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2020
10-29

如何修|煉成流式高手 - 樣本檢測
新建自動補償實驗問題來了，為什么調電壓就的重新補償？熒光補償的目的就是消除熒光溢漏對數據分析的復雜性，保證檢測結果的準確性。從下面公式（以FITC溢漏到PE通道為例）可以看出，熒光溢漏（補償）的大小和平均熒光強度有直接關系，電壓gain值的大小又影響著MFI的大小。故電壓Gain的大小會直接影響熒光補償值的大小。Tips：補償調節(jié)時要注意：使用未染色的細胞做PMT的電壓設置；不要使用未染色的補償微球設置電壓CytoFLEX支持在線及脫機調補償。多色應用中，增加新的單染管到先前保存的補償實驗中，輕
2020
10-27

速率區(qū)帶離心法 |你的分離純化方法選對了嗎？
密度梯度離心（isodensitycentrifugationmethod）又稱為區(qū)帶離心。該方法的優(yōu)點是可以同時使樣品中幾種或全部組分分離，具有良好的分辨率，分離效果好，可一次獲得較純組分。缺點是離心時間較長，需制備梯度液，操作要求高。按照離心分離原理，密度梯度離心又可分為速率區(qū)帶離心法（ratezonalcentrifugationmethod，R-Z）和等密度離心法(isopycniccentrifugationmethod)。速率區(qū)帶離心也可稱為等區(qū)密度離心，是根據樣品中不同組分粒子所具
2020
10-27

新能源汽車頻頻自燃，如何控鋰電池質量？
近年來，新能源汽車發(fā)展迅速，相比于傳統(tǒng)的燃油車來說，購車可以享受政府補貼，而且不耗油只耗電，養(yǎng)車成本大大降低。因此，新能源汽車頗受歡迎。但是在迅猛發(fā)展的同時，自燃或爆炸等安全事故不斷升級、頻繁發(fā)生，且發(fā)生多起大規(guī)模召回事件，而這些事件的起因多是動力電池系統(tǒng)存在安全隱患。動力電池作為新能源汽車重要的零部件，其安全性和可靠性是新能源汽車生產、研發(fā)、制造及使用過程中的關鍵問題，直接影響著整個新能源汽車行業(yè)的有序發(fā)展。如《創(chuàng)新精|準的鋰離子電池正負極材料粒徑檢測方案》所說，高分辨率的貝克曼LS13320
2020
10-23

如何應對細胞株系開發(fā)數據挑戰(zhàn)
細胞株開發(fā)是眾多具有重大數據挑戰(zhàn)的工作流程之一。與任何篩選過程一樣，樣本通量帶來了數據量的挑戰(zhàn)。當使用多種分析工具以不同格式生成不同類型的數據時，這就變得更加具有挑戰(zhàn)性。這不僅需要在不同的孔板和孔之間移動數據，而且整個過程可能會延長數月。在整個過程中，必須對數據進行追蹤，以確保進入生產的任何細胞株都有必要的歷史數據（例如單克隆性的證明），并且為了報告需要，所有的數據都可以被方便地訪問。在這里，我們將描述在Biomeki7工作站（圖1）上自動化細胞株開發(fā)如何克服與此工作流程相關的許多數據挑戰(zhàn)。圖1
2020
10-22

還在為細胞數量和活率分析的可靠性和一致性煩惱嗎？
還在為細胞數量和活率分析的可靠性和一致性煩惱嗎？讓Vi-CELLBLU幫您消除這些困擾！現在生物藥的制備和生產，基本離不開動物細胞等表達系統(tǒng)，特別是像CHO細胞作為宿主生產治療性單抗藥物，已經在生物制藥企業(yè)普遍使用。上面左圖是Vi-CELLBLU測試CHO細胞的拍攝照片，右圖是癌細胞的拍攝照片（其中綠色為活細胞，紅色為死細胞，）而動物細胞培養(yǎng)過程中細胞數量和活率地準確檢測，將直接影響細胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化、生產條件的改變甚至終生物藥產品的質量，特別是對于直接作為藥物的治療細胞，譬如CAR-T細胞，這
2020
10-22

啤酒終產品和過濾效率的評估
啤酒終產品與過濾效率的評估?在啤酒的釀造和精加工階段，測定啤酒中顆粒的濃度和大小對加工過程的評估和工藝的調整非常重要，同時這些顆粒物也會對啤酒的品質產生影響。介紹啤酒中顆粒的濃度和粒度分布可以通過經典的庫爾特原理（亦稱電阻法/電感應區(qū)法）進行測量分析，測量時僅需要將一定體積的啤酒混懸于合適的電解液中，便可應用貝克曼庫爾特公司的Multisizer系列對啤酒中內容物顆粒的濃度和粒度分布進行分析，分析結果可以在粒度范圍內以每毫升顆粒的數目來表示。Multisizer操作簡便，可以快速、準確檢測啤酒中
2020
10-19

【小貝離心Protocol】無外泌體血清制備
【小貝離心Protocol】超速離心方法制備無外泌體血清以外泌體為代表的細胞外囊泡是近幾年研究的熱點，目前的外泌體研究主要通過研究體外培養(yǎng)細胞來源的外泌體，分析其在體內外的功能作用。一般的血清FBS中含有供體細胞自然分泌的大量Exosomes，而用于Exosome研究的細胞必須提前更換無外泌體的血清進行培養(yǎng)，以減少對后續(xù)實驗結果的污染。目前市面上存在著商業(yè)化的無外泌體血清，然而由于其價格較高等因素，很多研究者選擇自己制備無外泌體血清，而常用的主要是基于超速離心的無外泌體血清分離方法。根據實驗結果
2020
10-19

如何精|確測定AAV病毒載體空殼率？
如何精|確測定AAV病毒載體空殼率？重組腺相關病毒（AAV）作為病毒載體，具有安全性好、特異性強、遞送效率高等特點，為新的、挽救生命的基因治療方法帶來巨大的希望。但是，雖然電鏡等技術可以表征AAV的均一性和聚集狀態(tài)，但它們沒有足夠的分辨率來準確定量病毒顆粒的均一性和有效載量。而解決這一問題的方案是：使用分析型超速離心技術（AUC）表征AAV病毒顆粒特性。正如基因治療研究人員所知道的那樣，在早期產品開發(fā)中有非常多的風險，快速檢測產品質量是至關重要的。但到目前為止，使用之前的技術來檢測臨床級的重組A
2020
10-19

小貝講堂之離心常用術語 - 離心力和相對離心力
小貝講堂之離心常用術語–離心力和相對離心力在生命科學研究中，離心是一種*的技術手段，更是實驗室中|常見的實驗項目。但是你真的了解這門技術嗎？你是否知道離心的原理，了解如何選擇合適的轉頭、離心管和離心方法呢？小貝離心課堂重新開課，帶你玩轉離心機，快來加入我們吧！離心原理學習一門技術勢必要先從了解其原理開始。我們可以通過簡單的實驗來理解離心的基本原理。首先我們來觀察在重力作用下顆粒的沉降：抓一把沙子和泥土的混合物放到裝有水的容器里搖勻，然后把容器置于桌上，觀察到在地球引力作用下大量的顆粒立即沉淀到容
2020
10-19

小貝講堂之離心常用術語 - 沉降系數
離心課堂之常用術語–沉降系數沉降系數迄今為止，離心工作的重點的就是生物顆粒的制備，所以了解顆粒的沉降特性是至關重要的。沉降系數是生物大分子極其重要的物理參數，通過它可以了解生物大分子的相對分子量、分子形狀和水化程度等。早在1940年，Svedberg和Pedersen發(fā)展了用分析超速離心技術來測量生物大分子的沉降系數和分子量，直至目前分析超速離心方法仍然是測定生物大分子沉降系數的金標準。Svedberg在實驗過程中定義了沉降系數（S，Svedberg）：s就是單位離心加速度的作用下顆粒移動的速度
2020
10-16

【離心課堂】超速離心管的分類、材質及耐受性查詢
為方便用戶使用，貝克曼推出無菌無酶離心管：無酶離心管：不含DNA、DNase、RNase、PCR抑制劑或內毒素，防止樣品降解和污染，適用于基因組學、外泌體、蛋白質組學研究過程。無菌無酶離心管：EO（環(huán)氧乙烷）處理，無細菌、真菌、芽孢、酵母等微生物殘留。同時不含DNA、DNase、RNase、PCR抑制劑或內毒素。目前使用頻率較高的超離管均有對應的無酶、無菌無酶離心管。具體貨號信息如下：在選擇離心管時，需要考慮離心管材質與樣品和溶劑的兼容性。貝克曼離心管的化學耐受性查詢可通過“貝克曼庫爾特生命科學
2020
10-15

【離心課堂】差速離心方法
在實驗過程中，由于樣品的各種性質差異，只有選擇了正確的離心方法，才能獲得預期的分離純化結果。常用的離心方法主要有差速離心法、密度梯度離心法。其中密度梯度離心法又可細分為速率區(qū)帶離心和等密度梯度離心法。本期向大家具體介紹離心方法之差速離心。離心方法之差速離心差速離心法(differentialvelocitycentrifugationmethod)又稱離心力差分離法。差速離心法原理利用樣品中各組分沉降系數的差異，對不同的微粒施以不同的離心力，經過多次離心，離心速度逐步加大，將不同的微粒依次沉降，
2020
10-14

【離心課堂】轉頭效率K因子與離心時間
轉頭的k值轉頭的k值（又稱k因子或k系數）用以衡量轉頭的沉淀效率。所有的離心機廠家在轉頭出廠時都計算了制備型轉頭的k值，轉頭k值通過在轉頭運行至|高轉速、離心管裝滿樣品時計算得到的，其計算公式如下：(1)?k–轉頭的k值rmax–大半徑，指旋轉軸到離心管底端的垂直距離rmin–小半徑，指旋轉軸到離心管頂端的垂直距離ω–角速度由于(2)將公式（2）代入公式（1）可得到以下轉頭k值的計算公式：(3)由上得出轉頭k值是與轉頭的|高轉速和形狀有關。|高轉速*一樣的轉頭，離心管與軸的角度越小，也就是rma
2020
10-10

一種讓你快速構建細胞株的策略
細胞株構建是廣大做細胞研究科研工作者及生物技術員常用的一種技術，目的就是通過構建一個高產感興趣蛋白的細胞，而細胞株構建就是實現這個目的的過程。這是一個簡單的操作，卻也是一個復雜的操作。簡單在于，從表面上看，并不需要很高超的操作技巧；復雜在于，這是一個時間周期長、操作步驟多、易污染、易混亂的重復勞動工作。細胞株構建所涉及的流程包括：獲得表達感興趣蛋白的某些細胞；測試表達的蛋白；克隆選擇的細胞；篩選高表達的細胞；優(yōu)化培養(yǎng)條件；放大培養(yǎng)。細胞株構建示意圖在細胞株構建的實驗過程中，首先關鍵要關注的問題是
2020
10-10

液體處理專家如何自動化、標準化捕獲測序文庫制備
目標區(qū)域捕獲測序技術，是根據已知特定基因組區(qū)域序列設計寡核苷酸探針，通過雜交將目標區(qū)域捕獲富集進行二代測序。其針對目標區(qū)域深度測序，增加了檢查靈敏度和準確性。既滿足研究需求，又降低測序成本，在科研、臨床中均備受關注。液體處理專家貝克曼庫爾特推出Biomek自動化捕獲測序方案，幫助您實現自動化、標準化的捕獲測序。由自動化工作站進行基因捕獲，可以減少手工操作時間，提高工作效率，增加結果的重復性和均一性。Biomek工作站可實現從核酸提取，文庫構建，定量混樣到捕獲的整體實驗流程。Figure1.捕獲測
2020
09-23

如何煉成流式高手-樣本制備.臨床篇
在日常的臨床樣本處理中，你是否也遇到如下煩惱呢，kappa/lambda染色結果不穩(wěn)定；胞內因子染色步驟繁瑣耗時長，快來看看他們是怎么解決的。師姐染色方案：小貝家抗體■用2mLPBS洗滌1mL血液樣品?！?次清洗：添加PBS，重新懸浮，以400g離心3分鐘，棄上清?！龇謩e重復1-2次，洗滌2次和3次?！鲈诠苤刑砑涌贵w：CD19-PB，Kappa-FITC和Lambda-PE■加入100μL洗滌過的血液樣品?！龇跤?0分鐘（RT，避光）■1mlLyse&fix試劑■孵育10分鐘（RT，避光）■以4
2020
09-16

核酸片段分選？更準、更快的選擇
近年來，高通量測序技術已經日漸成為基因組學研究項目的標準。從樣品制備到文庫制備及終測序，大多步驟都要求精|確高效化、易于自動化操作，并且許多高通量測序應用都要求核酸片段在特定范圍內緊密分布，因此精|準快速的進行片段選擇步驟更具挑戰(zhàn)性。在進行核酸片段分選的過程中，傳統(tǒng)的瓊脂糖凝膠回收法不適于安全、高通量的操作，使用普通磁珠無法準確做到片段大小的選擇，而使用AgencourtSPRIselect的片段分選產品可以得到集中的核酸片段分布，并且可以*自動化，廣泛應用于：核酸片段回收核酸片段篩選NGS、S
2020
09-15

速度！12分鐘Pooling 384個NGS文庫
Pooling是測序文庫上機前的臨門一腳。經過數小時乃至幾天的實驗，初始樣品終于變成濃度、片段大小都符合質控指標的library嗷嗷待測。Pooling實驗通常由兩位操作者協(xié)作。根據表單信息將文庫歸一化到一定濃度，再將想要合并測序的文庫混合，耗時耗力。事實上Pooling*可以不需要密集的吸液移液操作，不需要這么多時間和精力投入，甚至就不需要移液器和吸頭。采用Echo聲波移液系統(tǒng)，12分鐘即可完成384個文庫pooling1，而手工完成歸一化和pooling需耗時長達3小時。Echo通過聚焦聲波
2020
08-28

如何修|煉成流式高手-樣本制備.科研篇
為什么同一個配色，同一份實驗步驟，但是后實驗結果卻也變成“買家秀與賣家秀”。我們來看看他的實驗記錄，但是，如果是在做胞內染色的時候，死細胞對于實驗結果的影響更大，但是普通的PI或者7AAD，有會因為細胞需要固定，破膜而使所有細胞都是陽性。這個時候我們就需要使用到通用型死活細胞染料，這種染料不管是胞內染色還是胞膜染色都能很好的區(qū)分死活細胞。Amine-reactivedyesfordeadcelldiscriminationinfixedsamples.CurrProtocCytom.2010Ju
2020
08-28

如何修|煉成流式高手 -方案設計（下）
目前已經有很多OMIP與onestudy的方案可以供大家所使用。直接獲取經過多次優(yōu)化的結果。如果不清楚熒光素與通道的搭配關系，還可以訪問：選擇自己的儀器型號，并且選擇自己的熒光素，就可以直接查看熒光光譜與儀器配置的搭配程度。當然在網站上您還可以找到非常多的學習材料與教學視頻，即便是疫情期間，專家也成主播，隔離在家為大家講解配色技巧，點評配色方案。點開下面視頻感受一下吧。已經商品化的dura系列產品。不僅方案設計經過優(yōu)化與驗證，使用的干粉技術，產品即便在60攝氏度，30天也能保持穩(wěn)定。對于激活實驗

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