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上海研生實業(yè)有限公司
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淋巴細胞亞群的計數2015/07/13
外周血中存在幾種成熟的淋巴細胞亞群。78組成這些亞群的有:具多種不同功能的胸腺淋巴(T)細胞;合成和分泌特異性抗體,來源于淋巴結的(B)淋巴細胞;null細胞(也叫第三群細胞),它參與抗體介導的細胞毒作用及自然細胞毒作用(自然殺傷細胞)。這些亞群是根據結合在細胞膜上的一個或多個糖蛋白而定義的。根據簇設計和表達各種抗原的細胞類型,可以在附錄的CD分子表中,找到這些糖蛋白的列表。這些糖蛋白許多都被認為對分子功能很重要。但在T淋巴細胞中,一個單獨的細胞表面糖蛋白的出現并不能說明細胞的功能特征。79.8
體視學幾何探針技術2015/07/10
利用幾何探針進行二維參數計數ELISA試劑盒1.測試點計數計數位于所有特征結構斷面內的測試點數。2.交叉點計數計數測試線與所測特征結構斷面邊界線之間形成的交叉點數。3.輪廓計數計數位于測試框“內”的所測特征結構斷面的數量。不論在二維還是三維定量信息的計算中,人們一般認為只要定量,則需計數數以千計的點,但事實并非如此。為了估算的準確性,在體視學計算時,一個zui重要的方面是抽取足夠的觀察視野,以減少由于視野之間的差異所造成的誤差。在一個標本(如一只動物)計數100―200個特征物斷面即可。如果每個
常用抗體標記熒光染料的方案選擇2015/07/08
紅色(568-594nm處激發(fā))CF568、AlexaFluor?568,ATTO565,RhodamineRed等568nm處紅色熒光染料;CF568染料耐光性;水溶性;比AlexaFluor568標記的抗體亮度更亮;CF594、AlexaFluor?594,ATTO?594,DyLight?594,TexasRed等zui亮紅色熒光染料;CF594由于其高量子產量和優(yōu)異的水溶性而比AlexaFluor594明亮2~4倍。同時CF594對光極其穩(wěn)定,使它能被理想地應用于諸如共聚焦顯微鏡和單分子
PBS清洗方式的選擇和時間的選擇2015/07/06
PBS的清洗方式選擇、次數和時間的選擇?單獨沖洗,防止交叉反應造成污染。臨床上每天檢測的病例很多,所用的抗體種類及項目也多,如果在加入一抗孵育完后,將它們在一個缸內洗,這樣就會造成交叉污染,影響zui后的結果。正確的做法是單獨地進行沖洗,沖洗的PBS為一次性,保證切片沒有相互交叉污染的機會。ELISA試劑盒溫柔沖洗,防止切片的脫落。沖洗切片,取出切片,將PBS從上輕輕地沖洗,讓PBS自上而下流下來,不要拿起切片將PBS對準切片沖洗,這樣由于沖出的PBS有一定的沖擊力,很容易使切片周邊引起松動,導
酵解反應與洋菜膠體電泳的儀器用具2015/07/03
本實驗以BamHI與HindIII酵解pBlueGus,并以洋菜電泳分析產物。ELISA試劑盒儀器用具:微離心機;37℃恒溫水槽;MupidII迷你電泳槽及鑄膠器;UVtransilluminator;防護面罩;拍得相機藥品試劑:質體pBlueGusDNA;限制酶BamHI與HindIII(Roche);10×Reactionbuffer2(Roche);10×Reactionbuffer3(Roche);Agarose;1×TAE電泳緩沖液;DNA分子標記(DNA/HindIII或100bpl
3種透析袋的區(qū)別2015/06/29
透析袋的區(qū)別纖維素透析袋再生纖維素透析袋普通型透析袋ELISA試劑盒化學兼容性適用于:甲醇,乙醇和異丙醇等低碳醇(短時間、低濃度)。不適用于:強極性溶劑(如丙酮,甲乙酮,二惡烷)適用于:烴,鹵代烴,醇,酮,酯,氧化物,含氮溶劑。不適用于:鹽酸(濃度25%),硝酸(濃度25%),96%硫酸,25%高氯酸,1N氫氧化鉀和10%的苯酚水溶液。與很多鹽兼容,比如CaCl2、(NH4)2SO4,還可與分子生物學和酶學常用的水溶劑和有機溶劑兼容,如異丙醇、乙醇、丙酮。有機抗性中等好好污染物水平不含重金屬和硫
細胞復蘇5步驟2015/06/24
1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入細胞培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)
基因工程技術制備2015/06/19
80年代后人們開始使用基因工程技術制備抗體,并進而將抗體分子片斷與其它蛋白(或另一種抗體分子)融合得到多功能試劑,到目前為止,基因工程抗體在免疫測定上的應用尚處于一個初級階段。且主要是將抗體與其它蛋白以融合蛋白形式表達而得到多功能試劑,如澳大利亞學者應用基因工程技術制備了抗人紅細胞抗體與HIV-1gpN41的融合蛋白。這種重組蛋白,即基因工程雙功能試劑,在此基礎上,建立了快速,靈敏和特異的自身紅細胞凝集試驗(AGEN).3.1HIV-Elisa抗原/抗體試劑1998年,美國首先研制第四代試劑,對
ELISA中Z的酶和底物2015/06/17
酶和底物在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。(1)HRP:是一種糖蛋白,含糖量約18%,分子量為44kD,在蔬菜作物辣根中含量很高。HRP是一種復合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結合形成一種卟啉蛋白質。主酶為五色糖蛋白,在275nm波長處有zui高吸收峰;輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán),是酶的活性基團,在403nm波長處有zui高吸收峰。HRP的純度用純度值(reinhartzahl,RZ)表示,RZ=A403nm/A275nm,即403nm的吸光度與280nm的吸光度之比,高純度
有一種培養(yǎng)基中可以省去加酚紅2015/06/16
哪種培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?酚紅在培養(yǎng)基中用作PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。英文名稱MouseThyroglobulinELISAKit小鼠甲狀腺球蛋白(TG)規(guī)格:96T/48T英文名稱MouseThyroid-PeroxidaseELISAKit小鼠甲狀腺過氧化物酶(
ELISA重復性較差的有哪些原因2015/06/15
ELISA重復性較差,可能的問題有:1、保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致;重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。2、樣品數量多少不一,加樣時間有長有短;所以重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。3、加樣量不一致;樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。英文名稱Mousehemeoxygenase-1ELISAKit小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)規(guī)格:96T/48T英文名稱MouseVWFELISAKit小鼠血管性
細胞培養(yǎng)中血清使用的缺點2015/06/12
血清成分復雜,雖含許多對細胞有利成分,也含有對細胞有害的成分,使血清有幾個明顯的缺點:●對大多數細胞,在體內狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態(tài),血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞)。●血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌毒素等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡?!袢〔?
抑制PP2Cs蛋白的活性來調控ABA信號通路2015/06/11
PYR/PYLs通過抑制PP2Cs蛋白的活性來調控ABA信號通路。而PP2Cs蛋白在ABA信號的傳遞過程中扮演關鍵角色。本結果發(fā)表在Science雜志上,論文的*作者——SeanCutler,敏銳的意識到先前在ABA研究領域的可疑數據,所以他采取了一種與眾不同的步驟,與其他競爭者分享其數據,并在結果公布前將競爭者變成合作者。在一篇新聞稿中,加州大學植物細胞生物學中心的主任、也是論文的作者NatashaRaikhel說:“多篇論文已試圖為其發(fā)現的ABA受體做出辯護,但他們的研究結果并未經受住時間的
幽門螺旋桿菌能適應多變條件2015/06/10
幽門螺桿菌是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細菌。長2.5~4.0μm,寬0.5~1.0μm。革蘭染色陰性。有動力。在胃粘膜上皮細胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。在固體培養(yǎng)基上生長時,除典型的形態(tài)外,有時可出現桿狀或圓球狀。幽門螺旋桿菌感染大約一半的人口,能在胃中的酸性條件下生存。該細菌的大多數攜帶者是沒有癥狀的,但有些人則會有炎癥、潰瘍和胃癌?,F在,利用一種選擇主轉錄體的5'端的新方法,研究人員已經確定了幽門螺旋桿菌(主要是未經處理的信使RNA和小型非編碼RNA)在各種不同生長條件下的“
SH2B1與肥胖和2型糖尿病的發(fā)生密切相關2015/06/09
SH2B是一類含有SH2(Srchomology2)和PH(pleckstrinhomology)結構域的信號接頭蛋白(Adaptor),在生長發(fā)育、代謝平衡和免疫調節(jié)等多方面發(fā)揮重要的調控作用。在哺乳動物中,SH2B家族成員SH2B1能夠促進脂肪因子瘦素在中樞神經系統(tǒng)中的信號轉導功能,是體重調節(jié)的重要調控因子。zui近人類全基因組掃描研究表明,SH2B1與肥胖和2型糖尿病的發(fā)生密切相關?!都毎x》(CellMetabolism)雜志近日發(fā)表了中科院上海生科院營養(yǎng)科學研究所劉勇研究組和中科院
細胞如何在惡劣條件下存活2015/06/08
來自瑞士蘇黎世大學(UniversityofZurich)分子生命科學研究所,冷泉港實驗室等處的研究人員發(fā)現低氧誘導因子HIF的雙面作用,在低氧條件幫助細胞存活,但是在腫瘤細胞中若打開時卻會成為一個潛在殺手。這一研究成果公布在Nature雜志上。在這篇文章中,研究人員通過對模型生物線蟲進行分析,發(fā)現HIF-alpha抑制p53調控的細胞凋亡(或稱細胞自殺),后者通常阻止其中DNA已受損的生殖細胞發(fā)生癌變。令人吃驚的是,HIF只在兩種神經元中發(fā)揮作用,激發(fā)一種在線蟲的很多其他細胞中抑制細胞死亡的酪
一種能夠有效殺滅癌細胞的免疫反應2015/06/05
一項在小鼠中的新的研究報告說,用沙門氏菌治療腫瘤可誘發(fā)一種能夠有效殺滅癌細胞的免疫反應。在本研究中,該團隊發(fā)現,來自小鼠和人的感染了沙門氏菌的黑色素瘤細胞可增加在這些細胞中的連接蛋白43的含量。其結果是新的間隙連接形成了,它使得染有黃色熒光的小分子能夠在腫瘤細胞之間通行或從腫瘤細胞進入免疫細胞。但是研究人員希望查明,這種可使腫瘤肽進入免疫細胞的間隙連接也會在活體動物中出現。因此,他們對患癌的小鼠進行了沙門氏菌的治療并觀察到,正如在實驗室的分離細胞中所觀察到的,這些腫瘤肽可通過間隙連接而進入到免疫
細胞凋亡的降解過程2015/06/04
研究首先發(fā)現該基因與凋亡細胞的降解過程有關。rab-14在線蟲的吞噬細胞中起作用,它與另外一個之前由王曉晨實驗室和Dr.ZhengZhou實驗室同時發(fā)現的RabGTPase2/UNC-108并行作用,共同調節(jié)吞噬小體的酸化。另外,RAB-14和UNC-108還與RABGTPase7一起調節(jié)吞噬小體與溶酶體的融合過程。RAB-14和UNC-108并行作用,先介導溶酶體附著到吞噬小體表面,隨后RAB-7介導附著的溶酶體膜泡與吞噬小體融合,并zui終降解凋亡細胞。凋亡細胞的吞噬降解過程是整個細胞死亡程
腦癌驅動基因2015/06/03
由于患者的腫瘤是由不同的驅動基因驅動,ELISA研究人員認為個體化的膠質母細胞瘤治療將需要通過復雜的分析才能成為現實。首先,必須對患者腫瘤中的所有基因進行測序及分析,確定它的驅動基因。“在某些腫瘤中驅動基因很明顯,但在另一些腫瘤中,卻很難找到驅動基因,”Iavarone博士說。一旦確定了候選驅動基因,就必須用分離自患者腫瘤的癌癥干細胞進行實驗室測試證實。Lasorella博士說:“癌癥干細胞是腫瘤侵襲性的細胞,是癌癥治療的關鍵靶細胞。在癌癥干細胞中證實可成功擊中驅動基因,能夠減緩細胞培養(yǎng)物和動物
人E選擇素的使用目的2015/06/02
使用目的:本ELISA試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中E選擇素(Es)含量。本ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人E選擇素(Es)水平。用純化的人E選擇素(Es)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入E選擇素(Es),再與HRP標記的E選擇素(Es)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。HumanC4bindingprotein,C4BPELISAKit人
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