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如何清除被污染的細胞2019/08/05

都知道生物產(chǎn)品都是從細胞得來，所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中zui核心、zui基礎的技術。在培養(yǎng)細胞的過程中，難免會被污染，一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。如果污染細胞價值不大，宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室，復蘇或重新購置細胞，再培養(yǎng)。若污染細胞價值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。一、細菌和真菌的清除1、使用抗生素抗生素對殺滅細菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨用藥效果好。預防用藥比污染后再用藥效果好。預防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～4

免疫組化實驗成功的關鍵2019/08/02

*免疫組化實驗成功的關鍵是抗體，如果抗體不好，整個實驗就基本上不會成功。如何選擇抗體成為免疫組化zui頭疼的問題，因為一旦實驗不成功將浪費我們辛苦收集來的樣本，今天讓上海研域與您分享一下如何選擇抗體這個問題！1、一抗質(zhì)量是酶免疫組化、免疫熒光和Westernblotting等試驗中的zui關鍵因素之一。1）選擇單克隆還是多克隆抗體，前者特異性好，而后者靈敏度高；2）選擇何種種屬來源？一般兔來源的多是多克隆；而小鼠來源的多是單克隆，但也有另外。這也決定了你的二抗類型。3）檢測何種種屬的抗原，即sp

研域技術教您如何區(qū)分ELISA已加樣孔和未加樣孔2019/07/31

ELISA是免疫學中常用檢測方法，加樣時淡的血清能明顯的區(qū)分哪個孔加了哪個孔沒加。但是有一些項目，需要稀釋血清，稀釋后淡的血清近乎無色，加樣時非常容易搞錯，很難區(qū)分哪個孔加過哪個孔沒加過。下面總結(jié)幾個小竅門，來避免加樣出錯：1.用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這樣，加過標本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。2.可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別。3.在標本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分。（注意避免產(chǎn)生氣泡）。4.槍頭一般都是9

移種培養(yǎng)基方法2019/07/29

我們知道培養(yǎng)基它是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，今日上海研域為您整理：移種培養(yǎng)基方法。半固體培養(yǎng)基移種技術：用于保存菌種及間接檢查細菌有無動力。1、材料：半固體培養(yǎng)基、細菌斜面培養(yǎng)物。2、方法：①將接種針經(jīng)火焰滅菌冷卻后，從斜面培養(yǎng)物表面沾取細菌。②用無菌法穿刺接種，將接種針刺入半固體培養(yǎng)基正中央，深度達距管底0.5cm處停止，然后循原路退出。注意在刺入及拔出時要保持接種針不向穿刺線外擺動。③試管口通過火焰滅菌，塞上棉塞。接種針經(jīng)火焰滅菌。培養(yǎng)物放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。3、

elisa試劑用于各種抗原和抗體測定2019/07/26

elisa試劑盒用于各種抗原和抗體測定盒標本的影響溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性?？赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），ELISA試劑盒在洗滌過程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍色，產(chǎn)生假陽性［2］。所以嚴重溶血標本禁用。標本受細菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。標本保存不當在冰箱

丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中的作用2019/07/24

丙酮酸鈉是zui常見的丙酮酸鹽，是一類內(nèi)源性小分子物質(zhì)，丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內(nèi)，并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫(yī)學上、診斷試劑以及醫(yī)療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。此外丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中也是常用到的試劑之一，那么丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中的作用是什么呢？酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中的作用：丙酮酸鈉在人體日常生活中，是惹你進行代謝生命活動所必須的，它是一種能量物質(zhì)，在科學研究進行的細胞培養(yǎng)試驗中，科學研究工作人員還發(fā)現(xiàn)了有作用類似的物質(zhì)，類似參與身體代謝活動的為人體提供行動的

免疫組化染色必須*抑制活性原因2019/07/22

為何免疫組化染色時必須*抑制內(nèi)源性過氧化物酶的活性，才能降低背景的染色？在各種組織中都含有很多的內(nèi)源性過氧化物酶，尤其在紅細胞，中性粒細胞，單核細胞嗜酸性細胞，出血的組織壞死的組織等等。含有這種酶的各細胞和組織如果在染色前不對其進行處理和抑制，它們將會在DAB底物的顯色時，與HRP一樣催化底樣，使之顯色，使之生成與陽性物一樣的黃棕色，造成混亂。為止，在免疫組化染色前，都必須對內(nèi)源性過氧化物酶進行抑制。當然，對它們進行*的消除是不行的，因為抑制太厲害，對抗原也會有相同的抑制作用。氫在抑制內(nèi)源性過氧

免疫組化方法的優(yōu)點和缺點2019/07/19

免疫組化方法的優(yōu)點和缺點一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理，對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。*，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細胞中的某些化學物質(zhì)提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實驗動物，制備特異性抗體，再用這種抗體(*抗體)作為抗原去免疫動物制備第二抗體，并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合，將抗原放大，由于

胎牛血清的功能2019/07/17

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料，經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成。所以胎牛血清是品質(zhì)也是zui高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分zui少。胎牛血清的功能：

研域分析:ELISA試劑盒樣本處理的注意要點2019/07/15

ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。實驗樣本的處理可謂是ELISA實驗的關鍵步驟之一，所以科研朋友一定要多加注意。具體要點那么就由上海研域來為您分析吧！一、均質(zhì)①組織樣本：肉、肝食品類切細，用絞肉機反復絞碎，混合均勻。②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細，用均質(zhì)器均漿；原料表面較臟時,需適當用蒸餾水清洗。③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充分混勻。④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水

上海研域與您分享一些關于抗體的知識2019/07/12

抗體又稱為免疫球蛋白，是一種由B細胞分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中，及其B細胞的細胞膜表面。那么我們要如何去選購抗體呢？首先應選擇一家好的生產(chǎn)公司，根據(jù)文獻提供的信息，選擇所需試劑的型號。1.購置抗體的注意事項(1)種屬：單克隆抗體，多克隆抗體(2)能否用于石蠟切片(3)稀釋度(4)特異性，叉反應(5)用何種組織前處理形式(6)包裝單位，價格2.抗體的大致分類(1)癌基因與抗癌基因標記物；(2)細胞凋亡標記物；(3)各種

細胞轉(zhuǎn)染樣品的運輸保存注意事項2019/07/10

在試驗室做細胞轉(zhuǎn)染時，樣品的運輸保存方法如下：1低溫運輸：干冰運輸：取對數(shù)生長期的細胞（細胞傳代后細胞匯合度達到80%時），用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來，低速離心1000rpm，5min；棄掉上清（胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液），加入適量配制好的凍存液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，血球計數(shù)板計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的*終密度為5×106/ml～1×107/ml；將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5ml；在凍存管上標明細胞的名稱、細胞代次、凍存時間及操作者；放4℃冰箱30min，-20℃30min到1h

研域細菌轉(zhuǎn)化的操作步驟2019/07/09

細菌轉(zhuǎn)化操作步驟（1）事先將恒溫水浴的溫度調(diào)到42℃。（2）從-70℃超低溫冰柜中取出一管（100μl）感受態(tài)菌，立即用手指加溫融化后插入冰上，冰浴5~10min。（3）加入5μl連接好的質(zhì)?；旌弦海―NA含量不超過100ng），輕輕震蕩后放置冰上20min。（4）輕輕搖勻后插入42℃水浴中1~2min進行熱休克，然后迅速放回冰中，靜置3~5min。（5）在超凈工作臺中向上述各管中分別加入500μlLB培養(yǎng)基（不含抗菌素）輕輕混勻，然后固定到搖床的彈簧架上37℃震蕩1h.（6）在超凈工作臺中取上

細胞培養(yǎng)中血清的重要的功能2019/07/05

血清是細胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。1、提供對維持細胞指數(shù)生長的激素，基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2、提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5、起酸堿度緩沖液作用。6、提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。上海研域致

常見蛋白定量的方法2019/07/03

蛋白定量即蛋白質(zhì)定量，蛋白質(zhì)定量根據(jù)其目的看分為全蛋白質(zhì)的"總定量法"和特定蛋白質(zhì)的"個別定量法"。蛋白定量是生物學實驗*的一部分。為驗證細胞裂解是否成功，或為了將多個樣品進行平行實驗比較或標準化保存，需對細胞裂解液進行蛋白定量;為了判定蛋白的產(chǎn)量，需對純化好的蛋白進行定量;為了將純化好的蛋白用生物素或者報告酶進行標記，同樣需首先對蛋白樣品進行定量，以保證標記反應在適當?shù)幕瘜W濃度下進行。在生化實驗中，對樣品中的蛋白質(zhì)進行準確可靠的定量分析，是經(jīng)常進行的一項非常重要的工作。蛋白定量分析也就涉及到生

實驗中稀釋液不夠了怎么辦？2019/07/01

實驗中稀釋液不夠了怎么辦？沒有足量的稀釋液去稀釋所有的樣品，怎么辦？不用擔心，上海研域生物幫你忙！正常情況下，我們所售Elisa試劑盒內(nèi)提供說明書中所的足量的稀釋液。能保證所有的標準品和樣品檢測兩次。但由于老師實驗問題，可能會浪費一部分，對此我司建議，按照正規(guī)的參數(shù)實驗，如果沒有推薦的稀釋度，或者需要大量稀釋，請在實驗前計算出所需的稀釋液總量，然后到技術服務部門獲取額外的稀釋液。上海研域生物承諾：訂購我司Elisa試劑盒，從售前，售中，售后我司均提供技術服務，并提供免費代測服務，感謝您對上海研域

胎牛血清白蛋白如何提取2019/06/28

胎牛血清白蛋白如何提取胎牛血清白蛋白（BSA），是胎牛血清中的一種球蛋白，一般獲取胎牛血清白蛋白，常常運用的方法是加熱法。下面一起來看看是怎樣獲取胎牛血清白蛋白的！一、所需材料胎牛血清取近郊屠宰場，以檸檬酸三鈉為抗凝劑，血液搜集后隨即分別出血漿備用。需要的試劑有血清白蛋白；溴甲酚氯；醋酸纖維素薄膜，別的試劑均為分析純。獲取胎牛血清白蛋白需要準備LG-6型大容量冷凍離心機，DF-C型電泳儀，UV-754型紫外可見分光光度計，PHS-2型酸度計。二、具體方法白蛋白含量測定選用溴甲酚氯法，以胎牛血清白

ELISA試劑盒挑選,上海研域有妙招2019/06/26

今天上海研域與您談談如何根據(jù)檢測方法來選擇ELISA試劑盒，ELISA試劑盒挑選，上海研域有妙招：1.有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘，過敏性腸炎的模型，然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG，IgE等指標。建議做這些檢測指標的朋友，選擇sigma公司V級別的OVA，然后用這個來造模，自己包板摸條件，用OD值來比較抗體含量的變化。2.ELISA檢測方法簡單，靈敏度高，ELISA適合檢測血清或者培養(yǎng)上清的細胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測；病原體抗原的定性與定量

研域分析表面活性劑的結(jié)構2019/06/24

很多人只知道表面活性劑廣泛存在于洗發(fā)水，洗衣粉，沐浴露中，但是它的具體結(jié)構卻不清楚。不用擔心，想知道與您生活息息相關的日用品有哪些表面活性劑結(jié)構，請跟隨上海研域生物一起了解下吧。根據(jù)我司多年來檢測經(jīng)驗。表面活性劑的結(jié)構：傳統(tǒng)觀念上認為，表面活性劑是一類即使在很低濃度時也能顯著降低表（界）面張力的物質(zhì)。隨著對表面活性劑研究的深入，目前一般認為只要在較低濃度下能顯著改變表（界）面性質(zhì)或與此相關、由此派生的性質(zhì)的物質(zhì)，都可以劃歸表面活性劑范疇。無論何種表面活性劑，其分子結(jié)構均由兩部分構成。分子的一端為

Elisa標準曲線做不好的原因分析2019/06/21

上周青島農(nóng)業(yè)大學徐老師在我公司購買了相應的抗體自己包被Elisa試劑盒。由于徐老師是位實驗新手，剛剛接觸Elisa實驗，研究大鼠干擾素相關指標的實驗，做完大鼠γ干擾素Elisa實驗后反應標準曲線的梯度都不好。剛加完顯色劑的時候梯度還算明顯，但是顯色比較淺，隨著時間延長(大概6、7分鐘)以后梯度就不明顯了。終止反應后測得的值梯度就沒有了。為此，我公司技術員對Elisa標準曲線做不好的原因做出分析：1.剛加完顯色劑時梯度明顯：顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。2.酶濃度太高，導致zui后顯色結(jié)果都