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一起了解一抗和二抗異同2021/09/27: 抗體是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白?？贵w按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等。按抗體產(chǎn)生的來(lái)源分為正常抗體(天然抗體)，如血型ABO型中的抗A和抗B的抗體，和免疫抗體如抗微生物的抗體。按反應(yīng)抗原的來(lái)源分為異種抗體，異嗜性抗體，同種抗體和自身抗體。按抗原反應(yīng)的凝集狀態(tài)分為*抗體IgM和不*抗體IgG等?？贵w在醫(yī)療實(shí)踐中應(yīng)用甚為廣泛。如用于疾病的預(yù)防、診斷和治療方面都有一定的作用。臨床上用丙種球蛋白預(yù)防病毒性肝炎、麻疹、風(fēng)疹等，國(guó)際上用抗Rh免疫球蛋

有關(guān)抗原抗體小課堂2021/09/24: 1.抗原：引起人體產(chǎn)生抗體的物質(zhì)叫做抗原。（1）抗原（antigen，縮寫(xiě)Ag）為任何可誘發(fā)免疫反應(yīng)的物質(zhì)。外來(lái)分子可經(jīng)過(guò)B細(xì)胞上免疫球蛋白的辨識(shí)或經(jīng)抗原呈現(xiàn)細(xì)胞的處理并與主要組織相容性復(fù)合體結(jié)合成復(fù)合物再活化T細(xì)胞，引發(fā)連續(xù)的免疫反應(yīng)。（2）抗原反應(yīng)所謂抗原的反應(yīng)原性是指能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)。具備免疫原性和反應(yīng)原性兩種能力的物質(zhì)稱為*抗原，如病原體、異種動(dòng)物血清等。只具有反應(yīng)原性而沒(méi)有免疫原性的物質(zhì)，稱為半抗原，如青霉素、磺胺等半抗原沒(méi)有免疫。原性，不會(huì)引起免疫

ELISA實(shí)驗(yàn)洗板的兩種方法2021/09/15: 在做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，洗板有兩種方法：手工法洗板和洗板機(jī)洗板。二者沒(méi)有本質(zhì)的差別,只要操作合乎要求,均能得到正確、可靠的結(jié)果。手工洗板是每次反應(yīng)溫育后,將反應(yīng)液吸出或甩干,然后在板孔中加滿洗液,放置2～3min后,將洗液吸出或甩干再在吸水紙上拍干。重復(fù)上述洗滌步驟3～4次,最后在吸水紙上拍干即可。手工洗板人為因素比較大,實(shí)驗(yàn)人員必須經(jīng)驗(yàn)豐富,洗滌次數(shù)要足夠,沖擊力又不要太大,加入的洗液量以剛滿反應(yīng)孔為限,防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈,同時(shí)防止孔與孔之間液體交叉。洗滌結(jié)束后扣干亦非常重要,否則易造成

幾種常用免疫組織化學(xué)技術(shù)的原理2021/09/07: 免疫組化技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)1、特異性強(qiáng)免疫學(xué)的基本原理決定了抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示，如角蛋白(keratin)顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。2、敏感性高在應(yīng)用免疫組化的起始階段，由于技術(shù)上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù)，那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍；現(xiàn)在由于ABC法或SP法的出現(xiàn)，使抗體稀釋上千倍、上萬(wàn)倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合，這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng)

免疫熒光試劑盒檢測(cè)貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞操作指南2021/09/02: 細(xì)胞，生物學(xué)名詞。構(gòu)成生物體的基本單位。體形極微，在顯微鏡下始能窺見(jiàn)。形狀多種多樣。主要由細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成，表面有薄膜。動(dòng)植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)大致相同。植物細(xì)胞質(zhì)膜外有細(xì)胞壁，細(xì)胞壁中常有質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中常有中心體，而高等植物細(xì)胞中則無(wú)。細(xì)胞有運(yùn)動(dòng)、營(yíng)養(yǎng)和繁殖等機(jī)能。貼壁細(xì)胞：1.取普通潔凈蓋玻片于70%乙醇中浸泡5分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)吹干或用細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)PBS或0.9%NaCl等溶液洗滌三遍，再用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌一遍。將蓋玻片置于六孔板內(nèi)，種入細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)夜，使約為50%-80%滿。2.按照特定

探討有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)品溶解問(wèn)題2021/08/25: 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard)，即標(biāo)準(zhǔn)物品，是中藥標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品研究中心代理的作為一種衡量標(biāo)準(zhǔn);用做藥物方面，則為含量測(cè)定中的標(biāo)準(zhǔn)含量。標(biāo)準(zhǔn)品包括化學(xué)計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)品、冶金標(biāo)準(zhǔn)品和藥檢標(biāo)準(zhǔn)品。標(biāo)準(zhǔn)品溶解度溶解度：是指一定溫度下，溶解于一定體積的溶劑中的溶質(zhì)的質(zhì)量。通常認(rèn)為溶解度良好或者溶解充分，是指溶液澄清無(wú)肉眼可見(jiàn)的不溶物質(zhì)。影響溶解度的因素主要有3點(diǎn)：1、溶質(zhì)（即所選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）對(duì)于選定的標(biāo)準(zhǔn)品，溶質(zhì)基本就是確定的（如果是混標(biāo)的話，可能要考慮不同組分之間的干擾問(wèn)題）。2、溶劑在選擇溶劑時(shí)要注意溶劑對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)物

標(biāo)記基因和報(bào)告基因分辨指南2021/08/19: 一、標(biāo)記基因和報(bào)告基因的概念標(biāo)記基因(markergene)，是一種已知功能或已知序列的基因，能夠起著特異性標(biāo)記的作用。標(biāo)記基因是選擇標(biāo)記基因的簡(jiǎn)稱，是指其編碼產(chǎn)物能夠使轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、組織具有對(duì)抗生素等的抗性，或者使轉(zhuǎn)化細(xì)胞、組織具有代謝的*性。在培養(yǎng)基中加入抗生素等選擇試劑的條件下，非轉(zhuǎn)化的細(xì)胞死亡或生長(zhǎng)受到抑制，而轉(zhuǎn)化的細(xì)胞能夠繼續(xù)存活，從而將轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、組織從大量的細(xì)胞或組織中篩選出來(lái)的一類基因。在基因工程意義上來(lái)說(shuō)，它是重組DNA載體的重要標(biāo)記，通常用來(lái)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)化成功與否；在基因定位意義上來(lái)

Elisa常見(jiàn)樣本處理方法2021/08/11: Elisa是一種快速、靈敏、準(zhǔn)確可靠的定量分析方法。樣本的處理對(duì)于Elisa實(shí)驗(yàn)的成功有舉足輕重的作用。利用ELISA進(jìn)行檢測(cè)的樣本類型包括：血液（血清、血漿），組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清，皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、陰道分泌物等。下面我們就常見(jiàn)的樣本處理方法：血液采取后應(yīng)盡快進(jìn)行處理，使血清（漿）從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來(lái)。Q:血清與血漿的區(qū)別?A:血清是血液凝固后缺少纖維蛋原的血漿，故血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均等同于血清。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特性和基本要求2021/08/03: 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(RM)referencematerial(RM):是一種已經(jīng)確定了具有一個(gè)或多個(gè)足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料，作為分析測(cè)量行業(yè)中的"量具"，在校準(zhǔn)測(cè)量?jī)x器和裝置、評(píng)價(jià)測(cè)量分析方法、測(cè)量物質(zhì)或材料特性值和考核分析人員的操作技術(shù)水平，以及在過(guò)程中產(chǎn)品的質(zhì)量控制等領(lǐng)域起著*的作用。從定義可以看出標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)具有三個(gè)顯著特點(diǎn):(1)具有特性量值的準(zhǔn)確性、均勻性、穩(wěn)定性;(2)量值具有傳遞性;(3)實(shí)物形式的計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)。準(zhǔn)確性、均勻性和穩(wěn)定性是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值的特性和基本要求：(1)準(zhǔn)確性通常標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書(shū)

八種抗體知識(shí)課堂2021/07/28: 1、流式抗體流式抗體是經(jīng)過(guò)流式實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的，一般是針對(duì)單一種屬的直接帶熒光標(biāo)記的單克隆抗體，檢測(cè)的是單細(xì)胞懸液，結(jié)果通過(guò)流式細(xì)胞儀分析。2、免疫熒光抗體免疫熒光抗體是經(jīng)過(guò)免疫熒光實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的單克隆或者多克隆抗體，抗體通常情況下一般不帶標(biāo)記，通過(guò)FITC、CY3等熒光標(biāo)記二抗顯色，結(jié)果通過(guò)熒光顯微鏡觀察。3、免疫組化抗體免疫組化抗體是經(jīng)過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的單克隆或者多克隆抗體，抗體通常情況下一般不帶標(biāo)記，通過(guò)酶標(biāo)二抗催化底物顯色，結(jié)果通過(guò)普通光學(xué)顯微鏡觀察。4、熒光標(biāo)記抗體熒光標(biāo)記抗體一般指的是帶FI

培養(yǎng)基制備的操作方法2021/07/21: 培養(yǎng)基制備的操作方法：1、培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對(duì)，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來(lái)源，和各種成份的牌號(hào)，最終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注

免疫熒光技術(shù)特點(diǎn)及常見(jiàn)問(wèn)題分析2021/07/14: 免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。技術(shù)特點(diǎn)：該技術(shù)的主要特點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點(diǎn)是:非特異性染色問(wèn)題尚未解決，結(jié)果判定的客觀性不足，技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同，還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比，

大腸桿菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟2021/07/07: 實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備：1.器材旋渦混合器，微量移液取樣器，移液器吸頭，1.5ml微量離心管，雙面微量離心管架，干式恒溫氣浴(或恒溫水浴鍋)，制冰機(jī)，恒溫?fù)u床，培養(yǎng)皿(已鋪好固體LB-Amp)，超凈工作臺(tái)，酒精燈，玻璃涂棒，恒溫培養(yǎng)箱。2.試劑培養(yǎng)基(不加抗菌素)，LB培養(yǎng)基(加抗菌素)，無(wú)菌ddH2O，IPTG，X-gal。3.材料處理無(wú)菌ddH2O，1.5ml離心管裝入鋁制飯盒(滅菌)、移液器吸頭裝入相應(yīng)的吸頭盒(滅菌)，20%IPTG(M/V)，2%X-gal(M/V，用N,N-二甲基甲酰胺配)。操

避免ELISA實(shí)驗(yàn)失敗可注意以下七點(diǎn)2021/07/01: 在實(shí)驗(yàn)前閱讀并充分了解產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，可以一定程度上避免出現(xiàn)意想不到的結(jié)果。參考以下提示來(lái)避免實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)問(wèn)題。1.檢查試劑盒的保質(zhì)期，保證所有試劑按說(shuō)明書(shū)上的建議正確保存；2.檢查試劑溶液是否存在不穩(wěn)定或降解跡象，如沉淀或變色等；3.底物溶液應(yīng)為無(wú)色；4.試劑制備和保存時(shí)應(yīng)使用干凈的一次性塑料吸量管、槍頭和容器。每次加液（樣品、標(biāo)準(zhǔn)品及其他試劑）時(shí)，及時(shí)更換槍頭，避免交叉污染；5.確保孵育時(shí)間和溫度與規(guī)定的高度一致；6.盒中試劑不能用其他試劑替代；7.建議樣本和標(biāo)準(zhǔn)品都做復(fù)孔，以提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

菌種的復(fù)蘇與保存2021/06/23: 菌種的復(fù)蘇與保存應(yīng)在超凈工作臺(tái)或生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。一、菌種的復(fù)蘇把凍干菌種管、滅菌1mL滴管、雙碟、鑷子、營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面數(shù)支，移入超凈工作臺(tái)或生物安全柜。先用砂輪將凍干菌種安瓶頸部挫出刻痕，再將凍干菌種管外壁用dian酒擦洗消毒、稍干，用75%乙醇棉擦凈，放在滅菌雙碟內(nèi)，待干。點(diǎn)燃酒精燈，將菌種管的封口一端在火焰上，燒灼紅熱，用滅菌滴管吸取營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，滴在灼熱的菌種管封口一端，使驟冷而炸裂。取滅菌鑷子，在火焰旁，將炸裂的管口打開(kāi)，放入滅菌雙碟內(nèi)，另取1支滅菌滴管，在火焰旁吸取營(yíng)

如何區(qū)別標(biāo)準(zhǔn)滴定液和標(biāo)準(zhǔn)溶液2021/06/17: 一般來(lái)說(shuō)標(biāo)準(zhǔn)溶液與標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液并不嚴(yán)格區(qū)分的，兩者都是已知準(zhǔn)確濃度的溶液，只要是已知準(zhǔn)確濃度的溶液都可以稱標(biāo)準(zhǔn)溶液，它包括了標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液是指已知準(zhǔn)確濃度的用于滴定分析的溶液，標(biāo)準(zhǔn)滴定度是指每1mL某摩爾濃度的滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）所相當(dāng)?shù)谋粶y(cè)藥物的質(zhì)量（g/mL）。計(jì)算公式:滴定度TB/A每毫升標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于被測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量單位是g/ml或mg/mlTB/A=mA/VB（B指標(biāo)液，A指被測(cè)物）物質(zhì)的量濃度與滴定度之間的換算B的濃度=b/a乘以T再乘以1000再除以A的摩爾質(zhì)量（a，b是反

ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題解答2021/06/09: 科研ELISA實(shí)驗(yàn)中會(huì)遇到很多問(wèn)題，不是這有點(diǎn)小問(wèn)題，就是那有點(diǎn)小問(wèn)題。以下七點(diǎn)是我們?cè)诙嗄甑膶?shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到問(wèn)題的總結(jié)：1、標(biāo)曲不顯色或顯色很弱，樣本顯色溶解標(biāo)準(zhǔn)品以及倍比稀釋時(shí)，未渦旋震蕩或不夠充分。標(biāo)準(zhǔn)品溶解、倍比稀釋時(shí)均需要渦旋震蕩以保證充分混勻。單純依靠移液器反復(fù)吹打，效率較低、效果也不一定最佳。2、標(biāo)曲和樣本均不顯色在孵育階段靜置在桌面上，這樣非常不利于抗原抗體之間的充分接觸，導(dǎo)致顯色偏弱，推薦孵育階段，使用ELISA專用的微孔板振蕩器，調(diào)至合適的頻率，使抗原抗體充分接觸，保證結(jié)合效果

ELISA實(shí)驗(yàn)中造成假陽(yáng)性的主要四點(diǎn)錯(cuò)誤操作2021/05/26: ELISA實(shí)驗(yàn)中造成假陽(yáng)性的主要四點(diǎn)錯(cuò)誤操作：1、加樣對(duì)于間接ELISA標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋，如果加樣不準(zhǔn)就會(huì)造成誤差，尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時(shí)，很小的誤差，會(huì)導(dǎo)致較大的相對(duì)誤差，使陰性（或弱陽(yáng)性）標(biāo)本呈陽(yáng)性（或陰性）。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。目前，大部分血站都已使用全自動(dòng)酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本，可較好地避免以上誤差。2、洗滌在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步，應(yīng)引起操作者重視。無(wú)論是手工操作還是機(jī)器操作，得出不正確的

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作2021/05/17: 為了使終究的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)效果就要較高的可靠性，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)開(kāi)端前有必要好的前期準(zhǔn)備作業(yè)包括對(duì)實(shí)驗(yàn)所需的儀器進(jìn)行質(zhì)控。使儀器堅(jiān)持*作業(yè)狀況，應(yīng)建立維護(hù)和校對(duì)儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，zui常見(jiàn)需求操控的儀器包括：移液器（加樣槍）、溫箱、洗板機(jī)和酶標(biāo)儀。具體質(zhì)控操作請(qǐng)參閱我司技能整理的如下要求：1）洗板機(jī)：每個(gè)設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)矩，一般不逾越2μl；人工扣板時(shí)，墊紙不濕；守時(shí)檢查管孔是否阻塞。2）酶標(biāo)儀：常常維護(hù)其光學(xué)部分，防止濾光片霉變，守時(shí)檢測(cè)校對(duì)，使其堅(jiān)持出色的作業(yè)功能。3）移液器：E

其它類ELISA試劑盒操作步驟及優(yōu)勢(shì)2021/04/28: 其它類ELISA試劑盒操作步驟：1.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。2.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用3.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。4.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。5、底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。其它類ELISA試劑盒優(yōu)勢(shì)：1、先進(jìn)的優(yōu)化方案----重復(fù)性高，可靠性強(qiáng)2、規(guī)范包被操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高3、*抗體----高效、靈敏、

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