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上海臻科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第8年
植物精氨酸激酶(AK)ELISA試劑盒該如何操作及計(jì)算?2019/09/06
植物精氨酸激酶(AK)ELISA試劑盒該如何操作及計(jì)算?植物精氨酸激酶(AK)ELISA試劑盒操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌
牛核因子κB(NF-κB)ELISA檢測(cè)試劑盒需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題2019/09/06
牛核因子κB(NF-κB)ELISA檢測(cè)試劑盒需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題有哪些?首先需要注意樣本處理細(xì)節(jié),下面是各種樣本具體處理時(shí)的細(xì)節(jié)。1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS
雞甘油三酯(TG)ELISA試劑盒的使用,新手的你這些可能還不甚了解2019/08/26
雞甘油三酯(TG)ELISA試劑盒的使用,新手的你這些可能還不甚了解1.試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存試劑。實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2.加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本/標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。3.孵育:為防止樣品蒸發(fā)
人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及性能2019/06/14
人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及性能人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。人
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)和操作步驟2019/06/14
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)和操作步驟人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避
為保證小鼠ELISA試劑盒測(cè)量的準(zhǔn)確性,測(cè)量時(shí)要注意了2019/05/21
小鼠ELISA試劑盒定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)刻通常不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯況恰當(dāng)縮短或延伸反響時(shí)刻,及時(shí)判別。在用肉眼判別成果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。此刻酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)品。反響的溫度和時(shí)刻仍是影響顯色的要素。在必定時(shí)刻內(nèi),陰性孔可堅(jiān)持無(wú)色,而陽(yáng)性孔則隨時(shí)刻的延伸而呈色加強(qiáng)。恰當(dāng)提高溫度有助于加快顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中,參加底物后的反響溫度和時(shí)刻應(yīng)按規(guī)則力求。使用過(guò)程中需要注意以下事項(xiàng):1、使用小鼠ELISA試劑盒時(shí)不要吃喝、抽
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作及性能2019/05/15
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作及性能l本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)的含量。l有效期:6個(gè)月l保存條件:2-8℃操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,3
人20-HETE ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及注意事項(xiàng)2019/05/15
人20-HETEELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人20-HETE()捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人20-HETE()呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在
人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒操作步驟以及注意事項(xiàng)2019/05/05
人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒操作步驟及注意事項(xiàng)人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜
萊克多巴胺檢測(cè)試劑盒原理及樣本前處理2019/05/05
萊克多巴胺檢測(cè)試劑盒原理及樣本前處理1.原理萊克多巴胺檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)尿樣、組織、飼料等樣本中的萊克多巴胺(Ractopamine,RAC),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的萊克多巴胺和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗萊克多巴胺抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含萊克多巴胺含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中萊克多巴胺的殘留量。2.樣本前處理2.1樣本處理前須知:
植物擴(kuò)展蛋白(expansins)elisa試劑盒樣本要怎么處理?2019/04/19
植物擴(kuò)展蛋白(expansins)elisa試劑盒樣本要怎么處理?植物樣本通常是根莖葉三個(gè)部分,通常需要?jiǎng)驖{處理。切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。1,對(duì)于樣本要求保持鮮重2,稱取樣本中的重量不小于50mg,一般以1g為基準(zhǔn)3,勻漿的比例選取10%
組織、細(xì)胞到底該如何裂解?2019/03/26
組織、細(xì)胞到底該如何裂解?實(shí)驗(yàn)過(guò)程中難免會(huì)遇到特殊樣本比如組織和細(xì)胞,那我們我們又該如何來(lái)處理呢?常見的處理方法就是用RIPA來(lái)裂解。如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀,請(qǐng)放室溫半小時(shí)或者常溫水浴使沉淀溶解。根據(jù)使用量,取每1mlRIPA加入10ulPMSF,使PMSF的終濃度為1mM,混勻備用(PMSF現(xiàn)用現(xiàn)加)。1、樣品前處理:a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。b)對(duì)
詳談各種酶活檢測(cè)方法2019/03/05
詳談各種酶活檢測(cè)方法通常酶制劑活性的檢測(cè)是采用實(shí)驗(yàn)室分析手段來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià),它可以用來(lái)篩選酶制劑、確定復(fù)合酶制劑的zui佳組方及確定產(chǎn)品的zui佳添加量等,酶制劑實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)技術(shù)是目前飼料廠家應(yīng)用zui為廣泛的一種方法。其操作相對(duì)簡(jiǎn)單,檢測(cè)所用時(shí)間短,便于生產(chǎn)實(shí)踐應(yīng)用。酶活測(cè)定結(jié)果雖不能*反映酶的使用效果,但通過(guò)檢測(cè)至少可以避免使用劣質(zhì)的酶制劑。我國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中已經(jīng)確立了飼用植酸酶(GB/T18634)、纖維素酶(NY/T912)、β-葡聚糖酶(NY/T911)的測(cè)定方法。另外,許多企事業(yè)單位為了生
elisa試劑盒的選購(gòu)參考因素2019/01/25
由于elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn),深受廣大師生朋友的喜愛。而現(xiàn)試劑盒種類頗多,產(chǎn)品的選擇成為了實(shí)驗(yàn)前的重點(diǎn)事項(xiàng)。廠家根據(jù)經(jīng)驗(yàn),建議從這四大因素來(lái)考慮選擇合適的elisa試劑盒。一、檢測(cè)方式如今檢測(cè)ELISA試劑盒有許多途徑,我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶,而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色,可以通過(guò)分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè),堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上,也可以
ELISA試劑盒酶標(biāo)板在什么情況下會(huì)失效?2018/09/14
ELISA試劑盒酶標(biāo)板在什么情況下會(huì)失效?ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在6個(gè)月,如果保存得當(dāng)?shù)脑挘粫?huì)出現(xiàn)問(wèn)題的。但不要反復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的DAS-ELISA檢測(cè)試劑盒等,應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。建議ELISA試劑盒解凍后一次用完。已開封或者使用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,ELISA檢測(cè)試劑盒開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。但要注意的是,如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話,可能會(huì)影響,其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出
ELISA測(cè)定應(yīng)如何操作才正確2018/08/24
ELISA測(cè)定現(xiàn)在通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測(cè)定模式,測(cè)定操作非常簡(jiǎn)單,一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面,其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚?,F(xiàn)分述如下。一、臨床標(biāo)本的收集和保存用于ELISA測(cè)定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清(漿),有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測(cè)目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、
ELISA實(shí)驗(yàn)十八條通用規(guī)則2018/08/24
ELISA實(shí)驗(yàn)十八條通用規(guī)則1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但zui好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中需要注意哪些細(xì)節(jié)2018/08/09
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中需要注意哪些細(xì)節(jié)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)
臻科生物帶你了解ELISA的樣本收集與前期準(zhǔn)備2018/06/21
臻科生物帶你了解ELISA的樣本收集與前期準(zhǔn)備利用ELISA進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。(一)臨床樣本的收集A、血液樣本有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無(wú)法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,
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