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上海恒遠生物科技有限公司
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神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)2019/10/31
因為神經(jīng)干細胞(NeuralStemCell)具有自我更新和多向分化的潛能,因而,可以選用懸浮神經(jīng)球培養(yǎng)的方法來獲得和研討。即將胚胎腦組織處理成單個細胞后,只有具有自我更新才能的細胞才能在培養(yǎng)液中克隆增殖成為懸浮的神經(jīng)球,并隨著傳代的進行,堅持增殖才能和向多種神經(jīng)子代細胞分化的才能。一、神經(jīng)干細胞的分別和傳代無菌條件下取重生SD大鼠(出世48h內(nèi))腦組織,D-Hanks液充分漂洗后,在解剖顯微鏡下剝離腦膜,準確分別海馬,用眼科剪將海馬剪碎后,再轉(zhuǎn)移到DMEM/F12(1:1)加B27和bFGF(
基因能夠經(jīng)進化后協(xié)助細胞控制入侵者2019/10/29
這些研究人員證實這些基因在不同的物種之間快速地進化,而且在單個組織內(nèi)的不同細胞中也具有高度可變的活性。相比之下,他們發(fā)現(xiàn)在不同物種之間保守的并調(diào)節(jié)免疫反應的基因在單個組織的不同細胞之間中更加一致性地被激活。這些基因可能受到更嚴格的限制,這是因為它們參與細胞內(nèi)的許多不同功能。但是,它們也是病毒的靶標。這些受到更嚴格限制的基因代表著致命弱點,可被病原體用來破壞免疫系統(tǒng)。這些研究人員以的細節(jié)研究了在細胞對病原體入侵作出的初始反應--先天性免疫反應(innateimmuneresponse)---中激活
細胞染色方法及常用細胞染色試劑2019/10/24
細胞染色常用方法主要包括以下幾個即:1.簡單染色法,常用堿性染料如美藍等進行簡單染色;2.革蘭氏染色法,主要包括結(jié)晶紫初染、dian液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復染四個過程;3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成;4.吉姆薩染色法,吉姆薩染色原理與結(jié)果和瑞特染色法基本相同;5.細胞免疫熒光染色法,免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合。十五種細胞染色試劑1.酸性品紅(Acidfuchsin)酸性品紅是酸性染料,呈紅色粉末狀,能容於水,略溶於酒精(0.3%)。是良好的
蛋白濃度測定的方法具體有哪些?2019/10/23
蛋白質(zhì)濃度測定是利用化學或物理方法測定蛋白質(zhì)濃度,一般蛋白濃度測定的方法有很多種,每種方法都有優(yōu)點和局限性,下面我們就具體看一下蛋白濃度測定的方法都有哪些。蛋白濃度測定的方法:1.紫外分光光度法紫外光譜吸收法測定蛋白質(zhì)含量是講蛋白質(zhì)溶液直接在紫外分光光度計中測定的方法,不需要任何試劑,操作簡單且易回收。蛋白質(zhì)溶液在280nm附近有強烈的吸收,這是由于蛋白質(zhì)中酪氨酸、色氨酸殘基而引起的,所以光密度受這兩種氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取過程中雜有的核酸對測定結(jié)果引起極大誤差,其大吸收在260nm
ELISA實驗要點:洗滌是關鍵2019/10/16
優(yōu)化ELISA的重點之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號,從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結(jié)合事件被保留,在后一步產(chǎn)生信號。而不充分的洗滌會導致差異和高背景,從而帶來不理想的結(jié)果。本文將為你介紹一些利用自動洗板機來洗滌ELISA平板的技巧。免疫分析,比如ELISA,一般包含兩個或以上的孵育步驟,中間以洗滌隔開。ELISA通常在96孔板中開展,其上包被了結(jié)合抗原或抗體。在封閉步驟后,包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過一些洗滌步驟去除未結(jié)合(低親和力)的
化學試劑的性質(zhì)對有效期的影響2019/10/14
試劑、溶液的有效使用期限,接著就有人想要問了,那化學試劑本身的性質(zhì)對其使用有效期有沒有影響呢?化學試劑一般沒有注明保質(zhì)期,確定試劑是否變質(zhì)主要是憑經(jīng)驗和做新舊試劑對比試驗?;瘜W試劑的有效期隨著化學品的化學性質(zhì)的改變,有著很大的區(qū)別。一般情況下,化學性質(zhì)穩(wěn)定的物質(zhì),保存有效期就越長,保存條件也簡單。一般遵循以下幾個原則(一般原則,不是絕dui原則):無機化合物,只要妥善保管,包裝完好無損,理論上可以長期使用。但是容易氧化(如亞硫酸鹽、苯酚、亞鐵鹽、碘化物、硫化物等應將其固體或晶體密封保存,不宜長期
EISA試劑盒實驗加樣要求2019/10/14
ELISA試劑盒具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點,而且因為一天之內(nèi)能夠檢查幾百乃至上千份標本,因此在生物醫(yī)學各領域的使用規(guī)模日益擴展。在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并注意不行濺出,不行產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發(fā)作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA試劑盒)需用稀釋的血清,可在試管中
小技巧改變ELISA試劑盒實驗誤差大問題2019/10/09
一般來說,ELISA操作技術員會在全部準備就緒后開端試驗,而在試驗進程其時卻常會呈現(xiàn)一些問題。因為ELISA試驗操作過程雜亂,或許一個小小的差錯就會呈現(xiàn)大問題,那么咱們要怎么處理并完善試驗過程的差錯問題呢?今天上海古朵實業(yè)有限公司帶給您的資訊主題是:小技巧改動ELISA試劑盒試驗差錯大問題。①.因為滴瓶的精密性必定不如加樣器,不掃除不同滴頭滴量的差錯。另外滴加進程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻,是否顫抖等影響液量的要素均可導致以上狀況。高標準要求時應運用加樣器。②值鄰近實踐上是個灰區(qū),不能截然分為
微生物培養(yǎng)基常規(guī)滅菌方法你了解嗎?2019/09/23
在發(fā)酵過程中,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個原因:如不滅菌,會使生物反應的基質(zhì)或產(chǎn)物,因雜菌的消耗而損失,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,這就使產(chǎn)物的提取更加困難,造成得率降低,產(chǎn)品質(zhì)量下降;雜菌大量繁殖后,會改變反應液的pH值,使反應異常;有些雜菌會分解產(chǎn)物,使生產(chǎn)失敗;如果發(fā)生噬菌體污染,生產(chǎn)菌細胞將被裂解,使生產(chǎn)失敗。常見的滅菌方法(一)化學物質(zhì)滅菌原理:藥物與微生物細胞中的成分反應,使蛋白質(zhì)變性酶失活。使用范圍:器皿、雙手和實驗室、無菌室的環(huán)境滅菌,不能用于培養(yǎng)基滅菌。常用的滅菌劑:
如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損2019/09/04
血清應保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。那么,如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分
血清總蛋白質(zhì)的測定方法2019/09/02
1.凱氏定氮法仍然是建立各個具體方法時采用的參考標準方法。2.雙縮脲比色法是目前首先推薦的蛋白質(zhì)定量方法。方法操作簡便,雖然雙縮脲試劑有大同不異。其中酒石酸鉀納可以穩(wěn)定在堿性溶液中的銅離子,含有碘化物作為抗氧化劑。雙縮脲反應的復合物其吸收峰為540nm??刹捎?的標準牛血清白蛋白作為標準品,經(jīng)稱量,必要時用凱氏定氮法標定。各地質(zhì)控中心提供的混合標準血清可作為第二參考,血清用量100μl,在10-120g/L濃度范圍內(nèi)呈良好線性關系,批內(nèi)CV值3.染料結(jié)合法蛋白質(zhì)可與某些染料特異結(jié)合,如氨基黑與考
血清在細胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用2019/08/29
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品
ELISA實驗的結(jié)果判定2019/08/23
臨床ELISA試劑盒測定按其表示測定結(jié)果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定只是對標本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結(jié)論,分別用“陽性”和“陰性”來表示??梢姸ㄐ詼y定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定,以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對標本中待測抗原的多少進行量值測定,以具體數(shù)值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測定,如激素、細胞因子、腫瘤標志物、小分子藥物等。目前國內(nèi)在臨床上應用的ELISA試劑盒絕大部份是用于傳染性病原體的抗原或抗體的定性測定,
如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?2019/08/23
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物1.解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2.解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生3.請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。4.血清的熱滅活非常容易造成沉
告訴你怎么設置空白孔2019/08/16
對于一些ELISA實驗新手,估量許多不知道ELSA試劑盒空白孔怎么設置,下面上海恒遠來告訴你。1.空氣空白水空白:一般是用于儀器調(diào)零的,全部孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值。2.底物空白:一般是用于避免底物弱顯色所形成的讀數(shù)偏高,相同全部孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值(只加底物和中止液)3.ELISA試劑盒酶空白:一般在2步法實驗中運用,主要是看酶是不是和板有非特異性的,一般不做這個。ELISA空白孔一般設一個,這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽性規(guī)范品是設2個復孔,雖然有點,但為了確保實驗的可靠性,我認為仍是很有必
elisa試劑盒測出的結(jié)果不理想怎么辦2019/08/13
今天上午上海交通大學王老師elisa試劑盒的相關問題,確認種屬指標符合要求后,問道:如果elisa試劑盒測出的結(jié)果不理想怎么辦?針對elisa檢測結(jié)果不理想的問題,我司何技術回復:首先一點,實驗本來就是屬于探索未知的東西,環(huán)境因素,個人因素,產(chǎn)品因素各方面,任何一方出現(xiàn)問題,都會導致試劑盒檢測結(jié)果的不理想我司所研發(fā)的試劑盒,全部都是經(jīng)過反復測試后才推出市場的,經(jīng)得起市場的考驗,如果在我司購買的試劑盒出現(xiàn)問題,比如說測不出結(jié)果(非人為因素),或者測出的結(jié)果不理想(非人為因素),我司可免費包退換貨,
ELISA技術中的抗原與抗體的反應2019/08/08
你知道ELISA技術中的抗原和抗體的反應嗎,上海恒遠來告訴你,趕快那起你手中的小本本劃重點記錄下來吧!一、抗體1.抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同,這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(ga
ELISA試劑盒使用的小常識2019/08/05
你知道ELISA在使用的過程中的常識嗎?上海恒遠生物科技有限公司來告訴你。ELISA試劑盒公司為中國科研試劑老牌供應商之一,我們一直努力為廣大科研用戶提供的和優(yōu)惠的價格,為中國的科研領域獻出一份力量,保障質(zhì)量和實驗數(shù)據(jù),此外我司免費為您提供報價、用途、規(guī)格、說明書、使用操作等相關方面的咨詢。ELISA試劑盒使用小常識:1.請不要在臟亂和強光環(huán)境中取用,以免造成污染和失效。2.如果一次使用很少可以將其適當分裝后使用,這樣可以有效的防止試劑污染。3.雖然本試劑在有效期過后很長一段時間仍可以使用,但還
ELISA實驗的技術要點(二)2019/07/30
你是否在為做實驗的時候沒有掌握到要點而擔心?沒關系上海恒遠生物科技有限公司來告訴你。ELISA的技術要點包括三個方面:試劑的制備、反應條件的選擇和操作的標準化。一、反應條件的選擇、適工作濃度的選擇在建立某一ELISA測定中,應對包被抗原或抗體的濃度和酶標抗原或抗體的濃度予以選擇,以達到合適的測定條件和節(jié)省測定費用。下面以間接法測抗體和夾心法測抗原為例,介紹適工作濃度的選擇方法。(一)間接法測抗體1.酶標抗抗體工作濃度的選擇(1)用100ng/ml人IgG進行包被,洗滌。(2)將酶標抗人IgG用稀
購買ELISA試劑盒的要點2019/07/23
現(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國產(chǎn)品牌也有進口品牌,數(shù)量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出適合的產(chǎn)品?以下上海恒遠生物科技有限公司整理選購ELISA試劑盒應該要掌握的六大要素,希望能為大家有所幫助,選擇購買適合自己的ELISA試劑盒。一、經(jīng)濟性對于選擇進口品牌的試劑盒還是國產(chǎn)品牌的試劑盒,可以根據(jù)實驗室課題經(jīng)費以及各品牌的產(chǎn)品質(zhì)量和美譽度來自行選擇。一般質(zhì)量可靠,文獻引用多。建議大家通過閱讀SCI文獻,了解同行所使用的品牌。但品牌由于進口和運輸?shù)瘸杀据^高,因此售價也較高。二、美譽度不論選擇品牌還是
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