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滬鼎生物|蛋白質(zhì)糖基化位點檢測實驗步驟2024/02/28: 蛋白質(zhì)糖基化位點檢測：用酶或化學(xué)脫糖基化、通過選擇性標(biāo)記或通過凝集素親和層析法是檢測蛋白糖基化常用方法。一、用PNGaseF（N-多糖酶）處理。1.以0.1mol/L磷酸鈉（或Tris-HCl，而不用檸檬酸）緩沖液，pH7.4(7.0~8.0)配制高達(dá)2mg/ml的蛋白溶液，并含50mmol/Lβ-巰基乙醇和0.1%SDS，在水浴中煮沸2分鐘。2.加1/10體積的10%NP-40溶液（或使SDS濃度少于或等于0.17%，NP-40：SDS的質(zhì)量比在終反應(yīng)中至少是7:1)。3.加PNGaseF到終

滬鼎生物|干燥箱和恒溫箱的使用方法及注意事項2024/02/22: 干燥箱用于物品的干燥和干熱滅菌，恒溫箱用于微生物和生物材料的培養(yǎng)。這兩種儀器的結(jié)構(gòu)和使用方法相似，干燥箱的使用溫度范圍為50~250℃，常用鼓風(fēng)式電熱以加速升溫。恒溫箱的最高工作溫度為60℃。1．使用方法（1）將溫度計插入座內(nèi)（在箱頂放氣調(diào)節(jié)器中部）。（2）把電源插頭插入電源插座。（3）將電熱絲分組開頭轉(zhuǎn)到1或2位置上（視所需溫度而定），此時可開啟鼓風(fēng)機(jī)促使熱空氣對流。電熱絲分組開頭開啟后，紅色指示燈亮。（4）注意觀察溫度計。當(dāng)溫度計溫度將要達(dá)到需要溫度時，調(diào)節(jié)自動控溫旋鈕，使綠色指示燈正好發(fā)亮

滬鼎生物| 小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA實驗說明2024/01/31: 檢測范圍：25ng/L-800ng/L使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中腫瘤壞死因子α（TNF-α）含量。實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平。用純化的小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α（TNF-α），再與HRP標(biāo)記的腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的

滬鼎生物|細(xì)胞污染是怎樣造成的2024/01/23: 細(xì)胞培養(yǎng)中常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。接下來讓我們一起來了解在哪些情況下會造成細(xì)胞污染一、違規(guī)操作：1.為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗。2.器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用。3.超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗。4.不帶手套，徒手操作。5.細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等儀器設(shè)備以及的實驗服和拖鞋，未定期消毒

滬鼎生物|試劑空白與樣品空白的區(qū)別2024/01/19: 試劑空白是指由于測試試劑本身而帶來的測試結(jié)果的微小的正誤差。古朵努力使其生產(chǎn)的測試試劑的空白值為負(fù)，特別指出的是由于這個負(fù)的空白值非常小，從而不會影響測定的準(zhǔn)確度。測試試劑的空白值對于一項測試尤為重要，當(dāng)進(jìn)行低濃度測定時應(yīng)該從測試結(jié)果中扣除測試試劑的空白值。例如，如果從0.06mg/L的低濃度測試結(jié)果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，就會使zui終測定結(jié)果改變至少30%。而從1.23mg/L的高濃度測試結(jié)果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，zui終測定結(jié)果只發(fā)生了2%的變化。測定試劑的空白值

小鼠皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射和靜脈注射2024/01/11: 皮下注射給藥將藥液推入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)的過程。作皮下注射常選項背或大腿內(nèi)側(cè)的皮膚。操作時，常規(guī)消毒注射部位皮膚，然后將皮膚提起，注射針頭取一鈍角角度刺入皮下，把針頭輕輕向左右擺動，易擺動則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無回血，可緩慢地將藥物注入皮下。拔針時左手拇、食指捏住進(jìn)針部位片刻，以防止藥物外漏。注射量約為0.1～0.3ml/10g體重。皮內(nèi)注射給藥將藥液注入皮膚的表皮河真皮之間，觀察皮膚血管的通透性變化或皮內(nèi)反應(yīng)，接種、過敏實驗等一般作皮內(nèi)注射。先將注射部位

大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)ELISA試劑盒使用說明書2024/01/05: 大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.2μg/ml-9μg/ml使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清血漿及相關(guān)液體樣本中載脂蛋白B48(Apo-B48)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)水平。用純化的大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入載脂蛋白B48(Apo-B48)，再與HRP標(biāo)記的載脂蛋白B48(Apo-B48)抗體結(jié)合，形

細(xì)胞因子免疫學(xué)檢驗法之ELISA法2023/12/27: 細(xì)胞因子多為多肽、蛋白或者糖蛋白，具備良好的抗原性，利用免疫學(xué)技術(shù)可以方便獲得不同細(xì)胞因子的抗血清、多克隆抗體或者單克隆抗體。細(xì)胞因子檢測無論是對免疫學(xué)、分子生物學(xué)的基礎(chǔ)研究，還是對闡明某些疾病的發(fā)病機(jī)理，指導(dǎo)臨床治療均具有重要的意義。免疫學(xué)檢測法是細(xì)胞因子檢測常用的方法之一。資料表明細(xì)胞因子與疾病的病理過程密切相關(guān)，細(xì)胞因子檢測及其基因表達(dá)狀況的測定正呈上升之勢。美迪西不僅可以為客戶提供基于Bio-Plex200、流式CBA、MSD、Luminex系統(tǒng)等全面進(jìn)行各種singleplex或mul

ELISA中的抗原與抗體的反應(yīng)2023/12/21: 抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈（L）和兩個重鏈（H）的單體組成。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤模笑剩╧appa）和λ（Lambda）兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ（gamma）鏈和μ（mu）鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異，稱為可變區(qū)，分別用VH和VL表示。兩者構(gòu)

人乙?；M蛋白(A-STX17)ELISA試劑盒使用說明書2023/12/14: 人乙?；M蛋白(A-STX17)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1pg/ml-50pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中乙?；M蛋白(A-STX17)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人乙酰化組蛋白(A-STX17)水平。用純化的人乙?；M蛋白(A-STX17)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入乙?；M蛋白(A-STX17)，再與HRP標(biāo)記的乙?；M蛋白(A-STX17)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗

細(xì)胞消化不下來？解決方案來了！2023/12/07: 細(xì)胞消化不下來？小伙伴們在給貼壁細(xì)胞傳代的時候有沒有遇到細(xì)胞消化不下來的情況呢？有時候等了10分鐘甚至20分鐘細(xì)胞仍巋然不動，繼續(xù)等待怕消化過度，暴力吹下又怕對細(xì)胞造成機(jī)械損傷，可謂進(jìn)退兩難。小尚為大家總結(jié)了細(xì)胞難消化的原因，以及對應(yīng)的處理方式：（本文僅針對胰蛋白酶，若您使用其他類型的細(xì)胞解離試劑，可以在評論區(qū)留言）1.細(xì)胞貼壁緊不同種類的細(xì)胞貼壁的松緊程度是不一樣的，比如293系列細(xì)胞貼壁很松，是晃一晃就可能掉下來的程度。而MCF10A細(xì)胞卻貼壁很緊，可能需要消化5-10min甚至更久才能脫落

關(guān)于糖酵解的反應(yīng)過程的介紹2023/12/01: 糖酵解過程是從葡萄糖開始分解生成丙酮酸的過程，全過程共有10步酶催化反應(yīng)。1.葡萄糖磷酸化糖酵解第一步反應(yīng)是由己糖激酶催化葡萄糖的C6被磷酸化，形成6-磷酸葡萄糖。該激酶需要Mg2+離子作為輔助因子，同時消耗一分子ATP，該反應(yīng)是不可逆反應(yīng)。2.6-磷酸葡萄糖異構(gòu)轉(zhuǎn)化為6-磷酸果糖這是一個醛糖-酮糖同分異構(gòu)化反應(yīng)，此反應(yīng)由磷酸己糖異構(gòu)酶催化醛糖和酮糖的異構(gòu)轉(zhuǎn)變，需要Mg2+離子參與，該反應(yīng)可逆。3.6-磷酸果糖磷酸化生成1，6-二磷酸果糖此反應(yīng)是由磷酸果糖激酶催化6-磷酸果糖磷酸化生成1，6-二

小鼠皮質(zhì)酮 (CORT)ELISA試劑盒使用說明書2023/11/23: 小鼠皮質(zhì)酮(CORT)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T2μg/L-80μg/L使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中皮質(zhì)酮(CORT)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠皮質(zhì)酮(CORT)水平。用純化的小鼠皮質(zhì)酮(CORT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入皮質(zhì)酮(CORT)，再與HRP標(biāo)記的皮質(zhì)酮(CORT)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化

ELISA技術(shù)中的抗原與抗體的反應(yīng)2023/11/16: 1.2.1抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈（L）和兩個重鏈（H）的單體組成。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤?，有κ（kappa）和λ（Lambda）兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ（gamma）鏈和μ（mu）鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異，稱為可變區(qū)，分別用VH和VL表

bca法制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線點發(fā)生較大偏高的原因2023/11/10: BCA法是一種常用的蛋白質(zhì)濃度檢測方法，它通過比色反應(yīng)測定樣品中的蛋白質(zhì)濃度。如果在BCA法制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時出現(xiàn)了偏高的情況，可能有以下原因：標(biāo)準(zhǔn)品的配制不準(zhǔn)確：在BCA法中，標(biāo)準(zhǔn)品的配制非常關(guān)鍵，如果標(biāo)準(zhǔn)品的濃度不準(zhǔn)確，會導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線的點位偏高或者偏低。反應(yīng)時間過長：在BCA法中，試劑的反應(yīng)時間對結(jié)果有較大影響。如果反應(yīng)時間過長，會導(dǎo)致反應(yīng)過度，使得吸光度值偏高。樣品中含有干擾物質(zhì)：某些樣品中可能含有干擾物質(zhì)，如膽固醇、尿素等，這些物質(zhì)可能被誤判為蛋白質(zhì)，從而導(dǎo)致測量結(jié)果偏高。非特異性反應(yīng)：BC

人表皮生長因子(EGF)ELISA試盒使用說明書2023/11/02: 人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T25pg/ml-480pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定樣本表皮生長因子(EGF)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人表皮生長因子(EGF)水平。用純化的人表皮生長因子(EGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子(EGF)，再與HRP標(biāo)記的表皮生長因子(EGF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過CHE底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化

滬鼎生物｜高敏ELISA試劑盒使用注意事項須知2023/10/27: elisa試劑盒技術(shù)在60年代提出，因為具有靈敏度高、特異性強(qiáng)，酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定，操作方法簡便快速、無放射性污染以及應(yīng)用范圍廣等很多優(yōu)點，ELISA試劑盒迅速在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論研究，臨床病毒學(xué)和生物化學(xué)檢驗等工作中獲得了廣泛的應(yīng)用。但是在使用ELISA試劑盒的時候還是有很多問題需要我們注意一下的！ELISA試劑盒注意問題：1、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。2、底物請避光保存。3、嚴(yán)格按照技術(shù)說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。4、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染

ELISA分析優(yōu)缺點2023/10/20: ELISA實驗所有方法的缺點很明顯：1、重復(fù)性不好；2、收自身抗體、嗜異性抗體等干擾，易出現(xiàn)假陽性；3、不論儀器和手工操作，干擾因素較多。影響最大的是溫度和時間。直接法（directELISA）將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢：操作手續(xù)簡略，因無須運用二抗可防止交互反響。缺陷：實驗中的一抗都得用酶符號，但不是每種抗體都適合做符號，費用相對進(jìn)步。間接法（indirectELISA）此測定辦法與直接法相似，不一樣在于一級抗體沒有酶符

植物氨基肽酶(AP)ELISA試劑盒使用說明書2023/10/13: 植物氨基肽酶(AP)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1.6U/L-60U/L使用目的：本試劑盒用于測定植物樣本中氨基肽酶(AP)活性。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物氨基肽酶(AP)水平。用純化的植物氨基肽酶(AP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入氨基肽酶(AP)，再與HRP標(biāo)記的氨基肽酶(AP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過CHE底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化

根據(jù)不同條件分類趨化因子的類型2023/09/28: 結(jié)構(gòu)分類趨化性細(xì)胞因子根據(jù)其氨基端（N端）半胱氨酸的排列方式，可分為CXC、CC、XC和CX3C四個亞族：CC趨化因子亞族：CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CCL8、CCL9、CCL10、CCL11、CCL12、CCL13、CCL14、CCL15、CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、CCL23、CCL24、CCL25、CCL26、CCL27、CCL28CXC趨化因子亞族：CXCL1、CXCL2、CXCL3、CX

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