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收集血漿樣本如何選擇抗凝劑2016/04/27: 收集血漿樣本時(shí)為什么要加抗凝劑？顧名思義，抗凝劑就是為了防止血液凝固的。采集血液zui關(guān)鍵的問(wèn)題是抗凝，采用什么方法進(jìn)行抗凝，則根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求和條件而定。加了抗凝劑后，血液在一定的時(shí)間內(nèi)會(huì)保持原來(lái)的物理化學(xué)狀態(tài)。如果沒(méi)加抗凝劑，血漿是凝聚在一起的，不好測(cè)定。常見(jiàn)的抗凝劑有哪些，該怎么選擇？各自又有什么優(yōu)點(diǎn)？（1）肝素抗凝：采血時(shí)，使每ml血液含15U~20U肝素即可。計(jì)算采集的血液量，按1000U/ml的量加入肝素，直接放入采血容器中，采血時(shí)，邊采血邊輕輕搖動(dòng)，使抗凝劑和血液混勻。對(duì)于采少量的血

上海恒遠(yuǎn)技術(shù)重點(diǎn)講談ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方案2016/04/26: 我公司成立至今七年之久，在前面的內(nèi)容中我司為大家介紹了許多相關(guān)操作方法、操作技巧、經(jīng)驗(yàn)總結(jié)等，有愈多用戶反應(yīng)從中學(xué)到了不少知識(shí)。在今天的內(nèi)容中，上海恒遠(yuǎn)生物為大家重點(diǎn)講談ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方案。一、雙抗體夾心法1.測(cè)抗原①將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。②加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。③加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶

ELISA試驗(yàn)條件如何選擇？2016/04/19: 1．固相載體的選擇載體的種類(lèi)很多，其中包括纖維素、交聯(lián)右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。從使用形式上可有凹孔平板、試管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是應(yīng)用zui廣泛的一種載體。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好，操作簡(jiǎn)便、用量小，適于大批檢查。由于聚苯乙烯的工藝過(guò)程不夠穩(wěn)定,造成各批次差異較大。所以進(jìn)行ELISA之前，必須進(jìn)行篩選。檢查方法：⑴吸附性能的檢查：先加抗體包被，然后加入同一稀釋度的酶標(biāo)抗體，zui后加底物、顯色、測(cè)OD值,求出總平均OD值,再求出每相鄰兩孔的OD平均值,此均值在

丙二醛“MDA”指標(biāo)含量檢測(cè)操作方法2016/04/15: 測(cè)試所需儀器設(shè)備：可見(jiàn)光分光光度計(jì)，可調(diào)到95℃左右的恒溫水浴箱（或者鋁鍋內(nèi)放幾個(gè)去掉蓋子的易拉罐，將罐壁及底部穿數(shù)十個(gè)孔，以便水的進(jìn)入，用來(lái)代替水浴箱）。離心機(jī)。一、旋渦混勻器混勻，試管口用保鮮薄膜扎緊，用針頭刺一小孔，95℃水浴（或用鍋開(kāi)蓋煮沸40分鐘），取出后流水冷卻，然后3500～4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上清液，532nm處，1cm光徑，蒸餾水調(diào)零，測(cè)各管吸光度值。二、以a表示所取的樣品量，標(biāo)準(zhǔn)品量，無(wú)水乙醇的量、試劑一的量，四者均相等，例如樣品取0.1mL，則標(biāo)準(zhǔn)品、無(wú)水乙醇及

免疫組化實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題和解決方法2016/04/12: 免疫組化實(shí)驗(yàn)的不順心是否讓你很苦惱，來(lái)看看恒遠(yuǎn)為你支招解決各種免疫組化的疑難雜癥?。∪旧^(guò)強(qiáng)原因解決方法抗體的濃度過(guò)高或抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)降低抗體滴度（一般指濃縮性抗體）抗體孵育時(shí)間：室溫1小時(shí)或4℃過(guò)ye孵育溫度過(guò)高，孵育溫度超過(guò)37℃一般室溫20-28℃DAB顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或DAB濃度過(guò)高顯色時(shí)間不能超過(guò)5-10分鐘，以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)非特異性背景染色原因解決方法操作過(guò)程中沖洗不充分每步?jīng)_洗3×5組織中含過(guò)氧化物酶未阻斷可再配置新鮮3%H2O2封閉，孵育時(shí)間延長(zhǎng)組織中含內(nèi)源性生物素正常非免疫動(dòng)物

免疫球蛋白IgG的作用2016/04/06: 免疫球蛋白(immunoglobulin)指具有抗體活性的動(dòng)物蛋白。主要存在于血漿中，也見(jiàn)于其他體液、組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白(γ-球蛋白)中。免疫球蛋白可以分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類(lèi).本節(jié)內(nèi)容主要為您詳細(xì)介紹IgG相關(guān)作用介紹。人體血清免疫球蛋白的主要成分是IgG，它占總的免疫球蛋白的70-75%，，分子量約15萬(wàn)，含糖2～3%?？贵w分子是由兩對(duì)長(zhǎng)短不同的多肽鏈所組成，四條鏈通過(guò)鏈間二硫鍵構(gòu)成Y型基本結(jié)構(gòu)（H2L2）。IgG分子由4條肽

抗體在這幾種情況下需采用不同方法保存2016/03/31: 不同的抗體產(chǎn)品保存、運(yùn)輸方法也是不同的，保存是否得當(dāng)直接影響到抗體的實(shí)驗(yàn)效果，選對(duì)了保存方法，大部分的抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。今天上海恒遠(yuǎn)為大家?guī)?lái)的資料下載內(nèi)容是相關(guān)抗體的正確保存方法，抗體在這幾種情況下需采用不同方法保存：一、剛收到貨時(shí)需立即保存1.請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心1分鐘后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存。注意：如果抗體體積小于50ul，請(qǐng)延長(zhǎng)離心時(shí)間至5分鐘，以保證全部抗體均離心下來(lái)。2.絕大多數(shù)抗體保存在-20℃是*足夠了，沒(méi)有證據(jù)顯說(shuō)明保存在-80℃會(huì)有更多好處。3.避免將

中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)徐老師咨詢(xún)我司豬相關(guān)病毒檢測(cè)試劑盒技術(shù)問(wèn)題2016/03/30: 本月初，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)徐老師在我司訂購(gòu)了豬五個(gè)指標(biāo)定性elisa試劑盒。分別為：豬藍(lán)耳病毒（PRRS）、圓環(huán)病毒抗體（PCVAb）)、豬瘟（CSF）、輪狀病毒抗體（RVAb）、傳染性胃腸炎病毒抗體（TGEVAb）ELISA試劑盒。上個(gè)星期老師自己完成了檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)備近期開(kāi)始發(fā)布論文?？蛻粲龅郊夹g(shù)問(wèn)題我司*時(shí)間解答，徐老師問(wèn)：包被的抗原都是全病毒嗎，還是截?cái)啾磉_(dá)的蛋白？對(duì)此問(wèn)題我司技術(shù)詳細(xì)答復(fù)問(wèn)題如下：豬藍(lán)耳病毒（PRRS）elisa試劑盒：選定蛋白為GP5豬圓環(huán)病毒抗體（PCVAb）elisa試劑

恒遠(yuǎn)小鼠ELISA試劑盒全面解析，讓您實(shí)驗(yàn)無(wú)憂2016/03/24: 恒遠(yuǎn)小鼠ELISA試劑盒全面解析，讓您實(shí)驗(yàn)無(wú)憂一個(gè)的試驗(yàn)不僅有堅(jiān)固的理論也要實(shí)踐。理論是實(shí)踐的基礎(chǔ)，實(shí)踐是理論的運(yùn)用。但終究選用什么，要依據(jù)試驗(yàn)詳細(xì)來(lái)實(shí)踐。在做ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí)，包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保留抗原很重要。而封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。因此包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來(lái)包。1.供應(yīng)給客戶的進(jìn)口ELISA試劑盒為，絕不弄虛作假，且滿足用戶提出的技術(shù)協(xié)

對(duì)ELISA試劑盒血清標(biāo)本的保存建議2016/03/23: 我公司ELISA試劑盒產(chǎn)品吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體，適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型。其中，血清是zui常見(jiàn)的檢測(cè)標(biāo)本之一，根據(jù)上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)員對(duì)ELISA試劑盒血清標(biāo)本的保存建議有以下幾點(diǎn)：1.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。2.血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離，則可以

ELISA實(shí)驗(yàn)：溫育的溫度和方式有哪些2016/03/16: ELISA實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中：溫育的溫度和方式有哪些以及注意事項(xiàng)，上海恒遠(yuǎn)生物給你全面的解答。溫育的溫度：育常采用的溫度有43、37℃、室溫或4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的溫育溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的zui適反應(yīng)溫度。抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2h產(chǎn)物的可達(dá)，為加速反應(yīng)，可在一定范圍內(nèi)提高反應(yīng)的溫度并在反應(yīng)過(guò)程中連續(xù)振蕩來(lái)增加抗原抗體接觸的概率?？乖贵w反應(yīng)在4℃更為*，形成的產(chǎn)物更多、更穩(wěn)定，但因所需時(shí)間太長(zhǎng)，在ELISA檢測(cè)中一般不予采用。溫育的方式：溫育方式常采用溫箱法、微波輻射法和

影響ELISA結(jié)果準(zhǔn)確性的外在因素2016/03/14: 目前，ELISA方法已被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。在臨床檢驗(yàn)及科研實(shí)驗(yàn)中除正常反應(yīng)外，有時(shí)?？梢?jiàn)到一些錯(cuò)誤結(jié)果。雖然ELISA測(cè)定中影響因素較多，其中包括在操作中有一定的技術(shù)要求，除此之外，外在因素更是影響甚大。本周一，我司技術(shù)部劉老師為廣大科研新手詳細(xì)整理了影響ELISA結(jié)果正確性的外在因素。影響ELISA結(jié)果正確性的外在因素主要有：標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。（1）標(biāo)本溶血：由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可

謹(jǐn)記這六條，簡(jiǎn)單做好ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)2016/03/10: 做出好的ELISA實(shí)驗(yàn)需要做好全面的準(zhǔn)備，而引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有標(biāo)本、試劑、操作這三方面。上海恒遠(yuǎn)技術(shù)專(zhuān)員根據(jù)經(jīng)驗(yàn)為大家總結(jié)出實(shí)驗(yàn)注意，謹(jǐn)記這六條，簡(jiǎn)單做好ELISA實(shí)驗(yàn)！1試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。4洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。5加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)

恒遠(yuǎn)分享防止樣本溶血的采血方法2016/03/07: 3月4日，一周上班的zui后一天。來(lái)自中國(guó)藥科大學(xué)的董老師兔子IL-6，TNF-a及caspase-3三個(gè)指標(biāo)的ELISA試劑盒，老師準(zhǔn)備做40只家兔實(shí)驗(yàn)。每只兔子做兩個(gè)樣本，即前后做對(duì)照。需要采兔血，同時(shí)反映采血分離血清經(jīng)常有溶血現(xiàn)象，血清紅紅的，怎樣才能解決這個(gè)問(wèn)題？很遠(yuǎn)提供建議：可以采用耳靜脈取血法。切開(kāi)耳靜脈時(shí)要十分小心，否則會(huì)將其割斷，無(wú)法再取。如果采血量比較大的話可以使用大白兔心臟穿刺采血的方法。具體如下：先尋找兔子心尖部（也就是尋找心臟搏動(dòng)zui明顯的地方），然后用75%酒精消毒兔

ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌重點(diǎn)之洗滌液的選擇2016/03/02: 在前面的資訊講解中，上海恒遠(yuǎn)生物為大家著重分析過(guò)ELISA試劑盒的洗滌步驟、方法、技巧等相關(guān)內(nèi)容。我們知道洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗，ELSIA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。今天我們一起來(lái)看看上海恒遠(yuǎn)為您帶來(lái)的資訊，ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌重點(diǎn)之洗滌液的選擇：1.某一項(xiàng)目的洗液建議使用該試劑盒內(nèi)的洗液；2.同一ELISA試劑盒洗液用完了，建議采用同一批號(hào)的洗液；3.同一批號(hào)的洗液也用完了，建議采用同一項(xiàng)目的試劑洗液；4.同一項(xiàng)目的洗液用完了，建

ELISA試劑盒冷凍后直接使用有影響2016/02/24: 科研試劑的保存存在一定的特殊性，很多客戶將ELISA試劑盒冷凍保存后擔(dān)心會(huì)有影響。上海恒遠(yuǎn)生物公司建議大家將試劑盒解凍后一次用完。我們知道，一般來(lái)的試劑盒保質(zhì)期在半年到一年，切不可反復(fù)凍融。ELISA試劑盒冷凍后直接使用有影響，對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。正確的操作方法是：先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20分鐘以上后，再進(jìn)行測(cè)定，以使試劑盒在ELISA檢測(cè)試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度，以滿足測(cè)定要求。上

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定的重復(fù)性差是何原因2016/02/18: ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定的重復(fù)性差，這是什么原因造成的？答：試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定的重復(fù)性差，這是典型的由測(cè)定操作引起的問(wèn)題，常見(jiàn)原因如下：a)可能原因：加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；解決方法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密。重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近；重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。b)可能原因：加樣過(guò)快，孔間發(fā)生污染；解決方法：重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致

上海恒遠(yuǎn)簡(jiǎn)述ELISA檢測(cè)試劑盒的歷史與原理2016/01/25: 上海恒遠(yuǎn)簡(jiǎn)述ELISA檢測(cè)試劑盒的歷史與原理ELISA檢測(cè)試劑盒歷史概述：1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測(cè)定的文章，使得1966年開(kāi)始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。ELISA檢測(cè)試劑盒原理：應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。用純化的待測(cè)物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測(cè)物質(zhì)，再與HRP標(biāo)記的待測(cè)物質(zhì)抗體結(jié)

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題和解決方案2016/01/21: *、ELISA試劑盒血清如何避免沉淀物的產(chǎn)生？1.解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法。2.解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生3.請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37攝氏度放置太久，血清會(huì)變得混濁。4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。5.若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56攝氏度，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。第二、ELISA加樣時(shí)如何防錯(cuò)？1.用一張寫(xiě)滿字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過(guò)標(biāo)本的小孔看過(guò)去下面的字會(huì)變

上海恒遠(yuǎn)試劑盒售后解析ELISA測(cè)定結(jié)果2016/01/18: 今早，我公司吳收到由沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)朱老師發(fā)來(lái)的會(huì)話。朱老師在2015年連續(xù)購(gòu)買(mǎi)了6次ELISA試劑盒，上周，朱老師我司技術(shù)說(shuō)想要試試自己配的試劑盒，看看檢測(cè)效果。在朱老師給吳的會(huì)話中表示：“我的這個(gè)檢測(cè)結(jié)果不理想，不知道是哪里出了問(wèn)題。幫我看下是什么原因可以嗎？”我公司試劑盒售后客服吳說(shuō)可以，并為朱老師安排技術(shù)解析Elisa測(cè)定結(jié)果。朱老師的主要問(wèn)題是：我自己合成8個(gè)氨基酸的抗原短肽，和BSA耦連后免疫動(dòng)物，1個(gè)月后用ELISA測(cè)定血清中針對(duì)抗原短肽的抗體滴度，具體步驟：用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后

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