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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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怎樣才能做出漂亮的革蘭氏染色?2023/04/24
革蘭氏染色是一項(xiàng)經(jīng)典的細(xì)菌鑒別手段,自19世紀(jì)80年代丹麥的醫(yī)師GRAM創(chuàng)立起,至今已經(jīng)近一個(gè)半世紀(jì),仍舊在細(xì)菌的檢測和鑒定分類上被廣泛應(yīng)用著。在我國,GB4789系列的國標(biāo)中很多致病菌的檢測也都需要進(jìn)行革蘭氏染色,可見其重要性。甚至可以說沒有精準(zhǔn)掌握革蘭氏染色的微生物檢驗(yàn)員,不會(huì)是一個(gè)合格的檢驗(yàn)員。革蘭氏染色的原理:細(xì)菌細(xì)胞通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí),因失水反而使網(wǎng)
酶聯(lián)免疫法基本原理以及注意事項(xiàng)2023/04/24
酶聯(lián)免疫法基本原理及注意事項(xiàng)這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA試劑盒中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因elisa試劑盒的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物(見3.6)。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo)。此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨
遠(yuǎn)慕簡述定性分析與定量分析的區(qū)別2023/04/23
一、定性分析定性分析就是對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行“質(zhì)”的方面的分析。具體地說是運(yùn)用歸納和演繹、分析與綜合以及抽象與概括等方法,對(duì)獲得的各種材料進(jìn)行思維加工,從而能去粗取精、去偽存真、由此及彼、由表及里,達(dá)到認(rèn)識(shí)事物本質(zhì)、揭示內(nèi)在規(guī)律。定性分析主要是解決研究對(duì)象“有沒有”“是不是”的問題,定性研究分為三個(gè)過程:1、分析綜合2、比較3、抽象和概括二、定量分析定量分析:對(duì)社會(huì)現(xiàn)象的數(shù)量特征、數(shù)量關(guān)系與數(shù)量變化的分析。其功能在于揭示和描述社會(huì)現(xiàn)象的相互作用和發(fā)展趨勢(shì)。定性——用文字語言進(jìn)行相關(guān)描述;定量——用數(shù)學(xué)
對(duì)照品如何保存,又應(yīng)該如何使用?2023/04/23
對(duì)照品系指用于鑒別、檢查、含量測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),包括雜質(zhì)對(duì)照品,不包括色譜用的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)。在藥品檢驗(yàn)工作中我們常會(huì)用到一種用來檢查藥品質(zhì)量的特殊參照物——藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(對(duì)照品)。它在藥品檢驗(yàn)中具有十分重要的地位。隨著儀器分析的廣泛使用,必將越來越多地使用藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。下面遠(yuǎn)慕生物就來介紹一下如何對(duì)對(duì)照品進(jìn)行保存和使用:(1)對(duì)照品應(yīng)按說明書規(guī)定的條件妥善保存,一般置干燥陰涼處保存,某些對(duì)照品如維sheng素E等需避光低溫保存。要注意對(duì)照品的使用期限,過期、變質(zhì)的對(duì)照品不宜再使用。開瓶后建議短期內(nèi)用完
鉀單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制方法2023/04/23
鉀是人體所必需的一種微量元素,一般水果和蔬菜中都含有大量的鉀。但是由于高鉀對(duì)心臟是有抑制作用的,當(dāng)身體內(nèi)鉀的含量過高會(huì)對(duì)身體造成巨大的危害,輕者四肢、嘴角麻木,心率減慢低于60次/分鐘;重者會(huì)造成心跳呼吸驟停。因而需要鉀單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢測。鉀單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是指已知準(zhǔn)確濃度的試劑溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液有兩種配制方法:(1)直接配制法準(zhǔn)確稱取一定量的基準(zhǔn)試劑,溶解后定量轉(zhuǎn)入容量瓶中,加試劑水稀釋至刻度,充分搖勻,根據(jù)稱取基準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量和容瓶體積,計(jì)算其準(zhǔn)確濃度。(2)間接配制法間接配制法又稱標(biāo)定
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)核查的內(nèi)容介紹2023/04/23
對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)期間核查的內(nèi)容主要包括以下幾方面:1)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是否在有效期;2)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的儲(chǔ)存條件和環(huán)境要求是否滿足(與說明書要求一致);3)核查其外觀(顏色、性狀等)是否發(fā)生變化;4)是否按照該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書上所規(guī)定的適用范圍、使用說明、測量方法與操作步驟使用;5)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征量值重新驗(yàn)證,證實(shí)其是否保持校準(zhǔn)狀態(tài)的置信度。對(duì)于穩(wěn)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如:苯甲酸、純鋅和純鉛等,通常只需對(duì)其進(jìn)行1)~4)方面的核查,而對(duì)于相對(duì)不穩(wěn)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(如EDTA滴定液)、使用頻率較高的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、臨近失效或已過使用有效期
噬菌體的種類以及檢測存在的方法2023/04/21
噬菌體都有哪些種類蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)無尾部結(jié)構(gòu)的二十面體:這種噬菌體為一個(gè)二十面體,外表由規(guī)律排列的蛋白亞單位——衣殼組成,核酸則被包裹在內(nèi)部。有尾部結(jié)構(gòu)的二十面體:這種噬菌體除了一個(gè)二十面體的頭部外,還有由一個(gè)中空的針狀結(jié)構(gòu)及外鞘組成的尾部,以及尾絲和尾針組成的基部。線狀體:這種噬菌體呈線狀,沒有明顯的頭部結(jié)構(gòu),而是由殼粒組成的盤旋狀結(jié)構(gòu)。迄今已知的噬菌體大多數(shù)是有尾部結(jié)構(gòu)的二十面體,這是因?yàn)檎嗝骟w是多面體里最jian單的結(jié)構(gòu),搭建起來最容易,所以病毒喜歡采用正多面體的結(jié)構(gòu)。而正多面體一共又只有五種
制備微生物檢測培養(yǎng)基細(xì)節(jié)一覽2023/04/21
一、稱取用度1/100的電子天平稱取培養(yǎng)基所需藥品。先根據(jù)配方計(jì)算出配制一定量培養(yǎng)基所需各種成分藥品的量,然后用天平稱取。稱量時(shí)用稱量紙折疊成簸箕狀盛放藥品。二、溶化培養(yǎng)基放入燒杯或搪瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,溶解后,再補(bǔ)齊所需水,并攪拌均勻(如圖3所示)。如果配制的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng),防止焦化,如有焦化現(xiàn)象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。
生物大分子的色譜純化方法介紹2023/04/21
一、生物大分子色譜純化方法的選擇思路通常在做純化前對(duì)自己的目標(biāo)物質(zhì)特性了解越多對(duì)純化將會(huì)越有利,如果不太了解,也可以通過電泳知道目標(biāo)物質(zhì)和雜質(zhì)的情況,找到一種簡單的鑒定方法,此外在純化前必須先建立可靠的活性測定的方法。如果是未知的蛋白,那么通??梢杂袔追N簡單的摸索:1.凝膠過濾色譜。這個(gè)方法很常用,但是效率不高,對(duì)低濃度的樣品沒有富集作用,上樣量小。2.離子交換色譜。此法很常用,但是樣品必須沒有高濃度的鹽。3.疏水色譜。此法較好,它分離效率高,上樣量大,特別適合分離鹽析沉淀的樣品。4.親和色譜。
瓊脂糖凝膠的濃度怎么選?2023/04/21
瓊脂糖凝膠電泳的原理瓊脂糖凝膠電泳是以瓊脂糖為介質(zhì),對(duì)不同大小的DNA或RNA實(shí)現(xiàn)分離的一種電泳方法。瓊脂糖是一種多糖,具有親水性,但是不帶電荷。使得DNA在堿性條件下使其帶負(fù)電荷(pH8.0的緩沖液),在電流作用下,以瓊脂糖凝膠為介質(zhì),由負(fù)極向正極移動(dòng),根據(jù)不同的DNA分子片段的大小和形狀不同,在電場中泳動(dòng)的速率也不相同,同時(shí)在樣品中加入染料能夠和DNA分子間形成絡(luò)合物,經(jīng)過紫外照射,可以看到DNA的位置,從而達(dá)到分離、鑒定的目的。如何選擇瓊脂糖凝膠的濃度目的產(chǎn)物大小80BP的片段,你可以用2
【酶學(xué)基礎(chǔ)】生物實(shí)驗(yàn)中酶的提取和分離純化2023/04/20
許多酶都存在于細(xì)胞內(nèi)。為了提取這些胞內(nèi)酶,首先需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破碎處理。細(xì)胞破碎的方法很多,主要包括機(jī)械破碎法、物理破碎法、化學(xué)破碎法和酶學(xué)破碎法等。機(jī)械破碎法是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器等將細(xì)胞破碎開來。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來?;瘜W(xué)破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變。酶學(xué)破碎法是指選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。酶的提取是指在一定條件下,用適當(dāng)?shù)娜軇┨幚砑?xì)胞破碎后
不同種類的酶能分解不同的物質(zhì)2023/04/20
果膠酶果膠酶主要是由果膠裂解酶、聚半乳糖醛酸酶、果膠酸鹽裂解酶和果膠酯酶組成。果膠物質(zhì)是高度酯化的聚半乳糖醛酸。果膠酶作用于果膠物質(zhì)時(shí),果膠裂解酶、聚半乳糖醛酸酶、果膠酸鹽裂解酶直接作用于果膠聚合物分子鏈內(nèi)部的配糖鍵上,而果膠酯酶則使聚半糖醛酸酯水解,為聚半乳糖醛酸酶和果膠酸鹽裂解酶創(chuàng)造更多的位置。脂肪酶脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸,脂肪酸進(jìn)一步進(jìn)行B一氧化,每次脫下一個(gè)C2物,生成乙酰COA(N—環(huán)己基辛基胺),進(jìn)入TCA(三羧酸)環(huán)徹di氧化或進(jìn)入乙醛酸環(huán)合成糖類。脂肪酶(EC3.2.2
影響酶高效性的主要因素有這些!2023/04/20
一、影響酶高效催化的因素PH值的影響。每種酶僅在較窄的pH范圍內(nèi)才表現(xiàn)出較高的活力,該pH值即是酶作用的最適pH值。一般來說,酶在最適pH值表現(xiàn)最wen定,因此酶作用的pH值也就是其穩(wěn)定的pH值。酶反應(yīng)pH值過高或過低,酶都會(huì)受到不可逆的破壞,穩(wěn)定性、活力下降,甚至失活。不同酶的最適pH范圍不同,偏酸性、中性、偏堿性的都有。比如根據(jù)作用最適pH值,常把蛋白酶分為酸性蛋白酶、中性dan白酶和堿性蛋白酶。酶作用pH值也是一定條件下,測得的參數(shù)。溫度或底物不同,酶作用的最適pH不同,溫度越高,酶作用的
溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響說明2023/04/20
化學(xué)反應(yīng)的速度隨溫度增高而加快,但酶是蛋白質(zhì),可隨溫度的升高而變性。在溫度較低時(shí),前一影響較大,反應(yīng)速度隨溫度升高而加快。但溫度超過一定范圍后,酶受熱變性的因素占優(yōu)勢(shì),反應(yīng)速度反而隨溫度上升而減慢。常將酶促反應(yīng)速度最大的某一溫度范圍,稱為酶的最適溫度。人體內(nèi)酶的最適溫度接近體溫,一般為37℃~40℃之間,若將酶加熱到60℃即開始變性,超過80℃,酶的變性不可逆。溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響在臨床實(shí)踐中具有指導(dǎo)意義。低溫條件下,酶的活性下降,但低溫一般不破壞酶,溫度回升后,酶又恢復(fù)活性。所以在管理技術(shù)
別在把瓊脂和瓊脂糖分錯(cuò)啦!2023/04/19
瓊脂和瓊脂糖的區(qū)別1、本質(zhì)不一樣瓊脂:是植物膠的一種,常用海產(chǎn)的麒麟菜、石花菜、江蘺等制成,為無色、無固定形狀的固體,溶于熱水。瓊脂糖:瓊脂糖:是線性的多聚物,基本結(jié)構(gòu)是1,3連結(jié)的β-D-半乳糖和1,4連結(jié)的3,6-內(nèi)醚-L-半乳糖交替連接起來的長鏈。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質(zhì)混合物。2、用途不一樣瓊脂:在食品工業(yè)中應(yīng)用廣泛,亦常用作細(xì)菌培養(yǎng)基。也用于化學(xué)工業(yè)、醫(yī)學(xué)科研、可作培養(yǎng)基、藥膏。瓊脂糖:廣泛使用于食用、醫(yī)藥、化工、紡織、國防等領(lǐng)域,據(jù)不wan全統(tǒng)計(jì),瓊脂、瓊脂糖的用途已有1
瓊脂糖的凝膠性能與電泳原理2023/04/19
瓊脂糖的凝膠性能介紹瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時(shí)形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示。強(qiáng)度越高,凝膠性能越好。質(zhì)量較好的瓊脂糖強(qiáng)度通常在1200克/cm2以上(1%膠濃度)。瓊脂糖的凝膠性是由存在的氫鍵所致,凡是能破壞氫鍵的因素都能導(dǎo)致凝膠性的破壞。瓊脂糖具有親水性,并幾乎wan全不存在帶電基團(tuán),對(duì)敏感的生物大分子極少引起變性和吸附,是理想的惰性載體。在瓊脂糖制備過程中需要把瓊脂果膠盡量去除,否則瓊脂糖有
電鏡固定液選擇及配制了解一下2023/04/19
自1931世界shang第1臺(tái)電子顯微鏡誕生以來,微觀世界的大門開放的更加廣闊。目前電鏡被廣泛運(yùn)用于各器官系統(tǒng)疾病的病理診斷中,除了運(yùn)用在腫瘤的診斷與鑒別診斷中,用得最多的是腎臟活檢和某些皮膚疾病的診斷,其中透射電子顯微鏡是最早,最guang泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一種電鏡。隨著電鏡在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用,人類通過觀察細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)的各種細(xì)胞器和細(xì)胞核的細(xì)微結(jié)構(gòu)及其病理變化,由此產(chǎn)生了亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)病理學(xué)(substructuralpathology),又稱超微結(jié)構(gòu)病理學(xué)(ultrastructuralpath
固定液的選擇原則你知道嗎2023/04/19
什么是固定液?一般是一種高沸點(diǎn)的有機(jī)物的液膜,通過對(duì)不同組份的不同分子間的作用,使組份在色譜柱中得到分離。根據(jù)被分離組分和固定液分子間的相互作用關(guān)系,固定液的選擇一般根據(jù)所謂的“相似性原則”,即固定液的性質(zhì)與被分離組分之間的某些相似性,如官能團(tuán)、化學(xué)鍵、極性、某些化學(xué)性質(zhì)等,性質(zhì)相似時(shí),兩種分子間的作用力就強(qiáng),被分離組分在固定液中的溶解度就大,分配系數(shù)大,因而保留時(shí)間就長;反之溶解度小,分配系數(shù)小,因而能很快流出色譜柱。下面遠(yuǎn)慕就不同情況進(jìn)行討論:a、分離極性化合物,采用極性固定液。這時(shí)樣品各組
遠(yuǎn)慕帶您了解定性檢測和定量檢測的區(qū)別2023/04/18
一、概念不同1、定性測量,也稱定性分析,通常是從質(zhì)的方面進(jìn)行分析,它要回答的不是數(shù)量上的多少問題,而是性質(zhì)上的“是什么”、“屬于什么”等問題,是為了確定研究對(duì)象是否具有某種性質(zhì)或確定引起某一現(xiàn)象變化原因、變化過程的研究。2、定量測量,也稱定量分析,通常是從量的方面分析,是研究者事先假設(shè)并確定具有因果關(guān)系的各種變量,然后使用某些經(jīng)過檢測的工具對(duì)這些變量進(jìn)行測量和分析,從而驗(yàn)證研究者的預(yù)定假設(shè)。二、目的不同1、定性測量的目的在于把握事物“質(zhì)”的規(guī)定性,如用于定性鑒別、純度檢測和雜質(zhì)xian量測定。2
蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析方法及概括2023/04/18
蛋白質(zhì)組學(xué)概述“蛋白質(zhì)組”一詞的英文是Proteome,它是proteins和genome兩個(gè)詞的組合,意思是proteinsexpressedbyagenome,即為基因組表達(dá)的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組的概念是1994年由Wilkins首先提出,并在1995年7月的“Electrophoresis”上發(fā)表,指“一個(gè)細(xì)胞或一種組織基因組所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)”,蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)是從整體水平上研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成及其活動(dòng)規(guī)律。與基因固定不變的基因組不同,蛋白質(zhì)組作為相應(yīng)基因組所表達(dá)的產(chǎn)物隨
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