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營養(yǎng)缺陷型菌株的應(yīng)用說明2023/12/14

在理論研究中，營養(yǎng)缺陷型不僅被廣泛應(yīng)用于闡明微生物代謝途徑上，而且在遺傳學(xué)的研究中具有特殊的地位。在轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、原生質(zhì)體融合、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子等遺傳學(xué)研究中，營養(yǎng)缺陷型是常用的標菌種。此外，營養(yǎng)缺陷型菌株還是研究基因的結(jié)構(gòu)與功能常用的材料。在生產(chǎn)實踐中，營養(yǎng)缺陷型可以用來切斷代謝途徑，以積累中間代謝產(chǎn)物；也可以阻斷某一分支代謝途徑，從而積累具有共同前體的另一分支代謝產(chǎn)物；營養(yǎng)缺陷型還能解除代謝的反饋調(diào)節(jié)機制，以積累合成代謝中某一末端產(chǎn)物或者中間產(chǎn)物；也可將營養(yǎng)缺陷型菌株作為生產(chǎn)菌株雜交、重組育種的

掃描電鏡的使用注意事項！2023/12/14

掃描電鏡通過用聚焦電子束掃描樣品的表面而產(chǎn)生樣品表面的圖像。它由電子光學(xué)系統(tǒng)、信號收集及顯示系統(tǒng)、真空系統(tǒng)和電源系統(tǒng)組成，應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、材料和化學(xué)等領(lǐng)域。掃描電鏡作為一種精密儀器，為延長其使用壽命，在使用時應(yīng)需要以下事項：1、將試樣置于載物臺墊片，調(diào)整粗/微調(diào)旋鈕進行調(diào)焦，直到觀察到的圖像清晰為止；2、調(diào)整載物臺位置，找到要觀察的視野，進行分析；3、掃描電鏡調(diào)焦時注意不要使物鏡碰到試樣，以免劃傷物鏡；4、當載物臺墊片圓孔中心的位置遠離物鏡中心位置時不要切換物鏡，以免劃傷物鏡；5、在做切換動作

牛血清白蛋白的分類以及作用說明2023/12/13

牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等電點4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱an酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。牛血清蛋白溶液可以作為測量蛋白質(zhì)含量的標準曲線用。一般買回來的牛血清蛋白是細小片狀的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以鐵為基本原料。1、特純級牛血清蛋白用途：用作酶標、金標等診斷試劑的封閉劑，生化試驗等

【免疫熒光】血清封閉的選擇看這篇就夠啦！2023/12/13

封閉血清用于免疫組化（IHC）或者免疫熒光（IF）實驗中樣本的封閉，降低背景，減少假陽性。遠慕提供多種屬封閉血清，液體形式產(chǎn)品（原液），無需溶解，用PBS直接稀釋即可使用，低防腐劑含量，對細胞和蛋白的毒性/影響更小。什么是封閉血清封閉血清就是將養(yǎng)殖的非免疫的正常動物采血，然后不加抗凝劑，血液凝固，血kuai收縮，析出的淡黃色液體。經(jīng)過特殊工藝處理后的血清，特別適在各類免疫學(xué)實驗中用于封閉處理，比如：IHC、IF/ICC、ELISA等。血清與血漿的區(qū)別血漿是指血液中除去細胞成分后剩下的淡黃色或無色

PCR生物實驗常用的染料介紹2023/12/12

分子生物學(xué)實驗的染料主要涉及到核酸染料和蛋白質(zhì)染料，核酸染料主要有EB（溴化乙錠,高致癌性），goldview,sybrgreen（實時定量PCR時常用染料）這些染料可以和核酸雙鏈分子特異性結(jié)合發(fā)出強熒光而被檢測到，蛋白質(zhì)染料最chang用的是考馬斯亮藍R-250，硝酸銀，其中硝酸銀有時也用于核酸染色。染料分為天然染料和人工染料兩種。天然染料有胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素等，它們多從植物體中提取得到，其成分復(fù)雜，有些至今還未搞清楚。目前主要采用人工染料，也稱煤焦油染料，多從煤焦油中提取獲得，是

檢測過程的質(zhì)量控制標準2023/12/12

檢測過程的質(zhì)量控制1.確保樣品在接收、制備和測試過程中確保樣品的原始特性，未受污染或變質(zhì)。2.測試前應(yīng)做好以下各項準備工作：①核對樣品標簽、檢測項目和相應(yīng)的檢測方法；②按檢測方法的要求準備儀器和器具。使用符合分析要求的藥品。按檢測方法配制試劑。標準溶液等；③檢查檢測現(xiàn)場清潔。溫度等可能影響測試質(zhì)量的環(huán)境條件；④選用規(guī)范的原始記錄表。3.檢測過程需按檢測方法和作業(yè)指導(dǎo)書操作。當測試過程出現(xiàn)異常現(xiàn)象應(yīng)詳細記錄。并及時采取措施處置。4.需要時，隨同樣品測試做空白試驗、標準物質(zhì)測試和控制樣品的回收率試驗

分光光度法基本原理及應(yīng)用說明2023/12/11

分光光度的概述吸光光度法定義:基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立的分析方法稱為吸光光度法，包括紫外可見分光光度法及紅外光譜法等。紫外可見分光光度法所用的光譜區(qū)域為200~780nm，其中紫外分光光度法為200~400nm，可見分光光度法為400~780nm。紅外光譜法為2.5~1000um。分光光度法概述分光光度法的發(fā)展歷程:最初人們發(fā)現(xiàn)很多物質(zhì)都具有顏色，例如Mn04-為紫紅色，F(xiàn)e3+為黃色，當含有這些物質(zhì)的溶液濃度改變時，溶液顏色的深淺度也就隨著改變。溶液越濃顏色越深，溶液越稀顏色越淺，因此利

試劑配制操作及注意事項匯總來了！2023/12/11

配制試劑的順序1.計算2.稱量或量取3.溶解4.轉(zhuǎn)移5.洗滌6.定容7.搖勻8.轉(zhuǎn)移至試劑瓶中9.標簽注意事項1.溶液應(yīng)用純化水配制，容器應(yīng)用純化水洗三次以上。2.溶液要用帶塞(蓋)的試劑瓶盛裝。3.配制好的試劑應(yīng)及時盛入試劑瓶，試劑瓶上必須有標明名稱、濃度和配制人,配制日期，復(fù)核人，復(fù)核日期的標簽，有效期限。4.溶液儲存時應(yīng)注意不要使溶液變質(zhì)。5.配制硫酸、磷酸、硝酸、鹽酸等溶液時，應(yīng)把酸倒入水中。6.防護措施:不能用手直接接觸腐蝕性及有ju毒的溶液，劇毒廢液應(yīng)作解毒處理，不可直接倒入下水道。

科研實驗選擇原代細胞還是細胞株？2023/12/08

原代細胞：從體內(nèi)直接分離的細胞。功能、代謝、形態(tài)類似體內(nèi)細胞的特點，因此原代細胞適用于分析單個細胞形態(tài)、代謝、功能。原代細胞的缺點是：細胞均一性差，因為從特定組織取下來的原代細胞可能處于不同的發(fā)育時期。增殖能力差、培養(yǎng)時間受限、轉(zhuǎn)染效率低。原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：①組織塊培養(yǎng)法組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。②消化培養(yǎng)法③懸浮細胞培養(yǎng)法

細胞株保存也可以很簡單2023/12/08

1.紫外消毒30min后關(guān)閉紫外燈，開啟超凈臺正常工作狀態(tài)，用酒精消毒操作者的雙手。2.將所需的培養(yǎng)基，胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內(nèi)，點燃酒精燈，將培養(yǎng)基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次，旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋，分別放于酒精燈的兩側(cè)。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上，瓶口對準酒精燈，且放在距離酒精燈最近的位置，瓶蓋置于酒精燈的另一側(cè)。3.將培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈上消毒2-3次，旋開后分別再次消毒瓶口和瓶蓋2-3次，蓋放于酒精燈右側(cè)后將培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液懸空倒進污缸

一些霉菌菌落的特征基本介紹2023/12/07

A、形態(tài)較大，質(zhì)地疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或松或緊的形狀。B、菌落和培養(yǎng)基間的連接緊密，不易挑取，菌落正面與反面的顏色、構(gòu)造，以及邊緣與中心的顏色、構(gòu)造常不一致。C、霉菌的菌絲有營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲的分化，而氣生菌絲沒有毛細管水，故它們的菌落必然與細菌或酵母菌的不同，較接近放線菌。霉菌的菌絲。構(gòu)成霉菌營養(yǎng)體的基本單位是菌絲。菌絲是一種管狀的細絲，把它放在顯微鏡下觀察，很像一根透明膠管，它的直徑一般為3～10微米，比細菌和放線菌的細胞約粗幾倍到幾十倍。菌絲可伸長并產(chǎn)生分枝，許多分枝的菌絲相互交織

原代培養(yǎng)技術(shù)的注意事項2023/12/07

一、注意污染1、嚴格進行動物皮膚消毒，使用三套器械取材。新生動物皮膚先用2%碘酒液消毒，成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。2、嚴格進行無菌操作，防止細菌、霉菌、支原體污染，避免化學(xué)物質(zhì)污染。自取材開始，保持所有組織細胞處于無菌條件。細胞計數(shù)可在有菌環(huán)境中進行。3、吸取液體前，瓶口和吸管進行火焰消毒；吸取液體時，避免瓶口和吸管碰撞。4、離心管入臺前，管口、管壁應(yīng)消毒。5、實驗者離開超凈臺時，要隨時用肘部關(guān)閉工作窗。6、使用過的器械用酒精棉球擦去血污后，移入另一個器皿中繼續(xù)消毒，在浸

做微生物實驗的準備步驟2023/12/06

1、準備工作，培養(yǎng)基的配制及滅菌（121-126度滅30分鐘高壓蒸汽式滅菌），玻璃器皿的滅菌（170度滅2小時干熱滅菌，也可用濕熱滅菌）若量大可加長滅菌時間。2、微生物實驗室及無菌操作臺開紫外燈滅菌1小時，關(guān)閉后至少半小時才進入無菌室，我們一般1小時后才進去。因為紫外燈照射后有殘留。3、進入無菌室要穿戴專門的衣服，帽子，鞋子，口罩，手套。在接觸無菌的東西都要用75%的酒精噴灑或涂抹，如果是藥品就要求更嚴。4、實驗完后，把平皿倒置放入設(shè)定好溫度的培養(yǎng)箱內(nèi)，并在要的時間觀察記錄。5、完后無菌室可以打

細菌的革蘭氏染色和特殊形態(tài)觀察2023/12/06

染色方法：革蘭染色法是細菌學(xué)中最guang泛使用的一種鑒別染色法。1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立。方法是先將細菌用結(jié)晶紫染色，加媒染劑（增加染料和細胞的親和力）后，用脫色劑（酒精或丙酮）脫色，再用復(fù)染劑染色。如果細菌不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽性菌(G＋)；如被脫色，而染上復(fù)染液的顏色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細胞壁的細菌分為兩大類：革蘭陽性菌和革蘭陰性菌。單染色法：只能觀察微生物的大小、形狀、和細胞排列狀況，但不能鑒別微生物以及它的特殊構(gòu)造等。復(fù)染色法：用兩種或兩種以

PCR實驗操作注意事項2023/12/05

實驗操作注意事項：盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進行擴增反應(yīng)是謹慎認真，在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意：(1)戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液，立即更換手套。(2)使用一次性吸頭，嚴禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用，吸頭不要長時間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染。(3)避免反應(yīng)液飛濺，打開反應(yīng)管時為避免此種情況，開蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上，應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。(4)操作多份樣品時，制備反

PCR之引物設(shè)計遵守原則2023/12/05

熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種技術(shù)手段。它通過在PCR體系中添加熒光基團來顯示DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的。并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實驗過程中，我們需要注意諸多細節(jié)，謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實驗，拿到實驗結(jié)果，發(fā)表高分文章，走上人生dian峰呢？引物設(shè)計的好壞，關(guān)乎著擴增效率的高低、產(chǎn)物特異性的與否。

一些特殊培養(yǎng)基的屬性介紹2023/12/04

RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。MEM也稱最di必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞

懸浮細胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項2023/12/04

懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動或搖動的液體培養(yǎng)基里，培養(yǎng)單細胞及小細胞團的組織培養(yǎng)系統(tǒng)，下面一起來了解一下懸浮細胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項。一、步驟1.將準備好的凍存細胞放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對頂端進行消毒，用吸管將細胞轉(zhuǎn)移到含有5mlwan全MEM-10培養(yǎng)基的25cm2組織培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動培養(yǎng)瓶，使細胞均勻分布于培養(yǎng)瓶中，放入5%CO2加濕培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)過夜。3.將培養(yǎng)基吸出，用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆蓋細胞，消化30~40s。4.加入10ml旋轉(zhuǎn)瓶wan全

流式細胞術(shù)實驗步驟2023/12/01

流式細胞術(shù)（flowcytometry，F(xiàn)CM）是一種綜合應(yīng)用光學(xué)、機械學(xué)、流體力學(xué)、電子計算機、細胞生物學(xué)、分子免疫學(xué)等學(xué)科技術(shù)，使被測溶液流經(jīng)測量區(qū)域，并逐一檢測其中每一個細胞的物理和化學(xué)特性，從而對高速流動的細胞或亞細胞進行快速定量測定和分析的方法。首先，待測細胞經(jīng)處理或染色后被壓人流動室，與此同時，不含細胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管人口方向與待測樣品流成一定角度，這樣鞘液就能被包繞著樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細胞在包繞下單行排列，依次通過檢測區(qū)域。在激光束的照射下產(chǎn)

如何祛除細胞上的支原體污染？2023/12/01

細胞培養(yǎng)怕支原體污染，但有一些被污染的細胞不能被丟棄時該怎么辦？接下來一起來了解一下吧如何祛除細胞上的支原體污染？據(jù)研究表明，約98％的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm，比細胞小很多，經(jīng)低速離心與細胞分離。通過反復(fù)懸浮沖洗、離心，加上使用我們的ZellShield，即可在細胞培養(yǎng)四代以內(nèi)有效地祛除支原體。什么是ZellShield？ZellShield是一種鏈青霉素類復(fù)合抗生素，對細胞影響很小，可以有效抑制細胞培養(yǎng)中的支原體、細菌、霉菌、真菌等微生物增殖。普通的鏈霉