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遠慕教您如何分辨ELISA試劑盒的真假2023/05/10

一、可利用交叉實驗即可辨別ELISA試劑盒是否造假，方法如下：1.取出購買的試劑盒A的包被板兩條；2.一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線；3.另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線；4.后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復合物和底物；5.實驗完畢后，檢測兩條標準曲線，如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B，即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。6.如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該

簡述elisa試劑盒原理與試劑盒成分2023/05/10

elisa試劑盒試驗原理：試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。elisa試劑盒組成結構：1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸

實驗室常用小型儀器的維護、保養(yǎng)經驗2023/05/10

實驗室常用小型設備包括：天平、水分測定儀、超純水機、PH計、電導率儀等，相比大型分析儀器，小型設備對環(huán)境條件要求相對少，但對于它們的維護保養(yǎng)卻同樣值得重視，以電子天平為例，無論是使用、維護、保養(yǎng)都應該謹慎對待，否則，稱量稍有誤差，就會導致后續(xù)的一系列分析數據失去參考價值。本文今天主要針對電子天平、PH計(酸度計)、紫外可見分光光度計、電導率儀等小型儀器的維護、使用、及保養(yǎng)原則予以整理。一、電子天平的使用、維護、保養(yǎng)1.使用條件：稱量臺：穩(wěn)固的實驗臺或石臺，不得用鐵板制品、塑料和玻璃制品的材料。工

優(yōu)級純、分析純、色譜純、色譜試劑有何區(qū)別？2023/05/10

試劑規(guī)格基本上按純度(雜質含量的多少)劃分，共有高純試劑、光譜純試劑、基準試劑、分光純試劑、優(yōu)級純試劑、分析試劑和化學純試劑等7種。國家和主管部門頒布質量指標的主要優(yōu)級純、分級純和化學純3種。選用不同純度試劑的標準主要是不同的反應需求，以及該試劑所含雜質對分析要求有無影響。按照國家標準，根據試劑中所含雜質的多少，劃分為三個等級國對比如下：實驗試劑(LR：Laboratoryreagent)，又稱四級試劑。除了上述四個級別外，目前市場上尚有：化學試劑;基準試劑：專門作為基準物用，可直接配制標準溶液

簡述亞甲基藍的基本信息以及制備方法2023/05/09

亞甲基藍的基本信息亞甲基藍，化學式為C16H18N3ClS，是一種吩噻嗪鹽，為深綠色青銅光澤結晶或粉末，可溶于水和乙醇，不溶于醚類。亞甲基藍在空氣中較穩(wěn)定，其水溶液呈堿性，有毒。亞甲基藍廣泛應用于化學指示劑、染料、生物染色劑和藥物等方面?；瘜W式：C16H18ClN3S分子量：319.852CAS號：61-73-4EINECS號：200-525-2制備方法1、由N,N-二甲ji苯胺進行亞硝化，經還原生成對氨基二甲ji苯胺，再用重鉻酸na、硫代硫酸鈉進行氧化、硫化及縮合，然后用氯化鋅成鹽、鹽析、過濾

實驗室96孔板接種細胞詳細步驟2023/05/09

為了做實驗，細胞鋪勻是常見的一種。然而，有許多人不是很成功，分布也不均勻:要么中間密集，周圍稀疏，要么周圍密集，中間禿頂。以下是利用96孔板把細胞鋪勻，希望對大家有用!方法/步驟1、通常，在96孔板的每個孔中加入100微升細胞懸浮液。從底部附近的井的左側添加細胞懸浮液。加入一半平板后，混合細胞懸液，不要再加入，繼續(xù)加入剩余的一半平板。添加完所有板后，蓋上板，用左手輕輕握住板的左側，用右手輕輕輕敲板的右邊緣，注意抓力(我通常輕敲三次)。如果它太強或太多次，細胞就會被濃縮和堆積。順時針旋轉盤子(逆時

肥大細胞（甲苯胺藍）染色液的操作步驟2023/05/09

肥大細胞(Mastcell)是疏松結締組織內常見的細胞，常成群的沿著小血管和淋巴管分布，也常見于支氣管和胰腺的小葉間導管周圍，一般細胞較大，直徑約為20-30μm，呈圓形或橢圓形，胞核較小、胞質內充滿粗大且具有異染性嗜酸性顆粒。甲苯胺藍(ToluidineBlueO)中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。甲苯胺藍還含有兩個助色團，能促使染料產生電離成鹽類,幫助發(fā)色團對組織產生染色力,使切片上的組織細胞著色，可染細胞核使之呈藍色。肥大細胞顆粒呈紫紅色，其他呈藍色。操

瑞氏染色法：染色方法和注意事項2023/05/09

瑞氏染色法：染色方法和注意事項（1）血涂片干透后固定，否則細胞在染色過程中容易脫落。（2）沖洗時應以流水沖洗，不能先倒掉染液，以防染料沉著在血涂片上。沖洗時間不能過久，以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然后立即用流水沖洗。（3）染色過淡可以復染，復染時應先加緩沖液，然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡，也可用甲醇脫色。（4）瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR級以上）和甘油組成，Ⅱ液為磷酸鹽緩沖液（pH6.4～pH6.8）。瑞氏(Wright)染色液的配制方法瑞氏(Wright)染

實驗室PCR產物的電泳以及純化分析2023/05/08

實驗室PCR產物的電泳及純化一、目的(1)了解PCR產物電泳與純化的原理。(2)熟悉和掌握PCR產物電泳與純化的操作。二、原理在PCR過程中，部分引物和dNTPs在Taq酶等因子的作用下以DNA模板為指導合成新的DNA分子，當然還有一部分的引物和dNTPs沒有完成所期望的任務,以小分子的形式存在于PCR產物混合液中,為了后續(xù)分子克隆的工作能夠順利進行,PCR產物就需要進行純化，以去除PCR產物混合液中殘留的Taq酶、BSA、Mgt+、引物dNTPs.buffer中的小分子以及非特異性擴增產物。通

怎樣提高擴增效率和PCR的特異性?2023/05/08

引物引物設計：引物長度適當，18-24mers，并保證序列獨te性，以降低序列在非目的片段中存在的可能性，但長度大于24核苷的引物并不意味著有更高的特異性，較長的序列可能會與錯誤配對序列雜交，反而降低特異性，而且長序列比短序列雜交慢，影響產量；引物濃度：引物的濃度會影響特異性。最佳的引物濃度一般在0.1到0.5μM。較高的引物濃度會導致非特異性產物擴增。Mg2+較高的Mg2+濃度可以增加產量，但也會降低特異性。為了確定最佳濃度，從1mM到3mM，以0.5mM遞增，進行最適Mg2+濃度測定。退火溫

四種滴定分析的滴定方式說明2023/05/08

(1)直接滴定法：凡能滿足滴定分析要求的反應都可用標準滴定溶液直接滴定被測物質。例如用NaOH標準滴定溶液可直接滴定HCl、等試樣(2)返滴定法：返滴定法（又稱回滴法）是在待測試液中準確加入適當過量的標準溶液，待反應wan全后，再用另一種標準溶液返滴剩余的第一種標準溶液，從而測定待測組分的含量。這種滴定方式主要用于滴定反應速度較慢或反應物是固體，加入符合計量關系的標準滴定溶液后，反應常常不能立即完成的情況。例如，鋁離子與EDTA（一種配位劑）溶液反應速度慢，不能直接滴定，可采用返滴定法(3)置換

有機化學中幾種試劑介紹2023/05/08

幾種溶解性能良好的化工溶劑,被稱為萬/能溶劑.二甲基亞砜廣泛用作溶劑和反應試劑,特別是丙希腈聚合反應中作加工溶劑和抽絲溶劑,作聚氨酯合成及抽絲溶劑,作聚酰胺,聚酰亞胺和聚砜樹脂的合成溶劑,以及芳烴,丁二烯抽提溶劑和合成氯氟/苯胺的溶劑等.四氫/呋喃具有低毒、低沸點、流動性好等特點,是一種重要的有機合成原料和優(yōu)良的溶劑,具有廣泛的用途,四氫/呋喃對許多有機物有良好的溶解性,它能溶解除聚乙/烯,聚丙烯及氟樹脂以外的所有有機化合物,特別是對聚氯乙/烯,聚偏氯乙/烯,和叮苯胺有良好的溶解作用,有萬/能溶

薄層層析法的簡介和制備過程2023/05/06

一、簡介薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為硅膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣，除吸附法外，也可進行分配、離子交換、分子排阻等機理的層析，即將鋪制薄層的材料相應換為涂以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等，其操作與吸附法基本相同。二、過程制板鋪制薄層板時，要求基底板潔凈平整，可用干法或濕法鋪制?，F常用濕法制板，即將吸附劑和粘合劑（如燒石膏）按一定比例混合，加入適量水調勻，用涂布器將此勻漿緩慢地移過基底板，放置晾干，再經適當烘烤活化后即可使用。如不加粘合劑和水，直接將吸附劑均勻地鋪成

藥物鑒別的目的與鑒別方法2023/05/06

藥物鑒別的目的和特點1、藥物鑒別的目的鑒別定義:就是依據藥物的組成、結構與性質通過化學反應、儀器分析或測定物理常數,來判斷藥物的真?zhèn)巍ｈb別試驗僅使用于鑒別藥品的真?zhèn)螌τ谠纤庍€應結合外觀和物理常數進行確認2、特點A、為已知物的確證試驗——供試品為已知物,鑒別的目的是確證供試品的真?zhèn)蜝、鑒別試驗為個別分析,非系統(tǒng)分析——一般只作一、二或三、四項試驗C、通常采用不同方法鑒別,綜合分析D、鑒別制劑,要注意輔料干擾,鑒別復方制劑,注意各成分干擾藥物鑒別的常用方法藥物鑒別采用的方法應是專屬性強、重現性好、

藥物中雜質的xian量檢查方法介紹2023/05/06

1.對照法系指取一定量待檢雜質的對照液與一定量供試液,在相同條件下處理后,比較反應結果,從而判斷供試品中所含雜質是否超過xian量。使用本法檢查藥物的雜質,須遵循平行原則。該法通常不需要準確測定雜質的含量,而是判斷藥物所含雜質是否符合xian量規(guī)定,中國藥典主要采用本法檢查藥物的雜質。2.靈敏度法系指在供試品溶液中加入試劑,在一定反應條件下,觀察有無陽性反應出現,以不出現陽性反應為合格,即以檢測條件下的靈敏度來控制雜質xian量。本法的特點是不需要對照物質。如純化水中的氯化物檢查,是在50ml純

雜質分析的基本思路介紹2023/05/06

雜質分析的基本思路和步驟如下:1)產生來源分析起始物料和原料中可能存在的雜質分析,包括異構體雜質。因為起始物料和原料中的雜質與原料結構類似,來源一致、可能共同參與反應,最后殘留在目標產物中。這部分的分析,可以從起始物料和原料的生產過程(來源于供應商的信息)、起始物料的原料的理化性質、文獻報道方面進行了解與分析。反應副產物分析。包括主原料潛在的副反應、原料中的雜質參與反應的副產物等。這部分的分析,可以從化學反應原理和相關文獻報道進行了解與分析。降解產物分析。包括原料、中間體和產物、溶劑(回收溶劑)

細胞鋪板不均勻？遠慕教你解決方法！2023/05/05

做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：下面為大家分享幾點經驗。1、盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。2、96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需wan全打到最大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一

血清的具體實驗作用你了解多少？2023/05/05

血清，在實驗中經常用到，而且在實驗中用到的還是比較廣的，而且血清的實驗作用還是可圈可點的，血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的，那么除此之外血清還有其它作用嗎？今天就跟遠慕生物一起來看看血清的具體實驗作用：①有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合，起到解毒作用。②是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。③提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結合或調變它們所結合的物質活力。④起酸

遠慕教你鑒別和處理細胞污染的方法2023/05/05

一、細菌污染狀態(tài)：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。預防和補救：1.仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間和壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要檢查培養(yǎng)液是否存在渾濁現象！2.可在培養(yǎng)液或血清中加支原體預防劑。3.若細胞一旦污染，建議加支原體清除劑，能清楚常見的革蘭氏陰性和陽性菌。二、霉菌及真菌污染狀態(tài)：肉眼觀察培養(yǎng)基發(fā)現培養(yǎng)基顏色基本無變化，不渾

細胞培養(yǎng)三大步驟，科研人必看！2023/05/05

01、復蘇細胞復蘇的原則：快速融化必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。實驗前準備將水浴鍋提前預熱至37℃。細胞實驗室進行常規(guī)消毒，用75％酒精擦拭紫外線照射40min的超凈工作臺臺面，保證無菌。在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等即將使用的耗材及試劑。取出凍存管根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的對應編號。從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。迅速解凍迅速將