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牛血清白蛋白（BSA）相關(guān)知識點2025/07/07

一、基本概念與來源定義：牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是從牛血清中分離的球狀蛋白質(zhì)，占牛血清總蛋白的50%-60%，是血漿中含量最豐-富的載體蛋白。分子特征分子量：66.5kDa（非糖基化）等電點：pH4.7-4.9消光系數(shù)：E1%=6.6（280nm）二、物理狀態(tài)特性固態(tài)特性外觀：白色至淡黃色凍干粉末含水量：≤5%（優(yōu)質(zhì)級）熱穩(wěn)定性：56℃下可保持10小時不變性溶液狀態(tài)溶解性：極易溶于水（1mg/mL可完-全溶解）構(gòu)象變化：pH聚集行為：濃度50mg/mL時易形成

植物激素的種類及其主要作用2025/06/30

一、植物激素概述植物激素是由植物自身合成的微量有機化合物，在極低濃度下就能產(chǎn)生顯著的生理效應(yīng)。目前公-認的六大類經(jīng)典植物激素包括：生長素、赤霉素、細胞分裂素、脫落酸、乙烯和油菜素內(nèi)酯。二、主要植物激素及其功能1.生長素（Auxin）代表物質(zhì)：吲哚-3-乙酸(IAA)核心功能：促進細胞伸長（莖稈生長）、誘導不定根形成（扦插繁殖）、維持頂端優(yōu)勢（抑制側(cè)芽）、調(diào)控向性運動（向光性/向地性）應(yīng)用實例：NAA常用于果樹?；ū９?，2,4-D用作選擇性除草劑2.赤霉素（Gibberellin）代表物質(zhì)：GA3

ELISA實驗的核心三要素：不可-或缺的三大試劑2025/06/24

一、ELISA基本原理ELISA通過抗原-抗體的特異性結(jié)合，利用酶催化底物顯色反應(yīng)進行定量或定性分析。常見的類型包括直接法、夾心法和競爭法，但其核心步驟均依賴于以下三類關(guān)鍵試劑：二、核心試劑一：包被抗體/抗原——實驗的“基石”?作用?：作為固相載體（微孔板）的固定化分子，捕獲目標物。選擇要點?：純度與活性?：高純度避免交叉反應(yīng)，確保結(jié)合效率（建議使用單克隆抗體）。包被濃度優(yōu)化?：預實驗確定最佳濃度（通常1-10μg/mL），濃度過高易導致空間位阻。緩沖液選擇?：碳酸鹽緩沖液（pH9.6）常用，避

細胞培養(yǎng)需要哪些添加物及作用說明2025/06/18

細胞培養(yǎng)添加物是優(yōu)化細胞生長環(huán)境的關(guān)鍵組分，其作用涵蓋營養(yǎng)供給、pH穩(wěn)定及代謝調(diào)控等。以下是主要添加物的分類說明：一、基礎(chǔ)營養(yǎng)添加物?L-谷氨酰胺??作用?：核心能量來源，參與蛋白質(zhì)合成和核酸代謝36。?缺陷?：水溶液中自發(fā)降解（4℃存放1周降解50%），產(chǎn)生有毒氨類物質(zhì)36。?替代方案?：?GlutaMAX-I?（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）：通過肽酶緩慢釋放谷氨酰胺，穩(wěn)定性高，避免氨毒性。?D-葡萄糖??作用?：主要碳源，支持能量代謝。?類型差異?：低糖型（1g/L）：適合貼壁細胞（如成纖維細

如何科學挑選適用的ELISA試劑盒？實驗人必看的避坑指南2025/06/10

一、明確檢測目標?1.檢測對象是什么？?明確待測物是細胞因子、激素、病毒抗體還是其他蛋白。不同試劑盒針對的抗原表位和抗體對可能不同。關(guān)鍵點：查看試劑盒說明書中的“檢測范圍”和“交叉反應(yīng)”，確認是否覆蓋你的目標物種和異構(gòu)體（如人/小鼠/大鼠）。2.需要定量還是定性？?定量試劑盒需提供標準品和標準曲線，適合精確測量濃度；定性試劑盒（如診斷用）通常只判斷陰陽性。二、匹配樣本類型?不同樣本的處理方式可能影響檢測結(jié)果：血清/血漿?：需避免溶血、脂血（可能引起非特異性結(jié)合）。細胞培養(yǎng)上清?：注意培養(yǎng)基中是否

細胞株保存技術(shù)全流程2025/06/06

一、保存方法選擇與技術(shù)參數(shù)優(yōu)化1.短期保存（-80℃）凍存液配方?通用型：10%DMSO+90%FBS，需預冷至4℃并與細胞懸液等體積混合低毒性型：5%DMSO+2%FBS+3%海藻糖（適用于敏感細胞）程序降溫?采用梯度冷凍：4℃→-20℃（-1℃/min）→-80℃（過夜）→液氮使用程序降溫盒可替代梯度操作2.長期保存（液氮）氣相保存?溫度范圍：-150℃～-190℃，需配備氧濃度監(jiān)測（＜500ppm）液相保存?采用雙層凍存管（耐壓＞500psi），推薦CryoBox™定位系統(tǒng)二、標準化操作流

ELISA試劑盒為何“罷工“？六大變質(zhì)原因深度剖析2025/05/27

一、方法學缺陷：競爭抑制法成重災區(qū)操作時差效應(yīng)：競爭抑制法(HBeAb/HBcAb檢測常用)易因加樣時間差異導致不-公平競爭，重復性差質(zhì)量控制難點：相較于雙抗體夾心法等，該模式對溫育時間敏感度更高二、試劑因素：批間差異與保存條件生產(chǎn)波動：不同批次間活性成分濃度存在天然差異，建議選擇長批號試劑儲存不當：2-8℃避光保存為基本要求，反復凍融會破壞酶標記物活性（尤其HRP標記抗體）分裝技巧：使用率低的試劑應(yīng)分裝保存，避免整盒反復凍融三、樣本污染：隱形殺手清單干擾類型具體表現(xiàn)內(nèi)源性類風濕因子、補體、異嗜

馬血清在細胞生物學中的關(guān)鍵作用2025/05/19

一、馬血清：不只是營養(yǎng)源，更是細胞功能的“調(diào)控者”?血清是細胞培養(yǎng)基中不可-或缺的添加物，為細胞提供營養(yǎng)、生長因子、激素及貼壁因子。與胎牛血清相比，?馬血清（HorseSerum,HS）?具有以下特性：1.成分差異?：生長因子譜不同?：馬血清中表皮生長因子（EGF）、胰島素樣生長因子（IGF）含量較高，而胎牛血清富含成纖維細胞生長因子（FGF）。激素濃度較低?：適合對激素敏感的細胞（如某些神經(jīng)元或干細胞）。免疫球蛋白含量低?：減少免疫反應(yīng)干擾，適用于疫苗生產(chǎn)或病毒培養(yǎng)。2.物理特性?：粘度較低?

細胞凍存技術(shù)全攻略：科學原理與標準化操作詳解2025/05/12

一、凍存原理：對抗低溫損傷的三大機制?1.?冷凍保護劑：細胞的“生命盾-牌”?作用機理?DMSO（二甲基亞砜）或甘油作為滲透性保護劑，穿透細胞膜后：降低細胞內(nèi)水分冰點，抑制冰晶形成與水分子形成氫鍵，延緩結(jié)晶速率穩(wěn)定膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，防止低溫破裂濃度選擇?常規(guī)使用5%-10%濃度，高濃度（如20%）可能引發(fā)毒性，需平衡保護效果與細胞損傷。2.?程序降溫：精準控制冰晶生長?相變危險區(qū)?（-15℃至-60℃）：此階段冰晶最易形成，需以?1℃/min?速率緩慢降溫，避免大冰晶刺穿細胞器。玻璃化冷凍?：超快速降

細胞分離液的相關(guān)介紹2025/05/07

一、細胞分離液的工作原理?細胞分離液是一種基于密度梯度離心原理設(shè)計的介質(zhì)，常用成分包括聚蔗糖（如Ficoll）或硅膠顆粒（如Percoll）。不同細胞因大小、密度和沉降系數(shù)差異，在離心過程中分層，從而被精準分離。例如：外周血單個核細胞（PBMC）?可通過Ficoll分離液與紅細胞、粒細胞區(qū)分；腫瘤細胞?可通過特殊配方的分離液從組織碎片中富集。二、細胞分離液的標準操作流程?1.樣本準備?血液樣本需抗凝處理（如EDTA抗凝），組織樣本需機械破碎或酶消化成單細胞懸液。過濾去除大顆粒雜質(zhì)（推薦70μm濾

ELISA試劑盒8大特殊樣本處理方法2025/04/21

一、唾液樣本采集規(guī)范空腹采集，避免進食后30分鐘內(nèi)取樣（唾液淀粉酶含量升高干擾檢測）使用無菌唾液采集管，避免口腔黏膜細胞混入處理流程樣本收集后立即于-70℃速凍1小時，冰上融化后10000rpm離心10分鐘取上清短期保存（二、尿液樣本采集要求無菌管收集中段尿，避免微生物污染樣本體積需≥50μL（適配微量ELISA試劑盒）預處理要點2000-3000rpm離心20分鐘，取上清檢測；若沉淀復現(xiàn)需二次離心高濃度尿素樣本建議1:5PBS稀釋后檢測（降低基質(zhì)效應(yīng)）三、糞便樣本均質(zhì)化處理取干燥糞便塊（50m

核糖體的相關(guān)介紹2025/04/14

一、核糖體的定義與結(jié)構(gòu)?核糖體?是細胞中負責?蛋白質(zhì)合成?的分子機器，由核糖體RNA（rRNA）和多種蛋白質(zhì)組裝而成。分類?：原核生物核糖體?（70S）：由30S小亞基（16SrRNA+21種蛋白）和50S大亞基（23S/5SrRNA+34種蛋白）組成。真核生物核糖體?（80S）：包含40S小亞基（18SrRNA）和60S大亞基（28S/5.8S/5SrRNA）。結(jié)構(gòu)特征?：功能活性位點?：包括解碼中心（識別mRNA密碼子）、肽基轉(zhuǎn)移酶中心（催化肽鍵形成）及新生肽鏈通道。動態(tài)組裝?：核糖體亞基在

白細胞介素6（IL-6）：免疫系統(tǒng)的“開關(guān)”與科研新視角2025/04/07

一、定義與分子特性白細胞介素6（IL-6）?是一種由184個氨基酸組成的糖蛋白，分子量約22-28kDa，其基因位于人類第7號染色體，通過四螺旋結(jié)構(gòu)傳遞信號?。IL-6主要由免疫細胞（如單核/巨噬細胞、T細胞）和非免疫細胞（如內(nèi)皮細胞、腫瘤細胞）分泌，是連接先天免疫與適應(yīng)性免疫的“樞紐型”細胞因子?。二、生物學功能與信號傳導1.?核心生物學功能??免疫調(diào)節(jié)?：激活B細胞分化為漿細胞，促進抗體生成；調(diào)控Th17/Treg細胞平衡，維持免疫穩(wěn)態(tài)?。?炎癥放大?：誘導肝臟合成C反應(yīng)蛋白（CRP）、鐵調(diào)

前列腺素E2（PGE2）的相關(guān)介紹2025/03/26

一、PGE2的定義與分子特性1.化學本質(zhì)結(jié)構(gòu)：PGE2屬于類花生酸家族，由20碳脂肪酸（花生四烯酸）衍生而來，核心結(jié)構(gòu)包含一個五元環(huán)和兩條側(cè)鏈。合成路徑：關(guān)鍵酶：環(huán)氧合酶（COX-1/COX-2）、前列腺素E合成酶（PGES）。代謝路徑：細胞膜磷脂→磷脂酶A2→花生四烯酸→COX→PGH2→PGES→PGE2。2.動態(tài)調(diào)控特點半衰期極短：僅約5分鐘，需持續(xù)合成以維持作用。局部釋放：僅在合成部位附近發(fā)揮作用，不進入全身循環(huán)。二、PGE2的核心生物學功能1.炎癥與免疫調(diào)節(jié)促炎作用：激活血管內(nèi)皮細胞，

溶酶體的相關(guān)介紹2025/03/18

?一、溶酶體的基本概念1.定義溶酶體是存在于真核細胞中的一種膜包裹的細胞器，其核心功能是通過內(nèi)部儲存的?60多種酸性水解酶?（如蛋白酶、脂酶、核酸酶等），分解蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等生物大分子，同時回收小分子物質(zhì)供細胞再利用。?2.發(fā)現(xiàn)歷史?1955年?：比利時科學家ChristiandeDuve首-次通過電鏡發(fā)現(xiàn)溶酶體，并因此獲得1974年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。關(guān)鍵突破?：溶酶體酶的發(fā)現(xiàn)揭示了細胞“自我清理”的機制，顛-覆了人們對細胞代謝的認知。3.結(jié)構(gòu)組成?膜結(jié)構(gòu)?：溶酶體膜富含特殊蛋白（如LA

抗體的相關(guān)介紹2025/03/11

抗體，也被稱為免疫球蛋白，是一類由漿細胞分泌的大型Y形蛋白質(zhì)。它們主要存在于脊椎動物的血液、組織液等體液中，以及B細胞的細胞膜表面?？贵w的核心功能是特異性識別并結(jié)合抗原，即外來病原體（如細菌、病毒）或異常細胞，從而啟動一系列的免疫反應(yīng)以清除這些有害物質(zhì)?？贵w具有高度特異性，即每一種抗體只能識別并結(jié)合特定的抗原，這種特性確保了免疫反應(yīng)的精準性和有效性。此外，抗體還具有多種生物活性，如中和病原體毒素、激活補體系統(tǒng)、標記病原體以便吞噬細胞識別和清除等。二、?抗體試劑的多樣化用途1.?免疫組化實驗?在免

腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA實驗2025/03/03

一、實驗概述?腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA實驗是一種常用的免疫學實驗方法，用于檢測生物樣本（如血清、血漿等）中TNF-α的濃度。該實驗基于酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）原理，通過雙抗體夾心法實現(xiàn)TNF-α的特異性檢測。二、實驗步驟?準備工作?獲取TNF-αELISA試劑盒，確保試劑盒在保質(zhì)期內(nèi)且保存條件符合要求。準備實驗所需器材，包括酶標儀（450nm波長）、高精度加樣器及槍頭、37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水等。?包被孔板?如使用未包被好的孔板，需自行用TNF-α抗體進行包被。將包被好

腫瘤壞死因子α的相關(guān)介紹2025/02/24

一、概念腫瘤壞死因子α（TNF-α），是一種由活化的巨噬細胞、T淋巴細胞、B淋巴細胞、自然殺傷細胞（NK細胞）等多種細胞分泌的細胞因子。它屬于促炎細胞因子，參與正常炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)，并在炎癥、細胞凋亡和免疫系統(tǒng)發(fā)育中起著核心作用。二、功能1.免疫調(diào)節(jié)作用：TNF-α能夠增強巨噬細胞的吞噬能力、殺菌活性和抗原呈遞能力，促進巨噬細胞分泌其他細胞因子和炎癥介質(zhì)，如白細胞介素1（IL-1）、白細胞介素6（IL-6）、干擾素γ（IFN-γ）等，從而放大免疫反應(yīng)，增強機體對病原體的抵抗力。TNF-α還能夠

激素的相關(guān)介紹2025/02/19

1.定義激素，又稱荷爾蒙，源自希臘語，意為“激活”。它們是由內(nèi)分泌腺體或內(nèi)分泌細胞合成并釋放到血液中的微量化學物質(zhì)，通過血液循環(huán)作用于特定的靶器官或組織，從而調(diào)節(jié)機體的各種生理活動。激素在人體內(nèi)的平衡對維持正常生理功能至關(guān)重要，它們在代謝、生長、發(fā)育、繁殖、性別特征等方面發(fā)揮著不可替代的作用。2.種類激素種類繁多，按化學結(jié)構(gòu)大體可以分為四大類：?類固醇激素?：由膽固醇合成，能夠穿過細胞膜直接作用于細胞核。包括皮質(zhì)醇、雌激素、孕激素、睪酮等。類固醇激素在調(diào)節(jié)免疫、代謝、生殖等方面具有關(guān)鍵作用。?氨

流式細胞術(shù)在生物實驗中的應(yīng)用2025/02/19

流式細胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）作為一種先進的細胞分析技術(shù)，自其誕生以來，便在生物醫(yī)學研究領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用。該技術(shù)通過高速、多參數(shù)地分析單個細胞或微粒的熒光信號和散射光信號，為研究者提供了詳盡的細胞生物學信息，今天恒遠生物帶你認識細胞術(shù)在生物實驗中的具體應(yīng)用。一、流式細胞術(shù)的基本原理流式細胞術(shù)的核心在于流式細胞儀的使用。該儀器利用鞘液包繞的樣品流通過激光束，激發(fā)細胞或微粒上的熒光染料，產(chǎn)生熒光信號和散射光信號。這些信號被光電倍增管接收并轉(zhuǎn)換為電信號，隨后通過計算機系統(tǒng)進行