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上海一研生物科技有限公司
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補(bǔ)體片斷Elisa試劑盒技術(shù)原理2019/11/18
補(bǔ)體片斷Elisa試劑盒概述:ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。技術(shù)原理:(1).抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。(2).結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。(3).酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性
無色桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2019/11/13
無色桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在
豬免疫組化ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的小技巧2019/11/06
今天的文章中為大家講述一些豬免疫組化ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的小技巧,希望對(duì)大家有所幫助!1.操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)
大鼠谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒操作注意事項(xiàng)2019/10/31
大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)試劑盒操作注意事項(xiàng)1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7)底物A
小鼠糖化血紅蛋白elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項(xiàng)2019/10/23
小鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項(xiàng):1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔
人Ⅱ型膠原elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)使用方法2019/10/17
人Ⅱ型膠原elisa檢測(cè)試劑盒使用方法:1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入DetectionAb工作液100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約
裸鼠環(huán)加氧酶elisa免疫檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)闡述2019/10/12
裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)elisa免疫檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):活的細(xì)胞或組織多為無色透明,各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出;組織離開機(jī)體后很快就會(huì)死亡和產(chǎn)生組織,失去原有正常結(jié)構(gòu),因此,組織要經(jīng)固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細(xì)胞組織死亡,而能清晰辨認(rèn)其形態(tài)結(jié)構(gòu)。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒性能特點(diǎn)具體表現(xiàn)哪幾點(diǎn)2019/10/08
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒性能特點(diǎn)1、準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。2、靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于1.0IU/mL。3、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5、貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6、有效期:6個(gè)月7、檢測(cè)范圍:6.25IU/mL-200IU/mL【洗板方法】1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注
小鼠elisa檢測(cè)試劑盒相關(guān)組織構(gòu)造2019/09/25
小鼠elisa試劑盒的人elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)目的是主要用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。如合適檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培育上清、組織勻漿等標(biāo)本。小鼠elisa試劑盒相關(guān)組織構(gòu)造:1.血清:操作進(jìn)程中幸免任何細(xì)胞,運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。搜集血液后,1000×g離心23分鐘。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心60分鐘去除顆粒。3.細(xì)胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織參加過量生理鹽水搗碎。1
人ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用質(zhì)量很重要2019/09/18
人ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在使用時(shí)先平衡至室溫,不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先檢查是否變質(zhì),顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。1.操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部
ELISA試劑盒定量方法的一些類型和構(gòu)架解析2019/09/11
ELISA試劑盒定量方法的類型和構(gòu)架采用ELISA技術(shù)進(jìn)行定量的平臺(tái)化方法——一般來說可以分為兩類,即間接法和直接法。間接法也稱為競(jìng)爭(zhēng)法,直接法也稱雙抗夾心法。今天,我們重點(diǎn)為大家介紹直接法。直接法以定量抗原為例:首先,以與抗原有強(qiáng)親和力的抗體包被固定在酶標(biāo)板材上,加入抗原標(biāo)準(zhǔn)品/樣品反應(yīng),再加入與抗原有強(qiáng)親和力的抗體并且偶聯(lián)了辣根過氧化氫酶HRP/堿性磷酸酶AP的酶聯(lián)抗體反應(yīng),后加入酶對(duì)應(yīng)的底物顯色,中間通過洗滌去除反應(yīng)體系中未結(jié)上的試劑成分。這樣信號(hào)大小和抗原的濃度成正相關(guān),隨著反應(yīng)的進(jìn)行酶
魚生長(zhǎng)激素(GH)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒樣本處理及要求2019/09/04
魚生長(zhǎng)激素(GH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)2019/09/03
人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):1.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。5.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。7.加
人羅丹納(ryr)ELISA試劑盒樣本處理要求2019/08/28
人羅丹納(ryr)ELISA試劑盒樣本處理1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3、尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行
豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒技術(shù)原理解析2019/08/22
豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒技術(shù)原理:1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。3、酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。4、受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。5、此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。6、加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定
ELISA試劑盒單克隆抗體制備,總結(jié)的幾種辦法參閱2019/08/19
ELISA試劑盒單克隆抗體制備時(shí)很多朋友會(huì)遇到這樣的問題,即咱們免疫用的蛋白為原核表達(dá)蛋白而意圖蛋白是真核蛋白或病毒等,由于沒有規(guī)范品咱們做出來的抗體沒有辦法用規(guī)范品來驗(yàn)證是否與其發(fā)作反響,終究導(dǎo)致咱們做出的是無用抗體。以下內(nèi)容為我公司試驗(yàn)室技能總結(jié)的幾種辦法供咱們參閱,期望對(duì)咱們有所協(xié)助。一、若要檢測(cè)抗原為某一細(xì)胞因子ELISA試劑盒辦法:1、通過超表達(dá)的辦法樹立安穩(wěn)表達(dá)的細(xì)胞系,留意要在意圖蛋白上加相應(yīng)的標(biāo)簽,以便純化。若僅僅是找到配對(duì)抗體則不需求純化甚至不需求樹立安穩(wěn)表達(dá)的細(xì)胞系瞬時(shí)轉(zhuǎn)染就
攻克ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)常見的問題解析2019/08/19
常見問題分析Q1.標(biāo)曲不顯色或顯色很弱,樣本顯色溶解標(biāo)準(zhǔn)品以及倍比稀釋時(shí),未渦旋震蕩或不夠充分。標(biāo)準(zhǔn)品溶解、倍比稀釋時(shí)均需要渦旋震蕩以保證充分混勻。單純依靠移液器反復(fù)吹打,效率較低、效果也不一定*。Q2.標(biāo)曲和樣本均不顯色在孵育階段靜置在桌面上,這樣非常不利于抗原抗體之間的充分接觸,導(dǎo)致顯色偏弱。推薦孵育階段,使用ELISA試劑盒的微孔板振蕩器,調(diào)至合適的頻率,使抗原抗體充分接觸,保證結(jié)合效果。如果排除上述原因,有可能是漏加了某個(gè)組分,如檢測(cè)抗體、酶等。對(duì)于比較馬虎的新手,一定要做好標(biāo)記和記錄,
豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu)及原理2019/08/14
豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu)1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心12分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心60分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿:將組織加入適量生li鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,取上清液。5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2019/08/07
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)?所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;?試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,*混勻并短暫離心;?反應(yīng)液應(yīng)避光保存;?反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;?使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)與用工作服;?樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;?實(shí)驗(yàn)完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;?試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理?!緝?chǔ)存條件及有效期】-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融
內(nèi)源性物質(zhì)常見干擾物質(zhì)及解決辦法2019/08/05
有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。(1)類風(fēng)濕因子人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)可以與ELISA試劑盒系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合,從而導(dǎo)致假陽性。解決該情況的辦法有:①用F(ab)2替代完整的IgG;②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性(63℃,10min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標(biāo)本稀釋液中同樣
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