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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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關(guān)于血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用2020/02/20
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用您知道嗎?鑒別方法:血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿
制備瓊脂糖凝膠的操作步驟2020/01/16
1、取5×TBE緩沖液20ml加水至200ml,配制成0.5×TBE稀釋緩沖液,待用。2、膠液的制備:稱取0.4g瓊脂糖,置于200ml錐形瓶中,加入50ml0.5×TBE稀釋緩沖液,放入微波爐里(或電爐上)加熱至瓊脂糖全部熔化,取出搖勻,此為0.8%瓊脂糖凝膠液。加熱過程中要不時搖動,使附于瓶壁上的瓊脂糖顆粒進(jìn)入溶液。加熱時應(yīng)蓋上封口膜,以減少水份蒸發(fā)。3、膠板的制備:將有機(jī)玻璃膠槽兩端分別用橡皮膏(寬約1cm)緊密封住。將封好的膠槽置于水平支持物上,插上樣品梳子,注意觀察梳子齒下緣應(yīng)與膠槽底
黃qu霉du素B對人危害以及檢測方法2020/01/14
黃qu霉du素B1是二氫呋喃氧雜萘ling酮的衍生物,含有一個雙呋喃環(huán)和一個氧雜萘ling酮。黃qu霉du素B1是已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃qu霉du素B1對包括人和若干動物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對肝臟的損害。黃qu霉du素B1存在于土壤,動植物各種堅果,特別是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調(diào)味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經(jīng)常發(fā)現(xiàn)黃qu霉du素。一般以熱帶和亞熱帶等南方高溫、高濕地區(qū)受污染zui為嚴(yán)重,食品中黃qu霉du素的檢出率比較高。黃qu霉du素耐
試劑盒實(shí)驗(yàn)酶標(biāo)板的三大分類2020/01/10
依據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合才能的不同,在ELISA試劑盒試驗(yàn)中,酶標(biāo)板是所需設(shè)備之一,有著重要作用。今天我司為您解析ELISA酶標(biāo)板的三大分類,中結(jié)合力:此種酶標(biāo)板,外表經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合才能大大增強(qiáng),可達(dá)300~400ngIgG/cm2,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標(biāo)板可提高敏感性,并可相對削減包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反響。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地關(guān)閉未結(jié)合蛋白的部位,需使用蛋白作為關(guān)閉劑。高結(jié)合力:此類酶標(biāo)板經(jīng)外表疏水鍵被動與蛋白
血清學(xué)試驗(yàn)2020/01/09
血清學(xué)反應(yīng)是指:相應(yīng)的抗原與抗體在體外一定條件下作用,可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀、凝集現(xiàn)象。在食品微生物檢驗(yàn)中,常用血清學(xué)反應(yīng)來鑒定分離到的細(xì)菌,以zui終確認(rèn)檢測結(jié)果。血清學(xué)反應(yīng)的一般特點(diǎn):1)抗原體的結(jié)合具有特異性,當(dāng)有共同抗原體存在時,會出現(xiàn)交叉反應(yīng)。2)抗原體的結(jié)合是分子表面的結(jié)合,這種結(jié)合雖相當(dāng)穩(wěn)定,但是可逆的。3)抗原體的結(jié)合是按一定比例進(jìn)行的,只有比例適當(dāng)時,才能出現(xiàn)可見反應(yīng)。4)血清學(xué)反應(yīng)大體分為兩個階段進(jìn)行,但其間無嚴(yán)格界限。*階段為抗原體特異性結(jié)合階段,反應(yīng)速度很快,只需幾秒至幾分
詳細(xì)了解干擾素的真面目2020/01/03
干擾素(IFN)是一種廣譜抗病毒劑,并不直接殺傷或抑制病毒,而主要是通過細(xì)胞表面受體作用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白,從而抑制乙肝病毒的復(fù)制,其類型分為三類,α-(白細(xì)胞)型、β-(成纖維細(xì)胞)型,γ-(淋巴細(xì)胞)型;同時還可增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)、巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的活力,從而起到免疫調(diào)節(jié)作用,并增強(qiáng)抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)(主要是糖蛋白),是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們在同種細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長,以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。干
化學(xué)試劑保存九大準(zhǔn)則2019/12/27
1.密封大都試劑都要密封寄存,這是實(shí)驗(yàn)室保存試劑的一個重要準(zhǔn)則。2.突出的有以下3類:①易蒸發(fā)的試劑,如濃鹽酸、濃硝酸、濃溴水等。②易與水蒸氣、二氧化碳效果的試劑,如無水氯化鈣、苛性鈉、水玻璃等。③易被氧化的試劑(或還原性試劑),如亞硫酸鈉、氫硫酸、硫酸亞鐵等。3.避光見光或受熱易分化的試劑,要防止光照,置陰涼處。如硝酸、硝酸銀等,一般應(yīng)盛放在棕色試劑瓶中。4.防蝕對有腐蝕效果的試劑,要注意防蝕。強(qiáng)氧化劑、有機(jī)溶劑不可用帶橡膠塞的試劑瓶寄存;堿液、水玻璃等不能用帶玻璃塞的試劑瓶寄存。5.按捺關(guān)于
關(guān)于細(xì)胞培育中包被液您了解多少?2019/12/26
在培育原代細(xì)胞時為了促進(jìn)原代細(xì)胞貼壁需要對使用的T-25/T-75等耗材進(jìn)行包被處理,常用的包液有多聚賴氨酸和纖維黏連蛋白、明膠,其中ScienCell研討實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的包被液就包含上述3種產(chǎn)品。其中包被液多聚賴氨酸是一種合成化合物,是帶正電荷的氨基酸,通過改變培育基質(zhì)外表的電極來促進(jìn)細(xì)胞貼壁。在細(xì)胞培育中廣泛用于包被物促進(jìn)細(xì)胞貼壁。除了促進(jìn)細(xì)胞貼壁成長,包被液多聚賴氨酸包被后能提高原代細(xì)胞的存活率和促進(jìn)神經(jīng)突長出。Sciencell出售的包被液多聚賴氨酸是原液,分子量是70000~150000。
抗生素標(biāo)準(zhǔn)品特殊保存條件您所不知道的2019/12/20
恒遠(yuǎn)生物說明書中提到不同的標(biāo)準(zhǔn)品、對照品應(yīng)根據(jù)其理化性質(zhì)、貯存要求的不同選擇適宜的貯存環(huán)境和條件,分別置于規(guī)定的位置。貯存環(huán)境要求較高,貯存室應(yīng)盡量設(shè)置空調(diào)設(shè)施,保證室內(nèi)陰涼、干燥、避光、通風(fēng),溫度在20±5℃,相對濕度在50~75%為宜。特殊品種要求嚴(yán)格按照規(guī)定的貯存條件妥善保存。但是關(guān)于抗生素標(biāo)準(zhǔn)品、對照品的使用保存,我司認(rèn)為還需注意以下幾點(diǎn):(1)正確開啟抗生素標(biāo)準(zhǔn)品、對照品大多置玻璃安瓿中保存,啟開時必須嚴(yán)格防止玻璃屑掉入瓶中。具體可按如下操作:輕微震敲安瓿,盡量使內(nèi)容物聚集于底部,砂輪
CIK細(xì)胞的培養(yǎng)原理2019/12/18
【培養(yǎng)原理】CIK細(xì)胞,即細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(Cytokine-InducedKiller,CIK)是一種新型的免疫活性細(xì)胞,CIK增殖能力強(qiáng),細(xì)胞毒作用強(qiáng),具有一定的免疫特性。由于該細(xì)胞同時表達(dá)CD3和CD56兩種膜蛋白分子,故又稱為NK細(xì)胞(自然殺傷細(xì)胞)樣T淋巴細(xì)胞,兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性,和NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)。該細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的識別能力很強(qiáng),如同“細(xì)胞dao彈”,能“點(diǎn)射”腫瘤細(xì)胞,但不會傷及“無辜”的正常細(xì)胞。尤其對手術(shù)后或放化療后患者*,能消除殘留微小的轉(zhuǎn)移
原代細(xì)胞的培育辦法2019/12/06
1、安排塊培育法(1)依照前述辦法取材,將安排剪成或切成1mm3巨細(xì)的小塊,并參加少許培育基使安排濕潤。(2)將小塊均勻涂布于瓶壁,每小塊距離0.2cm~0.5cm,一般在25mL培育瓶(底面積為17.5cm2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置后,輕輕翻轉(zhuǎn)培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶內(nèi)參加適量培育基蓋好瓶塞,將瓶歪斜放置在37℃溫箱內(nèi)。(3)培育2~4小時,待小塊貼附后,將培育瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放,靜置培育,動作要輕,嚴(yán)禁搖擺和來回振動,以防因?yàn)榧佣剐K漂起而造成培育失敗,若安排塊不易貼壁可預(yù)先
ELISA試劑盒常壓滅菌操作要點(diǎn)2019/12/03
ELISA試劑盒常壓滅菌操作要點(diǎn):(1)進(jìn)鍋不擠壓:擺放待滅菌的菌種袋必須分層,每層菌種袋不可擺太擠,要留一定空隙,不能相互擠壓。不適宜將菌種袋臥疊,要分層立放,以保證蒸汽暢流和接種穴完好。為了避免棉塞易潮濕,可在棉塞上蓋一層薄膜或油紙,但覆蓋物不可太大,否則會影響上下層蒸汽暢流;也可將4個菌種袋的棉塞并攏,棉塞向下一同塞到4個菌種袋的空隙中,這樣塑料袋規(guī)格要加長,但防潮效果良好。(2)及時滅菌:隨裝隨滅。配料到滅菌間隔時間越短越好,以免雜菌自繁。大規(guī)模生產(chǎn)時,要分鍋滅菌。(3)攻頭:指開始滅菌
少量標(biāo)準(zhǔn)品的稱量與溶解方法2019/11/29
近日,我公司技術(shù)員看到一個問題說:“當(dāng)樣品量非常少時,如何從瓶子中獲取所有的純物質(zhì)?感覺有點(diǎn)難度,麻煩您幫我分析一下?!庇行?biāo)準(zhǔn)品由于非常昂貴,廠商只能以非常小的包裝提供給客戶,如1mg,5mg,10mg等。此時,客戶拿到產(chǎn)品時可能會覺得瓶子是空的,這種情況是由于粉末狀的物質(zhì)會分散在瓶壁和蓋子上,而液體狀物質(zhì)會在瓶壁形成一層可能看不見的液層。其實(shí)少量標(biāo)準(zhǔn)品的稱量與溶解方法其實(shí)并不難:1.擦拭瓶外壁和蓋子,等其晾干。2.稱量整個瓶子(等到天平讀數(shù)穩(wěn)定),記錄數(shù)據(jù),至0.1mg。3.用合適的溶劑(能
關(guān)于重組蛋白的特性2019/11/27
重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,在-80℃條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因?yàn)槿芙獠缓脮档偷鞍椎男в?。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題。(1)原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護(hù)劑,使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100μg,用8
免疫酶技術(shù)中濃度的選擇條件2019/11/22
在免疫酶技術(shù)中,首先要確定的變異因素就是酶標(biāo)記物的工作濃度。因?yàn)槊笜?biāo)記物濃度的很小變化,便可導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生很大的波動。另外,由于濃度過高,可使非特異性反應(yīng)增加,而濃度過低又可影響測定的敏感性。因此,正式試驗(yàn)前必須準(zhǔn)確滴定其工作濃度。1.酶標(biāo)記抗體的滴定方法是:將抗原(或抗體)物理吸附于固相載體上,然后將經(jīng)過一系列稀釋的酶標(biāo)抗體(或抗Ig抗體)與吸附在載體上的抗原(或抗體)起反應(yīng),以酶與底物的顯色反應(yīng)程度來確定酶標(biāo)記抗體的效價,或稱工作濃度。2.其步驟為:先將抗原(或抗體)用0.05MPH9.6
細(xì)胞組織塊培養(yǎng)法2019/11/18
一、目的學(xué)習(xí)原代培養(yǎng)方法,從供體取得組織細(xì)胞后在體外進(jìn)行的培養(yǎng)。二、概述組織塊培養(yǎng)法是常用的、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法??梢圆捎眉羟蟹ǎ磳⒔M織塊剪切成小塊后,接種于培養(yǎng)瓶,組織小塊貼壁24h或更長時間后,細(xì)胞就從組織四周游出。但由于在反復(fù)剪切和接種過程中對組織塊的損傷,并不是每個小塊都能長出細(xì)胞。用于組織塊培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶可根據(jù)不同細(xì)胞生長的需要作適當(dāng)處理,如預(yù)先涂以膠原薄層,以利于上皮樣細(xì)胞等的生長。(本節(jié)以新生牛主動脈平滑肌培養(yǎng)為例)三、材料(一)儀器1.凈化工作臺2.恒溫水浴箱3.
不同的培養(yǎng)基,不同的滅菌方法2019/11/15
培養(yǎng)基的類型可以按照成分、物理狀態(tài)分、用途、微生物種類這四個方面來規(guī)劃分類。培養(yǎng)基的滅菌是一個常見步驟,并且,不同的培養(yǎng)基需根據(jù)其性能采用不同的滅菌方法,在這里,上海恒遠(yuǎn)為您一一指出:1.常見方法:通常采用高壓濕熱滅菌法121℃滅菌15分鐘,特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌(如含糖培養(yǎng)基115℃滅菌20分鐘)。2.部分培養(yǎng)基,只能煮沸滅菌。3.對熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì),應(yīng)采用膜過濾方法進(jìn)行過濾除菌。4.即用型試劑不需滅菌,應(yīng)參見相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說明,直接使用。【培養(yǎng)基圖片】●器具和設(shè)備
胞嘧啶的性質(zhì)及與胸腺嘧啶的區(qū)別2019/11/12
胞嘧啶是核酸(DNA和RNA)中的主要堿基組成成分之一。胞嘧啶可由二巰基脲嘧啶、濃氨水和氯yi酸為原料合成制得。用作藥物中間體。胞嘧啶的性質(zhì):CAS號:71-30-7分子式:C4H5N3O分子量:111.10純度:≥98.0%MDL號:MFCD00006034Beilstein號:2637EC號:200-749-5化學(xué)性質(zhì):白色結(jié)晶性粉末,可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑,來源于合成。用途:用作藥物中間體白色片狀結(jié)晶。100℃失水,300℃時成棕色,320~325℃分解。1g產(chǎn)品能溶于130
試劑盒被冷凍后的質(zhì)量會受損嗎?2019/11/08
被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會受損嗎?我們想知道,完整的ELISA試劑盒包括:①酶的底物;②已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);③酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);④結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;⑤洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;⑥陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參閱規(guī)范品和操控血清(定量測定中);⑦酶反響終止液,常用的HRP反響終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的*終體積而異,在板式ELISA中一般選用2mol/L。為其保存后能夠使用,但不能反復(fù)凍融,因?yàn)檫@
在進(jìn)口ELISA試劑盒試驗(yàn)中該如何防止過錯2019/11/07
不少購買過ELISA試劑盒的一些客戶會問到如何防止ELISA試驗(yàn)過程中的一些不必要的過錯,現(xiàn)就這個話題我司的技術(shù)顧問給到您如下幾個誠實(shí)的主張,望能采納!1.評估試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定與否,對率的高低*重要,在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品重復(fù)比照試驗(yàn),斷定試劑符合要求后方可使用。2.操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格依照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。3.加樣要、快速,加樣不,酶物的量不能確認(rèn),直接影響顯色結(jié)果,顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和停止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。?4.查驗(yàn)技師應(yīng)具有從事
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