRI設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室制備梯度系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)：分離效果好，可一次獲得較純顆粒；適應(yīng)范圍廣，既能分離具有S差的不同顆粒，又能分離有一定浮力密度差的顆粒；能保持顆?；钚裕环乐挂研纬傻膮^(qū)帶由于對(duì)流而引起混合。實(shí)驗(yàn)室制備梯度系統(tǒng)的主
2022
08-17

液相色譜法方法驗(yàn)證操作詳解，手把手教你液相色譜方法驗(yàn)證！
研究?jī)?nèi)容操作過(guò)程一般技術(shù)要點(diǎn)說(shuō)明方法摸索優(yōu)化目標(biāo)優(yōu)化梯度條件，確定分析波長(zhǎng)。1、樣品溶劑選擇；2、濾膜吸附試驗(yàn)；3、DAD檢測(cè)器下，波長(zhǎng)選擇主成分最大吸收或平臺(tái)處。4、分離條件選擇；5、色譜柱對(duì)比；（根據(jù)情況酌定）6、DAD檢測(cè)器下，水、1mol/l酸、堿、氧（10%雙氧水）、光照、高溫破壞，各起始物料，中間體，輔料（制劑研究時(shí)需同時(shí)進(jìn)行空白輔料破壞）等成分分離。1、一般在無(wú)參考標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)的方法無(wú)法直接套用時(shí),需進(jìn)行此項(xiàng)研究?jī)?nèi)容，如3類藥。2、樣品溶劑：對(duì)樣品有很好的溶解能力，實(shí)驗(yàn)室自然放置穩(wěn)定
2022
08-15

高效液相色譜儀常用檢測(cè)器及其性能
液相色譜檢測(cè)器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的信號(hào)，常用檢測(cè)器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。1、紫外吸收檢測(cè)器紫外吸收(UV)檢測(cè)器是目前HPLC應(yīng)用廣泛的檢測(cè)器。其工作原理是朗伯-比爾定律。這種檢測(cè)器靈敏度高，線性范Χ寬，對(duì)流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。紫外吸收檢測(cè)要求被檢測(cè)樣品組分有紫外-可見光吸收，而使用的流動(dòng)相無(wú)吸收，或在被測(cè)組分吸收波長(zhǎng)處無(wú)吸收。一般選擇在欲分析物有最大吸收的波長(zhǎng)處進(jìn)行檢測(cè)，以獲得最大靈敏度和抗干擾能力。在?有最大吸收時(shí)，可
2022
08-12

液相色譜瓶的清洗方法
方法一：1、倒干色譜樣品瓶?jī)?nèi)試液。2、全部浸入95%酒精，超聲洗2次后倒干，因?yàn)榫凭走M(jìn)入1.5mL的小瓶，且能與大多數(shù)有機(jī)溶劑互溶以達(dá)到。3、倒入清水，超聲洗2次。4、倒干瓶?jī)?nèi)洗液，于110攝氏度烘1~2小時(shí)，絕對(duì)不能于高溫下烘烤。5、冷卻，保存。方法二：1、自來(lái)水沖洗幾遍。2、放入倒有純水的燒杯中，超聲15分鐘。3、換水，再超聲15分鐘。4、泡在倒有無(wú)水乙醇的燒杯中。5、最后取出自然風(fēng)干。方法三：1、先用甲醇（色譜純）浸泡，并超聲清洗20分鐘，后將甲醇倒干。2、再將色譜樣品瓶?jī)?nèi)注滿水，超聲清
2022
08-10

這些異?，F(xiàn)象可能是流動(dòng)相脫氣不足，你知道嗎？
液相色譜流動(dòng)相使用前為什么要脫氣？脫氣有什么作用？如何脫氣？脫氣不足可能造成哪些異?，F(xiàn)象？（1）脫氣的必要性：a.氣泡會(huì)增加基線的噪聲，造成靈敏度下降，甚至無(wú)法分析（噪聲增大，基線不穩(wěn)，突然跳動(dòng)）。b.溶解的氧氣還會(huì)導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化，溶解的氧氣與色譜柱中固定相（如烷基胺）發(fā)生反應(yīng)，柱效降低從而改變柱的分離性能。c.溶解氧能與某些溶劑（如甲醇、四氫呋喃）形成有紫外吸收的絡(luò)合物，絡(luò)合物會(huì)提高背景吸收（特別是在260nm以下），并導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度的輕微降低，會(huì)在梯度淋洗時(shí)造成基線漂移或形成鬼峰（

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