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細(xì)胞培養(yǎng)重要名詞解析2021/10/11: 飽和密度(Saturationdensity)：在特殊培養(yǎng)條件下，每平方厘米(單層培養(yǎng))或每毫升細(xì)胞懸液內(nèi)可達(dá)到的最大細(xì)胞數(shù)。匯合(Confluent)：指細(xì)胞增殖生長(zhǎng)相互連接成片占據(jù)所有底物面積現(xiàn)象。超匯合(Superconfluent)：?jiǎn)螌蛹?xì)胞培養(yǎng)附在底物上生長(zhǎng)，匯合后發(fā)展成多層狀態(tài)。傳代(Passage)，也稱再培養(yǎng)(Subculture)，把一瓶培養(yǎng)細(xì)胞全部或分成幾份再培養(yǎng)的過(guò)程。單層細(xì)胞培養(yǎng)(Monolayerculture)：培養(yǎng)細(xì)胞在底物上生長(zhǎng)成單層的培養(yǎng)法,即二維培養(yǎng)方法。代或

?PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意的問(wèn)題2021/10/08: 1、如何確定引物的濃度？前面我們說(shuō)到，引物一般交由試劑公司合成，有時(shí)候具體的濃度我們也不能確定。有些人喜歡稀釋十倍，有些人喜歡稀釋二十倍。我個(gè)人認(rèn)為比較穩(wěn)妥的做法是在每次拿到反轉(zhuǎn)的cDNA后，先會(huì)稀釋3倍左右，然后利用管家基因做一次RT-PCR，循環(huán)數(shù)一般為25循環(huán)，鑒定一下具體濃度，再?zèng)Q定最后的稀釋倍數(shù)。2、合成的引物是我們想要的引物嗎？一般來(lái)說(shuō)在拿到很多引物的時(shí)候，可以通過(guò)普通的PCR看看是否是單一條帶，鑒定一下引物的特異性。如果實(shí)驗(yàn)室不差錢，則可以通過(guò)溶解曲線對(duì)所有的引物的特異性做一次鑒定

常見(jiàn)的菌株功能作用2021/09/27: 不同的菌種有不同的作用，以下是幾種常見(jiàn)的菌株功能作用1、動(dòng)物雙歧桿菌調(diào)節(jié)腸道菌群，改善慢性腹瀉。2、乳雙歧桿菌減輕腹瀉，均衡胃腸道菌群。3、鼠李糖乳桿菌增強(qiáng)寶寶對(duì)過(guò)敏原的耐受力，預(yù)防過(guò)敏（哮喘、濕疹等），緩解牛奶過(guò)敏引起的濕疹。4、鼠李糖乳桿菌分解酪蛋白，提升對(duì)牛奶、花生的耐受力。5、乳雙歧桿菌對(duì)治療腹瀉的臨床實(shí)驗(yàn)研究最多，可有效調(diào)節(jié)腸道，提高免疫力。6、瑞士乳桿菌具有較強(qiáng)的蛋白水解能力，調(diào)節(jié)腸道菌群能力，調(diào)節(jié)免疫力的功效，還具有產(chǎn)生細(xì)菌素或生物活性肽的潛能。7、嬰兒雙歧桿菌具有抗過(guò)敏、抗腫瘤、

ELISA試劑盒?包被如何選取用抗原還是抗體2021/09/24: ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)包被用抗體或抗原選?。海ㄒ唬┌挥每乖篍LISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)用于包被固相載體的抗原按其來(lái)源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動(dòng)物組織、微生物培養(yǎng)物等，須經(jīng)提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取，一般的細(xì)菌和病毒抗原可以從其培養(yǎng)物中提取，蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中提取等（例如AFP從臍帶血或胎肝中提?。Ｖ亟M抗原是抗原基因在質(zhì)粒體中表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或酵母菌為質(zhì)粒體。重組抗

一步染料法（YBR No-ROX One Step Kit）特點(diǎn)2021/09/15: BIOG產(chǎn)品特點(diǎn)1.逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個(gè)反應(yīng)管內(nèi)一步完成，操作簡(jiǎn)便快速；2.使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，有效避免了非特異擴(kuò)增；3.反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，靈敏度高，最di可檢測(cè)1pg總RNA中的目標(biāo)片段,特別適合低拷貝RNA的檢測(cè)。BIOG產(chǎn)品介紹BIOGHCElitefastSYBRNo-ROXOneStepKit專為以RNA為模板的定量PCR檢測(cè)而設(shè)計(jì)。使用BIOGHCElitefastSYBRNo-ROXOneStepKit，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個(gè)反應(yīng)管內(nèi)一步完成，中間無(wú)

有關(guān)PCR實(shí)驗(yàn)操作步驟2021/09/07: PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級(jí)別。PCR實(shí)驗(yàn)樣本采集、存放及運(yùn)輸：1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。PCR實(shí)

三種常見(jiàn)抗體保存方法2021/09/02: 抗體由于性質(zhì)和所使用的儲(chǔ)存條件等各有不同，其保質(zhì)期可能從幾周到幾年?？贵w能否正確保存，直接決定了抗體的活性和使用效果。每個(gè)抗體有其*的保存最佳條件，但我們依然可以總結(jié)抗體保存的一般準(zhǔn)則以及一些注意事項(xiàng)。抗體必須存放在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H值范圍。為了維持蛋白質(zhì)的活性，以及防止其聚集，經(jīng)常保存在一定濃度的甘油，蔗糖，或類似的物質(zhì)里面。如果抗體保存得當(dāng)，大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。(1)多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而，一旦抗體被純化后，儲(chǔ)存在50%的甘油中于-

配制培養(yǎng)基過(guò)程步驟2021/08/25: 培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及生長(zhǎng)素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素、色素、激素和血清。1、選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)總體而言，所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水及能源，但由于微生物營(yíng)養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡(jiǎn)單的元機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的

一起了解抗體與免疫球蛋白2021/08/19: 抗體就是具有特異性的免疫球蛋白。特異性是指針對(duì)特定微生物或異體蛋白具有的抗性，也叫中和性。一抗和二坑的區(qū)別：*抗體就是平常所說(shuō)的抗體，即能和抗原特異性結(jié)合。第二抗體是能和抗體結(jié)合的，即抗體的抗體。主要用于檢測(cè)抗體的存在。一抗是針對(duì)抗原的抗體，二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說(shuō)，抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán)，而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)（底物和二抗）。

ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題解答2021/08/11: ELISA實(shí)驗(yàn)中會(huì)遇到很多問(wèn)題，不是這有點(diǎn)小問(wèn)題，就是那有點(diǎn)小問(wèn)題，那該怎么辦呢？以下七點(diǎn)是我們?cè)诙嗄甑膶?shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到問(wèn)題的總結(jié)：Q1.標(biāo)曲不顯色或顯色很弱，樣本顯色溶解標(biāo)準(zhǔn)品以及倍比稀釋時(shí)，未渦旋震蕩或不夠充分。標(biāo)準(zhǔn)品溶解、倍比稀釋時(shí)均需要渦旋震蕩以保證充分混勻。單純依靠移液器反復(fù)吹打，效率較低、效果也不一定最佳。Q2.標(biāo)曲和樣本均不顯色在孵育階段靜置在桌面上，這樣非常不利于抗原抗體之間的充分接觸，導(dǎo)致顯色偏弱，推薦孵育階段，使用ELISA專用的微孔板振蕩器，調(diào)至合適的頻率，使抗原抗體充分接觸

有關(guān)細(xì)胞類型講解2021/08/03: 按培養(yǎng)時(shí)的性質(zhì)分的，貼壁生長(zhǎng)的叫貼附性細(xì)胞。有些細(xì)胞不貼壁，只能懸浮培養(yǎng)，如血細(xì)胞。細(xì)胞類型根據(jù)是否附于支持物上生長(zhǎng)的特性，分為貼附型、懸浮型。貼附型：細(xì)胞貼附在支持物表面生長(zhǎng)，只依賴貼附才能生長(zhǎng)的細(xì)胞叫做貼附型細(xì)胞(Anchorrage-dependentcells)這種現(xiàn)象與細(xì)胞分化有關(guān)。貼附型細(xì)胞的分型：1.成纖維型細(xì)胞:(fibroblast)來(lái)自中胚層特點(diǎn):與體內(nèi)成纖維細(xì)胞形態(tài)相似,胞體梭型或不規(guī)則三角形,中央有圓形核,胞質(zhì)向外伸出2~3個(gè)長(zhǎng)短不同的突起。細(xì)胞在生長(zhǎng)時(shí)呈放射狀,漩渦或火

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果有差異原因分析2021/07/28: 一、數(shù)據(jù)變化趨勢(shì)不符合預(yù)期？通?？蛻粼趯?shí)驗(yàn)前，會(huì)根據(jù)參考文獻(xiàn)或此前實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)測(cè)定結(jié)果，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有一個(gè)預(yù)估變化趨勢(shì)。但是，實(shí)際測(cè)定的數(shù)據(jù)變化有時(shí)卻并不符合預(yù)期。1.先查找實(shí)驗(yàn)技術(shù)問(wèn)題，以及計(jì)算公式和單位有沒(méi)有問(wèn)題；2.再找樣本質(zhì)量有沒(méi)有問(wèn)題；3.若兩者都沒(méi)有問(wèn)題，我們就要思考實(shí)驗(yàn)方案，有時(shí)不符合預(yù)期的結(jié)果反而意味著研究的新意，甚至是新發(fā)現(xiàn)。4.如果選擇了測(cè)定系列指標(biāo)，就可以通過(guò)相關(guān)指標(biāo)的變化趨勢(shì)是否一致，來(lái)判斷該指標(biāo)的變化是否正常，因?yàn)橥瑫r(shí)幾個(gè)相關(guān)指標(biāo)變化都不正常的可能性比較小。二、為什么檢測(cè)

免疫熒光實(shí)驗(yàn)操作指南2021/07/21: 免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。免疫熒光實(shí)驗(yàn)操作步驟：一、固定和透化1.在培養(yǎng)板中將已爬好細(xì)胞的蓋玻片用1×PBS浸洗3次，每次3min。2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min，1×PBS浸洗玻片3次，每次3min。3.0.5%TritonX-10

生化試劑盒的購(gòu)買和使用注意事項(xiàng)2021/07/14: 生化試劑盒的購(gòu)買和使用注意事項(xiàng)：1、、購(gòu)買試劑盒前請(qǐng)弄清以下問(wèn)題：①根據(jù)取樣記錄，確認(rèn)樣品情況。主要包括樣品的種類、數(shù)量和樣品保存狀況。②根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)或文獻(xiàn)報(bào)道，確認(rèn)測(cè)定哪些指標(biāo)。測(cè)定指標(biāo)最好是成系列的，這樣便于得出明確結(jié)論，也好發(fā)表文章。③提前了解所在實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備情況，避免因?yàn)閮x器設(shè)備不能滿足，造成試劑盒購(gòu)買后無(wú)法使用。2、購(gòu)買咨詢：①客戶提供檢測(cè)樣本對(duì)象、研究目的和測(cè)定指標(biāo)，我們提供相關(guān)試劑盒的情況和所需儀器設(shè)備以及自備用品清單，確認(rèn)哪些指標(biāo)客戶能夠通過(guò)購(gòu)買我們的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。②客戶提

詳解細(xì)菌的轉(zhuǎn)化關(guān)鍵過(guò)程2021/07/07: 染色體轉(zhuǎn)化過(guò)程包括有轉(zhuǎn)化能力的染色體DNA片段的吸附、吸收和整合3個(gè)階段。外源DNA首先吸附在細(xì)菌細(xì)胞表面的一些接受位點(diǎn)上。肺炎雙球菌和枯草桿菌等細(xì)胞的接受位點(diǎn)沒(méi)有專一性，它們能吸附同種的DNA，也能吸附大腸桿菌的DNA。流感嗜血桿菌的接受位點(diǎn)則只能吸附近緣細(xì)菌的DNA。DNA在和細(xì)菌剛接觸時(shí)可以被洗去，在穩(wěn)定吸附以后便不能洗去，但還能被核酸酶水解。DNA被細(xì)胞吸收以后便不能被外源的核酸酶水解。能吸附的DNA主要是雙鏈狀態(tài)的，在通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞的吸收過(guò)程中DNA分子轉(zhuǎn)變?yōu)閱捂?，并以這種形式整合

牛棒桿菌PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)說(shuō)明2021/07/01: 樣本采集、存放及運(yùn)輸：1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。組成及試劑配制:1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）2、標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200U/L，1

分享大鼠小鼠五種采血方式2021/06/23: 大鼠小鼠五種采血方式：1.剪尾采血小鼠每次采血量0.1ml，大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚，將鼠頭朝下，鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。擦干尾部，再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm，用試管接流出的血液，同時(shí)自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球壓榨止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠頸部皮膚，輕壓在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，取側(cè)臥位，左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓，使眼球杰出。用眼科彎鑷迅速夾去眼

抗體知識(shí)小課堂2021/06/17: 抗體是一種蛋白質(zhì)，是由漿細(xì)胞產(chǎn)生的。漿細(xì)胞又叫效應(yīng)B細(xì)胞。B細(xì)胞就是B淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞屬于白細(xì)胞。比如體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞，在受到外來(lái)的物質(zhì)，如注射的乙肝疫苗刺激后會(huì)轉(zhuǎn)變分化成為漿細(xì)胞，產(chǎn)生專門針對(duì)乙肝病毒的蛋白質(zhì)。這個(gè)起刺激作用的乙肝病毒就作為抗原，漿細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)就叫抗體。當(dāng)乙肝病毒再次進(jìn)入機(jī)體后或者被別人傳染后，抗體就會(huì)馬上識(shí)別出，就會(huì)做出反應(yīng)，消滅外來(lái)的乙肝病毒，保護(hù)人體不得乙肝。抗體不都是對(duì)人體有保護(hù)作用的，有時(shí)候還會(huì)危及人的生命。比如對(duì)青霉素嚴(yán)重過(guò)敏的病人，第一次接觸青霉素后不會(huì)過(guò)敏

植物蛋白提取試劑操作說(shuō)明2021/06/09: 植物蛋白提取試劑適用于多種植物根，莖，葉及果實(shí)等的新鮮或凍存組織。植物組織成分復(fù)雜，含有較多酚類物質(zhì)、多糖、色素、次生代謝物質(zhì)等，致使植物蛋白質(zhì)的分離提取變得困難和復(fù)雜。本試劑采用優(yōu)化的試劑和程序，能有效提取多種植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，有效去除植物組織所含的多酚、多糖、醌、色素、脂質(zhì)、次生代謝物質(zhì)等干擾蛋白質(zhì)研究的成分，使提取的蛋白質(zhì)處于最-佳的活性狀態(tài)和檢測(cè)狀態(tài)，適應(yīng)于酶學(xué)活性測(cè)定，單向及雙向蛋白電泳，WesternBlot和免疫共沉淀分析等蛋白質(zhì)研究實(shí)驗(yàn)。組成和規(guī)格：無(wú)色透明的提取試

生化試劑質(zhì)量的好壞辨別總結(jié)2021/05/26: 生化試劑質(zhì)量的好壞辨別總結(jié)：1、實(shí)驗(yàn)純（LR，黃標(biāo)簽）：主成分含量高，純度較差，雜質(zhì)含量不做選擇，只適用于一般化學(xué)實(shí)驗(yàn)和合成制備。2、當(dāng)量試劑（3N、4N、5N）：主成分含量分別為99.9%、99.99%、99.999%以上。3、指示劑和染色劑（ID或SR，紫標(biāo)簽）：要求有*的靈敏度。4、光譜純：主要成分純度為99.99%5、質(zhì)量級(jí)別：優(yōu)級(jí)純（GR，綠標(biāo)簽）：主成分含量很高、純度很高，適用于分析和研究工作，有的可作為基準(zhǔn)物質(zhì)。6、分析純（AR，紅標(biāo)簽）：主成分含量很高、純度較高，干擾雜質(zhì)很低，適

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