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上海滬鼎生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第13年
轉(zhuǎn)移因子生化應(yīng)用性能2013/04/15
轉(zhuǎn)移因子生化應(yīng)用性能①轉(zhuǎn)移因子能夠?qū)⒐w的某一些特異性和非特異性細(xì)胞免疫功能,轉(zhuǎn)移給受體,擴(kuò)大受體的免疫反應(yīng)。②轉(zhuǎn)移因子有觸發(fā)和調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能,使未接觸過(guò)抗原的細(xì)胞致敏,T淋巴細(xì)胞分化增殖為效應(yīng)T細(xì)胞,發(fā)生增效反映,變成致敏淋巴細(xì)胞和釋放具有免疫活性的淋巴因子,攻擊體內(nèi)病毒等外來(lái)物。③活化巨噬細(xì)胞,增強(qiáng)協(xié)同參與免疫反應(yīng)的巨噬細(xì)胞識(shí)別、結(jié)合、吞噬和消化抗原的能力。④轉(zhuǎn)移因子還能提高體內(nèi)白介素II、干擾素等人多種細(xì)胞因子在體內(nèi)的,調(diào)整多項(xiàng)免疫指標(biāo)、作用于免疫系統(tǒng)的多個(gè)環(huán)節(jié)、糾正機(jī)體失衡的免疫、使免
技術(shù)指導(dǎo)ELISA試劑盒包被方式2013/04/12
技術(shù)指導(dǎo)ELISA試劑盒包被方式將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合
酶標(biāo)記抗體的制備方法檢測(cè)分析2013/04/09
ELISA試劑盒酶標(biāo)記抗體的制備酶標(biāo)記抗體的制備方法主要有兩種,即戊二醛交聯(lián)法和過(guò)碘酸鹽氧化法。(1)戊二醛交聯(lián)法:戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑,它可以使酶與蛋白質(zhì)的氨基通過(guò)它而聯(lián)結(jié)。堿性磷酸一般用此法進(jìn)行標(biāo)記。交聯(lián)方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中,反應(yīng)后即得酶標(biāo)記抗體。ELISA中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡(jiǎn)便、有效(結(jié)合率達(dá)60%-70%)和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是交聯(lián)反應(yīng)是隨機(jī)的,酶與抗體交聯(lián)時(shí)分子間的比例不嚴(yán)格,結(jié)合物的大小也不均一,酶與酶,抗體與抗
化學(xué)試劑純度分類2013/04/07
化學(xué)試劑純度分類我國(guó)的試劑規(guī)格基本上按純度(雜質(zhì)含量的多少)劃分,共有高純、光譜純、基準(zhǔn)、分光純、優(yōu)級(jí)純、分析和化學(xué)純等7種。國(guó)家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級(jí)純、分級(jí)純和化學(xué)純3種。(1)優(yōu)級(jí)純,又稱一級(jí)品或保證試劑,99.8%,這種試劑純度zui高,雜質(zhì)含量zui低,適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作,使用綠色瓶簽。(2)分析純(AR),又稱二級(jí)試劑,純度很高,99.7%,略次于優(yōu)級(jí)純,適合于重要分析及一般研究工作,使用紅色瓶簽。(3)化學(xué)純(CP),又稱三級(jí)試劑,≥99.5%,純度與
成人胰腺消化、胰島分離方法2013/04/01
簡(jiǎn)述成人胰腺消化、胰島分離方法:尸體胰腺原位灌洗后置UW液中,4℃保存運(yùn)輸。到實(shí)驗(yàn)室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰組織,從胰管內(nèi)插入穿刺針,絲線縫扎后用注射器灌注Liberase酶溶液(1.5mg/ml)。胰腺充分膨脹后將胰腺切片,置消化罐中并放入數(shù)顆玻璃珠,加500μm孔徑的不銹鋼絲網(wǎng),旋緊罐蓋。開啟蠕動(dòng)泵將剩余的Liberase酶溶液泵入罐內(nèi),控制罐內(nèi)溫度37℃,手動(dòng)振搖消化罐循環(huán)消化,于10分鐘后開始取樣鏡檢,待大部分胰島分離后用冷的含10%胎牛血清(FBS)的RPMI164
陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)該如何檢驗(yàn)選擇2013/03/29
如何選擇陽(yáng)性對(duì)照?陽(yáng)性對(duì)照即是100%出現(xiàn)該結(jié)果的“實(shí)驗(yàn)”組,材料是確定的;陰性對(duì)照則是肯定不會(huì)出現(xiàn)結(jié)果的“實(shí)驗(yàn)組”,材料也是確定的;之所以加引號(hào),是因?yàn)槌藢?shí)驗(yàn)需要驗(yàn)證的變量,其他條件全部都是一樣的,用來(lái)排除其他實(shí)驗(yàn)情況對(duì)結(jié)果產(chǎn)生的影響。例如,驗(yàn)證一轉(zhuǎn)基因玉米是否有抗藥性,需要選擇同種的轉(zhuǎn)基因成功的抗藥玉米做陽(yáng)性對(duì)照,無(wú)轉(zhuǎn)基因的做陰性對(duì)照,從而保證除了該基因其他條件一致;一個(gè)成功的實(shí)驗(yàn),通常情況下必須有陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照排除其他干擾情況如果您需要合適的陽(yáng)性對(duì)照,請(qǐng)核查數(shù)據(jù)表,上面通常會(huì)有建議的
干擾素的實(shí)驗(yàn)步驟及其注意事項(xiàng)2013/03/27
干擾素(IFN)是一種廣譜抗病毒劑,并不直接殺傷或抑制病毒,而主要是通過(guò)細(xì)胞表面受體作用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白,從而抑制乙肝病毒的復(fù)制;同時(shí)還可增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)、巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的活力,從而起到免疫調(diào)節(jié)作用,并增強(qiáng)抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)(主要是糖蛋白),是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們?cè)谕N細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長(zhǎng),以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。實(shí)驗(yàn)步驟1.制備誘生劑:采用NDVF系弱毒株,以雞胚尿囊液形式保存于-20℃,
ELISA雙抗體夾心法及間接法的正確操作步驟2013/03/25
ELISA雙抗體夾心法及間接法的正確操作步驟elisa試劑盒原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等
軟瓊脂實(shí)驗(yàn)步驟新篇章2013/03/21
軟瓊脂(softagar)實(shí)驗(yàn)一般用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞的集落形成能力?,F(xiàn)在這種方法越來(lái)越多的用于分離癌細(xì)胞,也可以用來(lái)確認(rèn)癌細(xì)胞是否具有癌化特性,為進(jìn)一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎(chǔ)。該方法看似簡(jiǎn)單,但如果細(xì)節(jié)掌握不好,往往導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或數(shù)據(jù)缺乏說(shuō)服力。如果你曾經(jīng)在這個(gè)實(shí)驗(yàn)上栽了跟頭,請(qǐng)不妨在如下幾個(gè)方面進(jìn)行嘗試:1.要確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(tài)(80℃),尤其是在做基底時(shí),如果瓊脂凝固過(guò)快會(huì)導(dǎo)致基底不均一;2.做瓊脂基底是應(yīng)避免產(chǎn)生小氣泡,一旦有小氣泡產(chǎn)生,應(yīng)該立即將氣泡趕走;3
血清試驗(yàn)過(guò)程常見問(wèn)題解析2013/03/19
血清的常見問(wèn)題解答一、保存血清的方法?血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。二、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。三、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀
試劑盒技術(shù)解決方案2013/03/18
elisa試劑盒技術(shù)解決方案實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1加樣器不準(zhǔn)確;尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響極大;2保溫設(shè)備不良;3洗滌用水不規(guī)范。1校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國(guó)等);2仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;3必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來(lái)水、礦泉水等。4認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書。樣品加樣1加樣不準(zhǔn)確;2沒有混勻。1加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。2加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。洗滌洗滌不*1每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;2選用
如何選購(gòu)elisa試劑盒2013/03/15
在購(gòu)買elisa試劑盒過(guò)程中,需要了解哪些信息呢,什么樣的產(chǎn)品才算是好的呢?大家都一般都擔(dān)心什么問(wèn)題呢,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有什么需要注意或者擔(dān)心的嗎?經(jīng)常會(huì)有客戶遇到如何訂購(gòu)試劑盒的問(wèn)題,滬鼎生物給你以下建議:如何購(gòu)買elisa試劑盒,滬鼎生物為你出謀劃策。購(gòu)買試劑盒要注意有效期,盡量買剛出廠不久的。好的產(chǎn)品要盡可能買廠家的,不過(guò)不一定是zui有名的那家,比他稍差一點(diǎn)的廠家也許在部分產(chǎn)品上并不差,甚至更好。大家擔(dān)心無(wú)非就是實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯闪?,試劑盒結(jié)果出來(lái)以后如何解釋。只要是商品化試劑盒,都是比較穩(wěn)定的,但是
操作因素可致elisa結(jié)果差異2013/03/13
操作因素可致elisa結(jié)果差異一、操作因素對(duì)ELISA結(jié)果的影響ELISA操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。以下敘述各個(gè)步驟中的影響因素。1.加樣2.溫育3.洗滌4.顯色5.比色二、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽(yáng)性”和“陰性”來(lái)報(bào)告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽(yáng)性判斷值”(cut-offvalue,CO值),這是定性免疫測(cè)定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。三、標(biāo)本復(fù)查ELISA手工檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果
免疫血清理化性質(zhì)2013/03/08
免疫血清理化性質(zhì)滬鼎生物專業(yè)供應(yīng)Amresco公司生化試劑全線產(chǎn)品,常備現(xiàn)貨,折扣超好;實(shí)驗(yàn)室常用試劑:Amresco牛血清白蛋白(全組分)、Amresco牛血清白蛋白V、Amresco聚乙二醇8000、Amresco二甲基亞砜、Amresco氨芐青霉素鈉、Amresco硫酸鏈霉素、Amresco辣根過(guò)氧化物酶、Amresco鹽酸四環(huán)素等,滬鼎都備現(xiàn)貨,具體產(chǎn)品請(qǐng)查看目錄,或者致電免疫血清亦稱抗血清。含有抗體的血清制劑。種類很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。(1)抗毒素,將類
elisa試劑盒特點(diǎn)描述2013/03/06
elisa試劑盒采用酶聯(lián)免疫方法,48T/96T兩種規(guī)格的試劑盒,48T包裝可測(cè)42個(gè)標(biāo)本,96T的包裝可測(cè)87個(gè)標(biāo)本。產(chǎn)品涉及到動(dòng)植物種屬,產(chǎn)品齊全。我司在為了公司效益的情況下,充分滿足客戶對(duì)產(chǎn)品的需求,除了供應(yīng)人、大鼠、小鼠elisa試劑盒等產(chǎn)品外,也供應(yīng)豚鼠、倉(cāng)鼠、蛇、魚、裸鼠等elisa試劑盒。ELISA試劑盒的特點(diǎn):1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。2
elisa操作問(wèn)題常見解決辦法2013/03/05
elisa操作問(wèn)題常見解決辦法ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。下面分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法1選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因:1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣
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