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ELISA試劑盒實驗遇到復(fù)孔該怎么處理?2019/09/03
帶您了解ELISA試劑盒實驗遇到復(fù)孔該怎么辦?在設(shè)計ELISA復(fù)孔查看時,提出問題:是對同一個樣品作兩次稀釋,再別離加到板上的兩個孔,還是只稀釋一次,然后汲取兩次別離加到兩個孔?前者好像把稀釋時的差錯也考慮到了,但做出來的結(jié)果兩個孔相關(guān)挺大的。在ELISA實驗中設(shè)復(fù)孔,意圖是為了減少本次實驗的系統(tǒng)差錯對實驗數(shù)據(jù)帶來的影響,所以應(yīng)該用第二種,有條件的話復(fù)孔的數(shù)量可以增加,系統(tǒng)差錯更小。我司技術(shù)答復(fù):采用后者。假設(shè)在實驗室階段,或許需要屢次稀釋,然后將不同稀釋次數(shù)的別離做復(fù)孔,以便查看稀釋進(jìn)程中帶來
小鼠胰島素ELISA試劑盒具體操作步驟有哪些2019/08/28
小鼠胰島素ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。800pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別
緊張素Ⅱ 1 型受體拮抗劑對小鼠腎臟的保護(hù)作用解說2019/08/22
緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑對小鼠腎臟的保護(hù)作用機(jī)制。1材料與方法1.1實驗動物清潔級雄性SD大鼠18只,體重180±20g,在溫州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心飼養(yǎng),人工光照,陰暗各12h,自由飲食。動物許可證號:SYXK(浙)2005-0061。1.2實驗藥物與試劑纈沙坦膠囊(北京諾華制藥公司,藥準(zhǔn)字H20040217);AngⅡ放免ELISA試劑盒;鼠抗人TGF-β1、a-SMA單克隆抗體;山羊抗鼠IgG抗體;免疫組化檢測試劑盒、DAB顯色劑1.3造模與分組模型制作:用3戊巴比按0.15mL·kg-1的劑量
ELISA檢測試劑盒有具體講述了哪些免疫測定?2019/08/19
ELISA檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液
魚脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 操作步驟及保存方法2019/08/14
魚脂多糖(LPS)ELISA試劑盒操作步驟1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4)甩去孔內(nèi)液體
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫分析試劑盒具體操作步驟2019/08/07
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。360ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液180ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液90ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液45ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液22.5ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
ELISA試劑盒 的基本原理有哪些2019/08/05
ELISA試劑盒的基本原理是:①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;③測定時將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng),再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開,后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定
(C型)elisa檢測,魏氏梭菌試劑盒 幾項操作注意事項2019/07/31
(C型)elisa檢測,魏氏梭菌試劑盒操作注意事項:1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7)底物
大鼠雄激素受體( AR)ELISA試劑盒針對幾點問題解析2019/07/24
大鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒問題解析1試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。2加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進(jìn)行離心處理洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動顯色問題:使用了過期的顯色劑或者是顯色
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒操作步驟2019/07/17
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測試劑盒說明書操作步驟:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫
如何才能有效降低ELISA試劑盒吸光值2019/07/10
如何才能有效降低ELISA試劑盒吸光值,做elisa實驗,會遇到很多問題,畢竟大家都不是專業(yè)做這個,那么遇到elisa實驗結(jié)果出現(xiàn)問題,除了查找文獻(xiàn),還有什么其他解決知道呢?下面一起去看看到底elisa實驗吸光值偏高如何解決?ELISA試劑盒吸光值均偏高的原因以及解決辦法:a.原因:底物溶液受到污染。解決辦法:若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請不要再使用。b.原因:室溫太高。解決辦法:若無法降低室內(nèi)溫度,請適當(dāng)縮短步驟4的溫育時間。c.原因:反應(yīng)時間超過太久。解決辦法:請控制反應(yīng)時間。d.原因:EL
豬D乳酸脫氫酶(DLDH)ELISA試劑盒問題解析2019/06/26
豬D乳酸脫氫酶(DLDH)ELISA試劑盒問題解析:1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進(jìn)行離心處理3.洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動4.顯色問題:使用了過期
小鼠ELISA檢測試劑盒說明書樣品收集、處理方法2019/06/19
小鼠ELISA檢測試劑盒說明書樣品收集、處理方法:1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心2、血漿-----應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心3、細(xì)胞培養(yǎng)上清---檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子ELISA試劑盒操作事項2019/06/12
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒操作注意事項:(1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。(2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。(3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。(6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要
ELISA隱秘要點之加樣技術(shù)2019/06/05
常有ELISA操作者抱怨試驗復(fù)雜,而經(jīng)驗豐富的老師們會覺得很簡便,一是熟能生巧,二是把握了其間的隱秘。ELISA隱秘要點之加樣:在ELISA試劑盒中除了包被外,一般需進(jìn)行45加樣。在定性測定中有時不強(qiáng)調(diào)加樣量的性,此刻應(yīng)該運用相同口徑的滴管,保持的加樣姿勢,使每滴液體的體積根本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)則配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底,防止加在孔壁上部,并留意不可出現(xiàn)氣泡。ELISA隱秘要點之洗刷:洗刷在ELISA試劑盒過程中不是反響聚,但卻是決議試驗勝敗的關(guān)鍵。
鼠角質(zhì)細(xì)胞的分離與培養(yǎng)有哪幾點2019/05/28
實驗步驟1)將1~2天齡新生裸鼠窒息后,置于培養(yǎng)皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠,流水*沖洗,然后用70%乙醇洗兩次。2)上除小鼠的四肢和尾巴。3)將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口,用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮膚剝下,用一把鑷子夾住身體,另一把鑷子拉開皮膚。4)將剝下的皮膚組織置于放在冰上的無菌培養(yǎng)皿表面,直至所有的皮膚收集完畢。5)用2把大鼠牙齒鉗夾住皮膚組織,在含2.5%胰蛋內(nèi)酶的HBSS無菌培養(yǎng)皿中漂洗皮膚組織(組織在下),然后置4℃過夜。表皮不應(yīng)淹沒在胰蛋白酶液中。6)從胰蛋
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒注意事項2019/05/22
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒注意事項:1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.2.若不同批號elisa試劑盒的不同組分(a液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。3.反應(yīng)時間的誤差,做大量標(biāo)本時,孔和*后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。4.臨界值附近標(biāo)本波動為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗方法操作標(biāo)準(zhǔn)2019/05/15
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗方法操作標(biāo)準(zhǔn),用于ELISA測定的標(biāo)本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:1.要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。2.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染。3.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。4.血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。Elisa實驗方法操作標(biāo)準(zhǔn),加血清樣本及反應(yīng)試劑
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒有哪三條基本原理2019/05/08
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理有三條:(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;(2)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。(3)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原
大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒操作步驟2019/04/29
大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。200µg/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100µg/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50µg/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25µg/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5µg/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:
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