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上海信帆生物：蛋白凝膠染料隨心選，不止是考馬斯藍(lán)2016/05/26: 與DNA凝膠電泳一樣，蛋白質(zhì)凝膠電泳也是實(shí)驗(yàn)室中稀松平常的工作。無(wú)論是Westernblot還是質(zhì)譜分析，都離不開(kāi)蛋白電泳。研究人員通過(guò)大?。?D）和電荷（2D）來(lái)分辨蛋白質(zhì)。當(dāng)然，僅僅分離蛋白是不夠的，它們必須要經(jīng)過(guò)染色。染料的選擇有很多，具體選哪種，這取決于靈敏度要求、現(xiàn)有的設(shè)備和下游的應(yīng)用。常規(guī)之選研究人員主要使用三種染料來(lái)處理日常的蛋白凝膠：考馬斯藍(lán)、銀染和熒光。據(jù)Sigma-Aldrich公司蛋白技術(shù)的研發(fā)JeffreyTurner介紹，染料的選擇基本上可以歸結(jié)為“靈敏度vs.速度”。

上海信帆生物：如何選擇合適的蛋白酶抑制劑2016/05/24: 即使蛋白酶對(duì)細(xì)胞功能很重要，但你也有不想見(jiàn)到它們的時(shí)候。比如，在純化蛋白質(zhì)的時(shí)候，你可不想讓蛋白酶大肆吞噬你的目標(biāo)蛋白吧，特別是低豐度蛋白。如今，市場(chǎng)上有多種蛋白酶抑制劑可供選擇，幫助你在必要時(shí)停止蛋白酶的活性。為了對(duì)付細(xì)胞和組織樣品中存在的各種蛋白酶，抑制劑的選擇也在不斷增加。目前，主要有四種類型的蛋白酶，根據(jù)他們活性位點(diǎn)中的氨基酸命名：絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。蛋白酶抑制劑可以特異針對(duì)一種蛋白酶，也可以是廣譜的。人們通常根據(jù)抑制劑作用的蛋白酶類型，以及它們可逆

上海信帆生物：人抑瘤素M與小鼠LIF2016/05/22: 在轉(zhuǎn)基因和敲除研究中，維持多能性對(duì)利用小鼠胚胎干(ES)細(xì)胞至關(guān)重要。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多因子可以影響ES細(xì)胞的多能性,其中之一就表現(xiàn)在白血病抑制因子（LIF）對(duì)ES細(xì)胞培養(yǎng)的影響。關(guān)于抑瘤素M（OSM）能補(bǔ)償LIF在ES細(xì)胞培養(yǎng)中的作用，對(duì)此存在不一致的報(bào)道。一些研究提示在維持ES細(xì)胞多能性方面，OSM不如LIF有效。然而，其他研究發(fā)現(xiàn)它們是等效的。在本研究中，我們證明在維持ES細(xì)胞多能性上，人OSM擁有與小鼠LIF相類似的功效，包括長(zhǎng)期（超過(guò)10天）維持多能性、體外分化的能力、活化STAT3的能力和

上海信帆生物：前軍儀器變身前列腺癌檢測(cè)利器2016/05/21: 海灣戰(zhàn)爭(zhēng)期間，美于保護(hù)*陸戰(zhàn)隊(duì)避免患上炭疽病的一款設(shè)備，如今被一位倫敦科學(xué)家別出心裁地應(yīng)用于預(yù)防加拿大男性患上侵襲性前列腺癌。這款設(shè)備鑒定結(jié)果度高、速度快。只需一滴血，三四分鐘后，研究人員便可判斷樣本患上的是生長(zhǎng)緩慢的典型性前列腺癌，還是必須得到積極治療的惡性前列腺癌。倫敦勞森健康研究所（LawsonHealthResearchInstitute）的科學(xué)家，HonLeong博士談到這款儀器時(shí)說(shuō)，“這很可能是一款檢測(cè)前列腺癌的理想儀器。”在加拿大的薩斯喀徹溫?。⊿askatchewan），所有成年

上海信帆生物：從互作揭開(kāi)lncRNA的秘密2016/05/19: RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀技術(shù)又稱為RIP（RNAimmunoprecipitation），可以說(shuō)是RNA版的ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀），該技術(shù)能幫助人們分析與RNA結(jié)合蛋白相關(guān)的核酸。在RIP試劑盒（如Sigma的Imprint®RNAImmunoprecipitationkit）的幫助下，研究者們能夠利用針對(duì)RNA結(jié)合蛋白的抗體，從細(xì)胞提取物中捕獲與蛋白相結(jié)合的RNA，再通過(guò)qPCR、芯片或二代測(cè)序技術(shù)對(duì)這些RNA進(jìn)行鑒定。不論是細(xì)胞質(zhì)還是細(xì)胞核，都會(huì)發(fā)生RNA與蛋白的相互作用。據(jù)ActiveM

上海信帆生物：讓基因組測(cè)序繞過(guò)PCR2016/05/18: 在基因組測(cè)序中，PCR擴(kuò)增似乎是繞不過(guò)去的一步。然而，PCR也帶來(lái)一些問(wèn)題，包括不均勻擴(kuò)增，導(dǎo)致某些序列的比例過(guò)高。對(duì)目前的新一代測(cè)序（NGS）平臺(tái)而言，測(cè)序某些堿基組成上存在嚴(yán)重偏向的基因組區(qū)域仍是一大挑戰(zhàn)。在GEN雜志上，PatriciaFitzpatrickDimond博士介紹了PCR-Free的基因組測(cè)序。文庫(kù)制備的變革2009年，Sanger研究院的IwankaKozarewa博士及其同事介紹了一種無(wú)需擴(kuò)增的Illumina文庫(kù)制備方法（NatureMethods2009;6:291–

上海信帆生物：怎樣解決RNAi的脫靶問(wèn)題2016/05/17: 生物通報(bào)道：在使用殺傷性武器的時(shí)候，不傷及無(wú)辜很重要，對(duì)于RNA干涉（RNAi）來(lái)說(shuō)也是如此。RNAi是一種常用的基因失活工具，它的主要缺陷在于會(huì)引起序列特異性的脫靶效應(yīng)。這樣的脫靶效應(yīng)很難預(yù)測(cè)，因?yàn)閟iRNA能夠影響與它部分互補(bǔ)的序列，像miRNA那樣抑制基因的表達(dá)。要減少脫靶效應(yīng)，可以將針對(duì)同一mRNA的不同siRNA混合起來(lái)使用。這些siRNA作用于同一個(gè)目標(biāo)，每種siRNA的濃度得以降低，稀釋了各自的脫靶效應(yīng)。然而，這一策略在實(shí)際操作中面臨著兩個(gè)問(wèn)題。其一，目前“Smartpools”只

上海信帆生物：環(huán)狀RNA測(cè)序服務(wù)2016/05/16: 環(huán)狀RNA（CircularRNA,CircRNA），是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的特殊RNA分子，與線性RNA相比，穩(wěn)定性高，現(xiàn)已證實(shí)CircRNA廣泛存在于生物體內(nèi)，與線性RNA相比，穩(wěn)定性高，對(duì)microRNA具有重要調(diào)控作用。CircRNA于2012年被科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，2013年Nature雜志報(bào)道兩篇關(guān)于CircRNA的研究成果，由此關(guān)于CircRNA的研究開(kāi)始引起科學(xué)家的重視。利用高通量測(cè)序技術(shù)可鑒定CircRNA在生物樣本中的種類、表達(dá)豐度及結(jié)構(gòu)，對(duì)CircRNA的研究起到重要的推動(dòng)作用。

上海信帆生物：讓基因組測(cè)序繞過(guò)PCR擴(kuò)增2016/05/15: 在基因組測(cè)序中，PCR擴(kuò)增似乎是繞不過(guò)去的一步。然而，PCR也帶來(lái)一些問(wèn)題，包括不均勻擴(kuò)增，導(dǎo)致某些序列的比例過(guò)高。對(duì)目前的新一代測(cè)序（NGS）平臺(tái)而言，測(cè)序某些堿基組成上存在嚴(yán)重偏向的基因組區(qū)域仍是一大挑戰(zhàn)。在GEN雜志上，PatriciaFitzpatrickDimond博士介紹了PCR-Free的基因組測(cè)序。文庫(kù)制備的變革2009年，Sanger研究院的IwankaKozarewa博士及其同事介紹了一種無(wú)需擴(kuò)增的Illumina文庫(kù)制備方法（NatureMethods2009;6:291–

上海信帆生物：G蛋白偶聯(lián)受體3D結(jié)構(gòu)2016/05/14: 一個(gè)由德國(guó)、瑞典和美國(guó)組成的研究組在室溫條件下，利用LCLSX射線激光器，成功解碼一種重要G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)的3D結(jié)構(gòu)。同時(shí)驗(yàn)證了LCLSX射線激光器的可行性。相關(guān)文章發(fā)表于2013年12月20日的《science》雜志上。Science：利用新技術(shù)在天然條件下成功獲得g蛋白偶聯(lián)受體3D結(jié)構(gòu)GPCR功能GPCR是一個(gè)蛋白大家族，對(duì)人類健康有關(guān)鍵性作用，約40%的現(xiàn)代藥物都靶標(biāo)這類蛋白。與GPCR有關(guān)的疾病包括，高血壓、哮喘、精神分裂癥和帕金森癥。由于這類蛋白的重要性，GPCR相關(guān)研究獲得

上海信帆生物：溶血空斑形成試驗(yàn)2016/05/13: 溶血空斑形成試驗(yàn)是一種體外檢測(cè)單個(gè)抗體形成細(xì)胞(漿細(xì)胞)的方法，故又稱體外抗體形成細(xì)胞(PlaqueFormingCell,PFC)測(cè)定技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)不僅可以作為免疫基本理論研究的有力工具，廣泛地用于檢測(cè)產(chǎn)生IgM類型(包括其它各類免疫球蛋白及其亞類)的抗體形成細(xì)胞，它還可作為研究篩選抗腫瘤新藥以及研究中藥對(duì)抗體免疫功能影響的免疫學(xué)指標(biāo)。一、原理：溶血空斑形成試驗(yàn)的基本原理是將經(jīng)綿羊紅細(xì)胞免疫小鼠的脾細(xì)胞與一定量的綿羊紅細(xì)胞混合，在補(bǔ)體參與下，使抗體形成細(xì)胞周圍那些受到抗體分子致敏的綿羊紅細(xì)胞溶

上海信帆生物：免疫組化實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題分析2016/05/13: 案例一：DAB染色后切片著色一片黃/背景深背景：奧運(yùn)會(huì)期間我們課題組研究生都在實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)，許多從北京購(gòu)買(mǎi)的試劑買(mǎi)不到，對(duì)我們的許多實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生了很大的影響。我以前一直用中杉金橋的Sp三步法染色試劑盒，效果不錯(cuò)，在奧運(yùn)會(huì)期間我準(zhǔn)備做同批實(shí)驗(yàn)分不同批次酶免疫組化實(shí)驗(yàn)，*批組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果很好，抗體濃度感覺(jué)比較合適(SantaCruz公司1：200)，等做第二批時(shí)發(fā)現(xiàn)封閉血清不夠了，為了保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，我又從福州邁新頂了一個(gè)SP試劑盒，同時(shí)抗體稀釋液也不夠了，我又重新從博士德公司買(mǎi)了一小瓶10ml。從第二

上海信帆生物：有絲分裂（Feulgen染色法）2016/05/11: 實(shí)驗(yàn)原理：細(xì)胞中的DNA受1NHC1，60℃水解作用以后，核酸中的嘌呤堿很快*被除掉，使脫氧核糖中潛在的醛基獲得自由狀態(tài)。水解后，組織要經(jīng)水洗再移至希夫（Schiff）試劑中，希夫試劑即同露出來(lái)的醛基發(fā)生反應(yīng)，呈現(xiàn)紫紅色。這個(gè)反應(yīng)是Feulgen在1942年提出來(lái)的，是DNA的一個(gè)特異性檢查法。水解的時(shí)間很重要，因?yàn)楹怂岬乃庥袃蓚€(gè)過(guò)程，*，漂呤堿很快被除掉，脫氧核糖中潛在的醛基顯露出來(lái)，第二，組蛋白和核酸愈來(lái)愈多地被除掉。在短時(shí)間的水解作用以后，*個(gè)過(guò)程占優(yōu)勢(shì)，這時(shí)候用希夫試劑染色，染色體的染

上海信帆生物：基因表達(dá) RT-PCR之我見(jiàn)2016/05/10: 本文討論的范圍包括RNA酶保護(hù)分析，northernblot，原位雜交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不談具體protocol，是因?yàn)楦鞣N書(shū)籍和kit說(shuō)明書(shū)上都有，主要說(shuō)一些原則，而且大部分是失敗和成功的經(jīng)驗(yàn)，還有小組討論結(jié)果以及各種書(shū)里七零八落看的內(nèi)容，希望對(duì)大家有用。基因表達(dá)的定義：說(shuō)到基因表達(dá)，是指RNA，還是蛋白？是指mRNA還是包括風(fēng)頭正旺的非編碼RNA？mRNA還有不翻譯的RNA呢。應(yīng)該說(shuō)轉(zhuǎn)錄水平指的是RNA水平，而蛋白應(yīng)該叫翻譯水平？我們這里就特指編碼蛋白的mRNA的量

上海信帆生物：IPTG全面介紹：優(yōu)點(diǎn)·使用·配制·特點(diǎn)2016/05/09: 中文名：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)英文名稱：Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside用途：異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用。IPTG常用于需要誘導(dǎo)β-半乳糖苷酶活性的克隆實(shí)驗(yàn)。它常與X-Gal或Bluo-Gal結(jié)合使用，用于重組細(xì)菌菌落的藍(lán)白篩選，這些菌落可以誘導(dǎo)lac操縱子在大腸桿菌中的表達(dá)。IPTG與lacI阻遏蛋白結(jié)合并改變其構(gòu)象而發(fā)揮作用，防止β-半乳糖苷酶編碼基因lacZ的

上海信帆生物：酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法2016/05/07: 一、原理植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶聯(lián)吸附免疫分析（ELISA），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一種類型。在ELISA中，抗原抗體反應(yīng)的檢測(cè)依靠酶標(biāo)記物來(lái)實(shí)現(xiàn)，常用的酶有辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酯酶。酶可直接標(biāo)記激素分子，稱為酶標(biāo)植物激素，也可標(biāo)記于第二抗體（識(shí)別抗激素抗體Fc片段的抗體或金黃色葡萄球菌A蛋白），稱為酶標(biāo)二抗。這兩類標(biāo)記物分別用于固相抗體型和固相抗原型ELISA。A.固相抗體型ELISA：將抗激素的單克隆抗體（Mab）與已

上海信帆生物：廣州生物院發(fā)表干細(xì)胞新成果2016/05/05: 三月二十日，來(lái)自中科院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、武漢菲沙基因信息有限公司(Frasergen)和加拿大西蒙佛雷澤大學(xué)的研究人員，在學(xué)術(shù)期刊《JournalofBioLogicalChemistry》發(fā)表學(xué)術(shù)論文，該研究檢測(cè)了iPSC生成及隨后基因校正過(guò)程中的基因組不穩(wěn)定性，指出重編程和基因打靶可能會(huì)產(chǎn)生大量但卻不同的基因組變化，因此，在iPSC誘導(dǎo)時(shí)及基因打靶之后，必須進(jìn)行嚴(yán)格的基因組監(jiān)控和選擇。本文通訊作者是中科院生物醫(yī)藥與健康研究院研究員潘光錦博士，其2002年碩士畢業(yè)于山東醫(yī)學(xué)科學(xué)院，20

上海信帆生物：全新的蛋白相互作用分析工具2016/05/04: 在細(xì)胞中，蛋白質(zhì)并不是孤單的個(gè)體。大多數(shù)蛋白通過(guò)與分子伴侶或其他蛋白形成復(fù)合物而發(fā)揮其功能。因此，在了解細(xì)胞的生物學(xué)特性時(shí)，蛋白質(zhì)相互作用（PPI）研究就成了重要一環(huán)。在藥物開(kāi)發(fā)的過(guò)程中，這一信息也至關(guān)重要，有助于確認(rèn)藥物靶點(diǎn)。一提起蛋白質(zhì)相互作用研究，你的腦海中可能馬上浮現(xiàn)出：酵母雙雜交、免疫共沉淀等技術(shù)。的確，這些都是經(jīng)典方法，可有效檢測(cè)體內(nèi)體外蛋白質(zhì)相互作用。然而，它們不能提供動(dòng)態(tài)的蛋白相互作用信息，似乎還缺乏一些說(shuō)服力?；诖耍舱衲芰哭D(zhuǎn)移這種方法受到人們的青睞。這種能量轉(zhuǎn)移有著嚴(yán)格的距

上海信帆生物：德國(guó)發(fā)現(xiàn)免疫細(xì)胞＂自殺式攻擊＂助痛風(fēng)自愈2016/05/03: 痛風(fēng)發(fā)作會(huì)在人體關(guān)節(jié)部位引發(fā)炎癥和劇烈疼痛，但過(guò)了一段時(shí)間后，炎癥通常會(huì)自動(dòng)減弱，疼痛感也逐漸消失。這為何會(huì)發(fā)生?德國(guó)研究人員發(fā)現(xiàn)，原因在于一種人體免疫細(xì)胞的“自殺式攻擊”。痛風(fēng)的病因是體內(nèi)嘌呤物質(zhì)新陳代謝紊亂，導(dǎo)致尿酸合成增加、排出減少，造成高尿酸血癥。血液中尿酸濃度過(guò)高時(shí)，尿酸會(huì)以微小的鈉鹽結(jié)晶(俗稱痛風(fēng)石)形式析出，積累在關(guān)節(jié)、軟骨和腎臟中，引發(fā)炎癥。德國(guó)埃爾朗根大學(xué)近日發(fā)表研究公報(bào)稱，其研究人員發(fā)現(xiàn)，人體免疫系統(tǒng)的嗜中性粒細(xì)胞在抗擊痛風(fēng)引發(fā)的炎癥中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。實(shí)驗(yàn)顯示，這種免疫細(xì)胞會(huì)

上海信帆生物：DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基的成分2016/05/02: Dmem(A)細(xì)胞培養(yǎng)基（粉末型）成分序號(hào)化合物名稱含量(mg/L)序號(hào)化合物名稱含量(mg/L)1無(wú)水氯化鈣.2H2O265.0018L-絲氨酸42.002硝酸鐵.9H2O0.1019L-蘇氨酸95.003氯化鉀400.0020L-色氨酸16.004無(wú)水硫酸鎂97.6721L-酪氨酸72.005氯化鈉6400.0022L-纈氨酸94.006無(wú)水磷酸二氫鈉109.0023D-泛酸鈣4.007丁二酸75.0024酒石酸膽堿7.208丁二酸鈉100.0025葉酸4.009L-鹽酸精氨酸84.0026

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