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2020
05-09

實驗過程中遇到的不增殖細(xì)胞有哪些？
在生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常會用到大量的細(xì)胞進行實驗，而往往通過各種渠道得來的細(xì)胞數(shù)量都有限，無法滿足實驗過程中所需要的細(xì)胞數(shù)量，所以為了使實驗更順利的進行，科研人員往往需要前期對所需的細(xì)胞進行擴充培養(yǎng)，以便在后期的實驗中，可以不間斷使用。通常的細(xì)胞實驗中，很多科研人員都會根據(jù)實驗方案選擇常見的細(xì)胞，包括無限傳代的細(xì)胞系和有限傳代的原代細(xì)胞，一般的細(xì)胞都具有分裂增殖的能力，可以進行凍存、復(fù)蘇及傳代，因為這樣的難度系數(shù)低，實驗會少出現(xiàn)波折，也有少量的實驗研究會用到一些特殊的不增殖細(xì)胞。細(xì)胞系可無限傳代，
2019
12-27

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法
平滑肌即無紋肌的通稱，平滑肌是由長紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成。它不構(gòu)成獨立的器官，而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素（肌層）。平滑肌細(xì)胞互相連接，形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官；在功能上可以通過縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運動和變形，也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮，使器官對抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀。小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過程有關(guān)．如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發(fā)病時，可以檢測到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大，表型也發(fā)生改變，由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型，并分
2019
09-24

人成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)制備方式
成纖維細(xì)胞屬于由中胚層分化而來的間質(zhì)細(xì)胞。細(xì)胞來源于人正常的皮膚組織，成纖維細(xì)胞是一種貼壁培養(yǎng)方式的細(xì)胞，由于這些細(xì)胞非常容易培養(yǎng)，它們已經(jīng)被廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中。一般而言，成纖維細(xì)胞能夠分泌I型和III型膠原等細(xì)胞外基質(zhì)，并且研究表明不同器官中的成纖維細(xì)胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時，成纖維細(xì)胞由可增殖，可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的，可重塑基質(zhì)的表型，同時，它們會分泌大量的透明質(zhì)酸來應(yīng)對修復(fù)時的炎癥反應(yīng)。以下是鏡像綺點提供的一種人成纖維細(xì)胞的制備方式（僅供參考）：1.首先在分離成纖維細(xì)胞時
2019
08-14

鏡像綺點 || 原代小鼠心肌成纖維細(xì)胞分離和培養(yǎng)方法
小鼠心肌成纖維細(xì)胞的組織來源于實驗動物的正常心臟組織，心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟中，心肌成纖維細(xì)胞約占正常心肌組織細(xì)胞總數(shù)的60%-70%，是心臟中非心肌細(xì)胞的主要組成部分，廣泛存在于心臟組織中，包圍心肌細(xì)胞，連接心肌細(xì)胞間質(zhì)，與缺血性心臟病、炎癥、肥大、梗死等病理狀態(tài)密切相
2019
07-24

原代角質(zhì)形成細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞在相關(guān)細(xì)胞實驗使用過程中越來越多，人們不再單單趨于使用細(xì)胞系進行實驗研究，因為細(xì)胞系常常由于體外長期培養(yǎng)，而容易丟失原有的生物學(xué)特性，對藥物處理的反應(yīng)差距越來越大。原代細(xì)胞剛從組織中分離開，生物學(xué)特性未發(fā)生很大變化，仍保留原來的遺傳特性，也接近和反應(yīng)體內(nèi)生長特性，原代細(xì)胞的活力和生長狀態(tài)都比較好，細(xì)胞的純度和基因保留可達到90%以上，適宜用于藥物敏感性試驗、細(xì)胞分化等試驗研究，使用原代細(xì)胞進行實驗，可以獲得更準(zhǔn)確的研究和數(shù)據(jù)。為了更好的服務(wù)于廣大科研工作者，鏡像綺點技術(shù)人員特提供了角質(zhì)形
2019
06-05

小鼠原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法
海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)，日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長突起，由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的組織來源于實驗小鼠的正常腦組織，因為海馬神經(jīng)元細(xì)胞類似于干細(xì)胞屬于高分度分化的細(xì)胞特性，具有不能傳代，不能增殖等特點，所有收到細(xì)胞后盡快使用。1.試驗所需儀器設(shè)備及試劑（1）儀器生物安全柜CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱熒光倒置顯微鏡高速冷凍離心機電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（2）試劑耗材T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶血球計數(shù)板細(xì)胞培養(yǎng)孔板紅細(xì)胞裂解液神經(jīng)元*培養(yǎng)基0.
2019
06-05

細(xì)胞STR檢測服務(wù)
短串聯(lián)重復(fù)(Shorttandemrepeats,STR)，又稱微衛(wèi)星DNA(MicrosatelliteDNA)或簡單重復(fù)序列(Simplerepeatsequence,SRS或SSR)，是廣泛存在于原核生物和真核生物基因組中的核苷酸重復(fù)序列。有絲分裂過程中DNA鏈之間的錯配引起的復(fù)制滑動被認(rèn)為是導(dǎo)致STR產(chǎn)生的常見原因，并且依據(jù)不同復(fù)制單元大小的不同以及不同物種之間，復(fù)制滑動發(fā)生的概率也不相同。STR是以核心序列(corerepeatunits)首尾相連多次重復(fù)形成。每個STR的核心序列結(jié)構(gòu)
2019
05-30

細(xì)胞復(fù)蘇方法
細(xì)胞操作流程復(fù)蘇1.將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到37℃；2.從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入恒溫水浴鍋中復(fù)溫，不斷震蕩凍存管以提高復(fù)溫速率；將融化了的凍存管中的用移液管轉(zhuǎn)入一直裝有5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中，充分混勻后，300g離心5min；3.離心完成后棄去上清，用1ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入T-25細(xì)胞培養(yǎng)中，再加*培養(yǎng)基4ml，之后轉(zhuǎn)入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。鏡像綺點（上海）細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：一、原代細(xì)胞服務(wù)各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源；多種人源性正常及腫瘤
2017
10-09

細(xì)胞轉(zhuǎn)染的類型及方法
轉(zhuǎn)染（Transfection）是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白，或特異性增強或抑制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達。細(xì)胞轉(zhuǎn)染有哪些類型和方法呢？1）根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時間長短，可以分為瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)。瞬轉(zhuǎn)穩(wěn)轉(zhuǎn)導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中，而是保留在細(xì)胞核上導(dǎo)入的DNA整合到基因組中導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代；遺傳改變只是暫時的導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)能夠代代相傳；遺傳改變是*的不需要選擇性篩選需要選擇性篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞DNA載體和RNA都可用于瞬時轉(zhuǎn)染只有DNA載體
2017
10-09

血清質(zhì)檢方法和重要作用
細(xì)胞培養(yǎng)基的構(gòu)成中動物血清對細(xì)胞的生長繁殖起著重要作用。在動物血清中牛血清的應(yīng)用又是zui廣泛的，所以想要細(xì)胞在培養(yǎng)過程中長的好、穩(wěn)定，牛血清的質(zhì)量好壞直接影響生物研究的質(zhì)量和安全性，使用質(zhì)量好的牛血清也是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)。血清是提供生長激素、營養(yǎng)物，以及低分子營養(yǎng)物；提供結(jié)合蛋白；能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力；是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源；起酸堿度緩沖液作用；提供蛋白酶抑制劑；細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細(xì)胞不受損傷；能與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。血清分類胎牛血
2017
10-09

養(yǎng)細(xì)胞需要注意的細(xì)節(jié)
養(yǎng)細(xì)胞可謂是個精細(xì)活，從事養(yǎng)細(xì)胞的人都知道養(yǎng)細(xì)胞的時候一旦不注意，就很容易造成細(xì)胞污染，所以想要養(yǎng)好細(xì)胞除了小心謹(jǐn)慎以外，還要提前做好準(zhǔn)備：細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備1）在帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險。2）細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實驗時間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。3）結(jié)束操作后,別忘了培養(yǎng)基對光敏感,應(yīng)盡可能避光保存。細(xì)胞培養(yǎng)的定期檢查1）定期檢
2017
10-09

制成免疫熒光容易出現(xiàn)的問題和注意事項
在制作原代細(xì)胞免疫熒光時，容易出現(xiàn)一些問題，造成熒光鑒定失敗，將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，制成熒光抗體檢測組織或細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）時，一定要注意抗體的比例高低和濃度。制作免疫熒光常用的方法有：方法一：直接法步驟：將熒光標(biāo)記的特異性抗體（抗原）直接加在抗原（抗體）上，經(jīng)一定的溫度和時間染色，水洗—干燥—封片—鏡檢優(yōu)點：操作簡便、特異性高、非特異性染色少缺點：敏感性低方法二：間接法步驟：先用已知未標(biāo)記的特異性抗體（一抗）與抗原反應(yīng)，再用標(biāo)記的抗體（二抗）與其反應(yīng)，形成抗原—抗體—抗體復(fù)合物，水

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