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配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制作過程2023/05/24

細菌培養(yǎng)的基礎是配制培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方然后再加熱溶解，補足水分，其制作過程包括以下4個環(huán)節(jié)：①清潔玻璃器皿一般用肥皂液煮沸30min,或用重鉻酸鉀和濃硫酸配制的溶液浸泡數10min，然后用清水沖洗，晾干后保存?zhèn)溆?。②配制液體培養(yǎng)基a．根據需要配制培養(yǎng)基數量，先在燒杯中注入少量蒸餾水；b．按培養(yǎng)基配方稱量各種成分的原料，依次使之溶解；c．補足需水量；d．如用牛肉膏、蛋白胨配制時，需加熱熔化后溶解；e．加熱后，補足水分即可。③配制固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基里加入一定量的瓊脂，加熱熔化即可。④

淺析細菌在培養(yǎng)基上的生長特性2023/05/24

1．固體培養(yǎng)基標本或液體培養(yǎng)物劃線接種到固體培養(yǎng)基表面后，單個細菌經分裂繁殖可形成一個肉眼可見的細菌集團，稱為菌落（colony）。(1)菌落的形態(tài)特征：大小、形狀（露滴狀、圓形、菜花樣、不規(guī)則等）、突起或扁平、凹陷、邊緣（光滑、波形、鋸齒狀、卷發(fā)狀等）、顏色（紅色、灰白色、黑色、綠色、無色、黃色等）、表面（光滑、粗糙等）、透明度（不透明、半透明、透明等）和粘度等。據細菌菌落表面特征不同，可將菌落分為3型：①光滑型菌落（S型菌落）：菌落表面光滑、濕潤、邊緣整齊，新分離的細菌大多呈光滑型菌落。②粗

微生物培養(yǎng)基質的種類與成分介紹2023/05/24

微生物培養(yǎng)基質按照物理狀態(tài)可分為：固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基。按照微生物的種類可分為：細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基。按照化學分類可分為：天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。一、微生物培養(yǎng)基質有哪些種類1、按照物理狀態(tài)區(qū)分：分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基。2、按照微生物種類區(qū)分：分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基。3、按照化學分類區(qū)分：分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基。4、按照營養(yǎng)成分是否wan全區(qū)分：

植物組織培養(yǎng)基配置的關鍵環(huán)節(jié)說明2023/05/24

以MS培養(yǎng)基為例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素、氨基酸、植物生長調節(jié)物質和有機附加物等種類。1、大量元素和微量元素母液的配制按規(guī)定用量,稱取所需的各種藥品,在配制時為減少工作量,可以把幾種藥品（如大量元素或微量元素）配在同一母液中。但由于各種藥品的混合,可能發(fā)生反應,生成沉淀物,以致母液失效。為避免類似現象發(fā)生,在大量元素、微量元素和維生素及氨基酸的母液配制時,可采用如下2種做法加以解決：①將要配在同一母液的大量元素、微量元素和維生素及氨基酸等化合物,按先后順序溶解藥品,待前

核酸提取中磁珠的分類介紹2023/05/23

分子診斷是以核酸作為檢測對象，主要應用于臨床各科的診斷中，如腫瘤、感染、遺傳等各方面，而核酸提取是分子診斷實驗的“第一步”。近年來，磁珠已成為核酸提取過程中最chang用的工具之一。磁珠的概念和分類根據不同的表面處理與標記，可將磁珠分成各種不同的應用類型：TiO2磷酸化多肽富集磁珠磁珠表面覆蓋有一層TiO2材料，可以選擇性的與磷酸化的氨基酸殘基：絲氨酸(Ser)、酪氨酸(Tyr)、蘇氨酸(Thr)結合，而與酸性的氨基酸殘基的非特異性結合最小。與傳統(tǒng)的IMAC技術相比，其靈敏度提高了1000倍，富

【核酸提取】RNA提取與DNA的提取簡介2023/05/23

核酸分為兩大類：一類為核糖核酸（RNA），另一類為脫氧核糖核酸（DNA）。核酸的分子量極大，從數萬到億萬。核酸是兩性化合物，在一定的等電點溶于水，其水溶液呈酸性，不溶于乙醇等有機溶劑。細胞內的核酸常和蛋白質結合成核蛋白。核糖核蛋白和脫氧核糖核蛋白在不同濃度的電解質溶液中的溶解度有顯著區(qū)別，在一定濃度范圍的氯化鈉溶液中，脫氧核糖核蛋白的溶解度隨著氯化鈉濃度的增加而逐漸下降，當氯化鈉濃度為0.14mol/L時，其溶解度僅為水中溶解度的1/100，但當氯化鈉濃度在增加時，脫氧核糖核蛋白的溶解度重新增加

【遠慕實驗】RNA的提取與核酸的顏色反應2023/05/23

一.目的學習用濃鹽法從酵母中提取RNA掌握用等電點法沉淀RNA觀察核酸的顏色反應，了解核酸定性與定量測定的原理熟練掌握普通離心機的使用方法二.原理酵母繁殖快，生長周期短；其細胞質中的核酸大部分是RNA，而DNA很少；RNA提取液與菌體分離比較容易。因此，酵母是提取RNA的好材料。將RNA從細胞中釋放出來在工業(yè)上主要有三種方法—稀堿法、濃鹽法和自溶法。本實驗采用濃鹽法，即利用高濃度的鹽（10%NaCl）在90～100°C條件下改變了細胞膜通透性，并將核蛋白體解離成RNA和蛋白質而使RNA釋放到鹽溶

自制EM菌液也可以很簡單！2023/05/23

EM菌種培育菌液的方法挺簡單的，就是加水加紅糖密封發(fā)酵就可以了下面遠慕生物為您詳細做下培育方法介紹EM活性液制作方法：[原料準備]①至少可以容納10公斤水的容器（最好是可以密封的朔料桶）.②紅糖0.5公斤.③10公斤無菌干凈的水(深井水、涼開水、或者放置24小時的自來水).④益富源發(fā)酵床專用菌種1瓶步驟1、先把塑料桶裝入7～8公斤無菌干凈的水。步驟2、把剩余的2～3公斤水燒開把0.5公斤紅糖wan全融化，溶化后倒進步驟1中的塑料桶內。步驟3、將益富源發(fā)酵床專用菌種倒入塑料桶中，攪拌菌液，密封起來

哪些情況下需要使用穩(wěn)定細胞系？2023/05/22

穩(wěn)定細胞系是指將外源基因整合到宿主細胞基因組中，使外源基因能夠在宿主細胞中長期穩(wěn)定表達，這樣的細胞系稱為穩(wěn)定細胞系。其原理是將外源基因克隆到具有某種抗性的載體上，通過轉染宿主細胞，外源基因整合到宿主染色體上，用載體中所含抗性基因進行篩選即可得到成功整合目的基因的細胞。在試驗過程中，常用的真核表達載體抗性篩選標志物有嘌呤霉素(puromycin)、新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)等。通過篩選可得到符合實驗要求的穩(wěn)定高表達目的蛋白細胞株或者穩(wěn)定沉默目的基因的細胞株。其建立的

培養(yǎng)基的滅菌處理方法介紹2023/05/22

要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言，更是要進行嚴格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞，如使糖類物質形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分鐘進行滅菌，某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合；長時間高溫還會引

【微生物檢測】培養(yǎng)基適用性操作規(guī)程2023/05/22

一、目的：建立培養(yǎng)基適用性檢查操作規(guī)程，保證培養(yǎng)基的質量，確保檢驗結果的準確性。二、適用范圍：本規(guī)程規(guī)定了培養(yǎng)基適用性檢查方法和操作要求，適用于微生物實驗室計數用培養(yǎng)基、控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查。三、內容：1、簡述1.1培養(yǎng)基適用性檢查試驗可用于確定實驗室所使用培養(yǎng)基(包括購置的不同批號的成品培養(yǎng)基、不同批號的脫水培養(yǎng)基、按處方自行配制培養(yǎng)基所用不同批次的原材料等)、制備程序（包括水質控制、配制方法、滅菌程序等）、保存條件（溫度、濕度、時間及盛裝培養(yǎng)基的容器條件等）等是否滿足微生物限度檢查

遠慕教您鑒定發(fā)酵罐中的菌種種類2023/05/22

也許好多人對菌種的鑒定方法不了解，尤其是發(fā)酵罐的。下面遠慕生物就來給大家介紹如何鑒定發(fā)酵罐中的菌種種類：1.糖發(fā)酵試驗糖發(fā)酵實驗是最常chang用的生化反應，在腸道細菌鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖的能力上有很大差異，有些細菌能分解糖并產酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細菌只產酸不產氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產酸并產氣；傷寒桿菌能分解葡萄糖產酸不產氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產酸產氣，不能分解乳糖。酸的

直接免疫熒光法和間接免疫熒光法之間的區(qū)別2023/05/19

免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)與相應抗體（或抗原）以化學的方法結合，將熒光標記抗體（或抗原）與標本中相應的抗原結合形成熒光標記的抗體-抗原復合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在，根據已知的抗體（或抗原）即可推知另一個未知抗原（或抗體）的存在。1.直接免疫熒光法直接免疫熒光法是利用熒光色素標記的特異性抗體直接與相應的抗原結合，以鑒定未知抗原。本法具有操作簡單、時程短、特異性高的優(yōu)點，但也存在

農桿菌感受態(tài)細胞的制備和轉化實驗2023/05/19

實驗概要本實驗介紹了根癌農桿菌GV3101感受態(tài)細胞的制備及凍融法轉化。主要試劑利福平，LB培養(yǎng)基，NaCl，CaCl2，YEP培養(yǎng)基，卡那霉素主要設備搖床，高速離心機，低溫冰箱，水浴鍋實驗材料根癌農桿菌GV3101單菌落實驗步驟1.根癌農桿菌GV3101感受態(tài)細胞的制備1)挑取單菌落GV3101，接種于5mL附加有50mg/L的利福平的液體LB培養(yǎng)基中，28℃，200rpm，過夜；2)取2mL培養(yǎng)物至50mL液體LB培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)至OD600為0.5左右；3)將培養(yǎng)物冰浴30min，4℃，

【分子構建】載體構建的經驗分享~2023/05/19

做過分子實驗的人都知道，要想做的有效率有質量是很困難的，1個月做100個克隆那都是小case，沒點看家的本事怎么行。如果再遇到比較稀有的基因，周旋個把月，那也是家常便飯。下面遠慕生物就和大家分享一些載體構建的經驗，從此邁向科研達人！1.準備工作俗話說：用欲善其事，必先利其器。建議大家在做構建之前先找好工具，效果事半功倍哦。推薦兩個工具，一個是oligo軟件，常用于引物設計和酶切位點分析；另一個是DNAstar軟件，工具ji強大，一款全面的生物醫(yī)學軟件，用作DNA和蛋白質序列分析、重疊群拼接和基因

單細胞測序的主要步驟和特點分析2023/05/19

單細胞測序的興起，不僅是新概念炒作，而是在相關領域，長時間由于技術的瓶頸很多生物學問題沒有解決，現在突然有一個技術可以高性價比地解決這些問題，導致這個技術被大量應用。以單細胞轉錄組測序技術為例開展探討，單細胞轉錄組主要包括以下四個步驟，其中關鍵的一點就是如何進行單細胞的捕獲/分選，這是決定單細胞檢測成本和通量的關鍵步驟。主要步驟：在細胞分選的方法里，主要包括特異性分選和非特意性分選兩類方法，兩類方法的關系有點類似定量（只針對特定目標基因進行檢測）和轉錄組測序，用特定標志對特定目標細胞進行挑選，然

單克隆抗體制備基本原理與過程介紹2023/05/18

單克隆抗體制備的原理：B淋巴細胞在抗原的刺激下,能夠分化、增殖形成具有針對這種抗原分泌特異性抗體的能力、B細胞的這種能力和量是有限的,不可能持續(xù)分化增殖下去，因此產生免疫球蛋白的能力也是極其微小的、將這種B細胞與非分泌型的骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，再進一步克隆化，這種克隆化的雜交瘤細胞是既具有瘤的無限生長的能力，又具有產生特異性抗體的B淋巴細胞的能力，將這種克隆化的雜交瘤細胞進行培養(yǎng)或注入小鼠體內即可獲得大量的高效價、單一的特異性抗體.這種技術即稱為單克隆抗體技術。單克隆抗體制備的過程：免疫

熒光原位雜交技術實驗心得2023/05/18

熒光原位雜交技術（fluorescenceinsituHybridization,FISH）是一種非放射性原位雜交方法，用特殊的熒光素標記核酸探針，在細胞或組織切片標本上進行雜交，以檢測細胞內DNA或RNA特定序列存在與否。FISH實驗操作與用非熒光標記探針的原位雜交基本相似。在組織準備方面，新鮮組織、冷凍組織樣本、細胞涂片、培養(yǎng)細胞爬片等材料均可以用于進行FISH實驗檢測。以下談談用細胞爬片進行RNAFISH檢測的一些總結。一、實驗流程1.細胞在蓋玻片上進行培養(yǎng)，細胞長好后用CSK緩沖液簡單洗

一些細胞爬片小知識了解一下2023/05/18

什么叫細胞爬片?細胞爬片就是讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內，細胞在玻片上生長，主要用于組織學，免疫組織化學/，bing凍切片，細胞涂片，原位雜交等.細胞爬片經驗總結：1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用爬片；2.應用蓋玻片，可根據自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可

細胞爬片免疫熒光實驗操作步驟2023/05/18

細胞爬片免疫熒光步驟：1.遠慕生物細胞爬片；首先是玻片的處理，普通的蓋玻片用砂輪劃成自己要的大小的小方塊，先用洗衣粉洗干凈，用水沖靜烤干，然后泡酸過夜，撈酸后流水洗凈，烤干，置于器皿中高壓滅菌，然后再烤箱中大約8小時烤干備用。爬片可以在培養(yǎng)皿六孔板或24孔板中都可，我選擇在培養(yǎng)皿中爬。一為節(jié)約經費（培養(yǎng)皿可以重復利用）二來覺得培養(yǎng)皿口大，操作比較方便。培養(yǎng)皿消毒同上，消毒時記得消兩把鑷子具體操作是：用胰yi酶消化好細胞，充分吹打，使之成單細胞懸液（注意：這一點很重要，關系到將來爬出來片子的質量）