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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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上海恒遠(yuǎn)人血清技術(shù)專線解答實驗的秘密2015/11/30
今天過后就要告別十一月了,在本月的zui后一篇技術(shù)文章中,上海恒遠(yuǎn)人血清技術(shù)專線解答那些您不知道的實驗的秘密!【問】TaqMan基因表達(dá)分析,其中寡跨越剪接位點(多外顯子基因)?【答】探討跨越剪接位點(外顯子多外顯子基因外顯子交界處)。內(nèi)源性控制hs999999xx_m1標(biāo)記,擴增子將跨越外顯子交界處?!締枴縏aqMan基因表達(dá)分析測定的位置意味著怎么使用它?【答】測定位置(在試驗的詳細(xì)信息頁找到)的上下文序列登錄號為中心的相關(guān)聯(lián)的核苷酸位置。這個數(shù)字可以用來產(chǎn)生一個潛在的擴增子可用于確定同源性
恒遠(yuǎn)提醒:ELISA實驗Z后一次洗滌*很重要2015/11/25
我們常說ELISA試劑盒實驗中的洗滌非常重要,這一過程不是是反應(yīng)聚,但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵!在ELISA測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。上海恒遠(yuǎn)生物提醒您重點注意:洗滌如不*,特別在zui后一次,如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標(biāo)抗體作用而產(chǎn)生干擾。上海恒遠(yuǎn)為您整理分享,ELISA洗滌一般可采用的方法有:1.吸干孔內(nèi)反應(yīng)液;2.將洗滌液注滿板孔;3.放置2mi
上海恒遠(yuǎn)解析造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因2015/11/18
ELISA實驗步驟繁瑣,操作者們所犯的問題也各有不同。近日,南京大學(xué)周老師到我司何咨詢問道:為什么ELISA標(biāo)準(zhǔn)品會出現(xiàn)“溢值”的現(xiàn)象呢?看到問題后,何立即轉(zhuǎn)到技術(shù)部,隨后上海恒遠(yuǎn)公司技術(shù)部給周老師去,解析造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因:①樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。②孵育時間/溫度不正確。③在孵育時為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物:在孵育時需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物,以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。④檢測波長不正確:要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。⑤TMB底物的顯色時間
恒遠(yuǎn)技術(shù)分析:elisa實驗陰性對照需要做梯度稀釋嗎2015/11/11
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司主要ELISA試劑盒,主要合作對象是學(xué)校,醫(yī)院、研究所等科研單位。學(xué)校客戶以新手為主。所以常有客戶咨詢未處理陰性對照需要做梯度稀釋嗎:以小鼠血清為例,小鼠的血清是直接拿來作為陰性對照,還是要進行稀釋?如果要稀釋,該怎么稀釋才科學(xué)?從理論上說,陰性對照的血清,不論稀釋多少倍,OD值都不應(yīng)該有明顯變化。有兩種可能:1.正常小鼠本身含有該抗原的抗體;2.ELISA過程中非特異性反應(yīng)去除不干凈,如洗板、孵育溫度時間、抗原抗體濃度等,這樣稀釋倍數(shù)越高的樣本其對結(jié)果的影響就越小,就呈
上海恒遠(yuǎn)生物血清載脂蛋白A1試劑盒性能評價2015/11/05
上海恒遠(yuǎn)生物血清載脂蛋白A1試劑盒性能評價載脂蛋白A1(apolipoproteinA1,ApoA1)是高密度脂蛋白(HDL)的主要結(jié)構(gòu)蛋白。其含量基本可反應(yīng)HDL顆多少。血清/血漿樣品ApoA1減少提示心血管(冠心病),腦血管(腦血栓)疾病的危險性增加,常被作為心腦血管疾病的危險性評價的靈敏指標(biāo)之一,ApoA1含量的測定,對預(yù)防和評價心腦血管疾病比其它脂類和脂蛋白更有效。目前zui為常用測定ApoA1的方法為免疫比濁法,主要是利用抗原與相應(yīng)的抗體發(fā)生特異性反應(yīng),形成抗原-抗體復(fù)合物,并形成一定
技術(shù)講解:為何Elisa試劑盒OD值不正常2015/11/03
由于Elisa的操作步驟中影響反應(yīng)因素較多,在實驗問題中出現(xiàn)了一些大大小小的問題。然而這些問題也都是可以避免的,熟練掌握ELISA試劑盒實驗技巧,實驗輕松完成。近日,南京大學(xué)李同學(xué)實驗之后分析OD不正常并提出問題:OD值不正常是什么情況?有哪些原因?應(yīng)如何解決?為此我司技術(shù)為Elisa試劑盒OD值不正常找原因:1.試劑盒未回溫(對應(yīng)解決方法:試劑盒回溫到25℃);2.溫度控制不好(對應(yīng)解決方法:控制正確溫度);3.孵育時間不準(zhǔn)確(對應(yīng)解決方法:控制孵育時間);4.洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、
ELISA試劑盒實驗操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法2015/10/28
ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。上海恒遠(yuǎn)將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下。ELISA試劑盒實驗操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法分析:1選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因:1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特
Gibco胎牛血清使用時需注意哪些2015/10/21
Gibco胎牛血清現(xiàn)在在生物行業(yè)中使用率非常高,而且使用的時候強度高,為了讓更多的人了解Gibco胎牛血清,下面就和大家介紹一下Gibco胎牛血清的使用注意事項:1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,
技術(shù)講壇:ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制要點2015/10/14
許多試劑檢測都涉及到標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題,ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實驗的成敗,那么究竟如何繪制或制作標(biāo)準(zhǔn)曲線呢?一、做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對于呈
今日關(guān)注:細(xì)胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基是什么2015/10/10
什么是細(xì)胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基呢,今天上海恒遠(yuǎn)告訴您。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能,具體功能如下:1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用6.提供蛋白酶抑制劑
浙江大學(xué)點贊我司ELISA技術(shù)服務(wù)2015/09/28
上周五,浙江大學(xué)李老師在我司成功訂購R&D品牌進口分裝ELISA試劑盒后,致電何說道:“有關(guān)Elisa孵育、洗板、顯色的常見問題和解決方案能發(fā)我一份嗎?避免實驗出錯。"聽到李老師的問題反饋,何當(dāng)即了技術(shù)部,根據(jù)上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)員的分析,總結(jié)出以下內(nèi)容:一、孵育常見問題:1.孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;2.孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決方案:1.貼封片或加蓋;2.按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。二、洗板常見問題:1.采用手工洗
豚鼠血清主要成份及注意事項2015/09/21
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護作用。豚鼠血清的主要成份和注意事項有哪些?上海恒遠(yuǎn)與您一起看看!豚鼠血清主要成份:血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含
培養(yǎng)細(xì)胞生長緩慢的原因分析2015/09/15
培養(yǎng)細(xì)胞生長緩慢的原因分析可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷氨眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷氨酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃;培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存,
前列腺特異抗原(PSA)檢測意義與方法2015/09/07
前列腺特異抗原(PSA)檢測意義與方法PSA是一種有237個氨基酸和4個碳水化合物側(cè)鏈的單鏈糖蛋白。在正常情況下,PSA產(chǎn)生于前列腺管的上皮細(xì)胞,主要存在于正?;蚍蚀蟮那傲邢俸颓傲邢侔≒CA)的組織;它是由雄激素通過雄激素受體的調(diào)節(jié)直接分泌到前列腺導(dǎo)管系統(tǒng)內(nèi)。PSA為一種中性絲氨酸蛋白激酶,有酶的活性,但活性的水平較低,它能夠溶解精液中的蛋白質(zhì),在精囊包的分裂和精液的液化上發(fā)揮生理作用。正常人血清中有較低含量的PSA,它是由正常前列腺導(dǎo)管系統(tǒng)的周圍環(huán)境的屏障作用在維持[1]。我們測定了部分前列
如何降低ELISA實驗的背景,恒遠(yuǎn)教你方法2015/09/06
ELISA實驗的原理似乎很簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個實驗。在實驗結(jié)束時,我們是否能獲得有意義的信息,ELISA試劑盒這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。ELISA試劑盒背景噪音會影響您對結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景,恒遠(yuǎn)教你方法。洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的
ELISA實驗中加樣可能碰到的問題及解決方法2015/08/26
在ELISA實驗中一般有3次加樣步驟,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。在加樣的過程中會碰到什么問題呢?讓我們一起看一下實驗過程中加樣可能碰到的問題:1、過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間;3、加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣。相應(yīng)解決辦法:1、標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心
恒遠(yuǎn)淺析單克隆抗體的優(yōu)勢2015/08/17
由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體,稱為單克隆抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體即單克隆抗體。單克隆抗體的優(yōu)勢有哪些呢,讓我們一起關(guān)注以下內(nèi)容單克隆抗體由于純度高、特異性強、可以提高各種血清學(xué)方法檢測抗原的敏感性及特異性,但單克隆抗體多為雙價抗體,與
尿微量白蛋白檢測及臨床應(yīng)用2015/08/11
尿微量白蛋白檢測及臨床應(yīng)用尿微量白蛋白指高于正常,但常規(guī)方法無法檢出的白蛋白尿,他的檢測作為早期腎損害診斷的重要指標(biāo)已受到廣泛重視,測定方法包括放射免疫法、ELASA法等。應(yīng)用較多的是免疫透射比濁法,但報告方式不一,有的以每升尿中白蛋白量表示,有的以24小時排泄量表示,常用的報告方式是以白蛋白/肌酐比值報告。我們以不同表示方法對正常人尿白蛋白的正常值進行了統(tǒng)計分析,并對部分高血壓、糖尿病患者進行測定,現(xiàn)報告如下。一、材料與方法1.儀器與方法:尿微量白蛋白測定試劑盒,肌酐測定試劑盒均購于中生公司。
了解人血清在實驗中的作用2015/08/04
人血清提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化可松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機械損傷。人血清對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護作用:有一些細(xì)胞,如
赤蘚紅B鈉鹽用途與說明2015/07/29
赤蘚紅B鈉鹽用途與說明赤蘚紅B鈉鹽用途:生物染色劑ProductName:ErythrosinBsodiumsalt別名:酸性紅51;赤蘚紅CAS號:568-63-8分子式:C20H6I4Na2O5分子量:879.86MDL號:MFCD00144257介紹:ErythrosinBsodiumsaltiscertifiedforuseintheJacksonstainforplantanatomy,Kreyberg'smethodforkeratinandmucus,andasacounterst
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