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細(xì)胞傳代具體操作細(xì)節(jié)2015/09/24
通常情況下，我們一般將細(xì)胞分為兩類，一類是貼壁細(xì)胞，一類是懸浮細(xì)胞，很多客戶在給細(xì)胞傳代的時(shí)候，往往因?yàn)橛行┘?xì)節(jié)沒有注意好，導(dǎo)致細(xì)胞存活率低、狀態(tài)差、活性不好，今天我們來具體講下這兩類細(xì)胞傳代時(shí)的具體細(xì)節(jié)：一、貼壁細(xì)胞傳代1.提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)。2.吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞。3.加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入
細(xì)胞復(fù)蘇的具體操作步驟2015/09/24
上一節(jié)我們講到細(xì)胞凍存的具體操作步驟，這一節(jié)我們來詳細(xì)了解下細(xì)胞的復(fù)蘇的操作步驟及要點(diǎn)：細(xì)胞復(fù)蘇操作要點(diǎn)：1、將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。2、將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。3、用75%酒精擦
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