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2023
06-16

酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)（ELISPOT）在研究中的應(yīng)用
酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)（ELISPOT）測定由切爾金斯基1983年。ELISPOT測定基于ELISA免疫測定的修改版本并由此發(fā)展而來。它是監(jiān)測人類和動物免疫反應(yīng)的靈敏方法，也是準(zhǔn)確定量分泌細(xì)胞因子的T細(xì)胞或抗體分泌B細(xì)胞的優(yōu)質(zhì)工具。如今，ELISPOT測定被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)研究的各個領(lǐng)域，例如：自身免疫性疾病癌癥研究傳染病疫苗開發(fā)U-CyTechbiosciences是一家生物技術(shù)公司，于1999年與烏得勒支大學(xué)合作成立，位于荷蘭（歐洲）烏得勒支。公司提供不同格式的ELISA，ELISPOT和Fluoro
2023
06-15

溶質(zhì)包封納米顆粒用作遞送系統(tǒng)的綜述，重點(diǎn)是支鏈兩親肽膠囊
phoreusbiotech正在開發(fā)各種策略來改善藥物的遞送和增加藥物的生物半衰期。為了解決這些問題，藥物輸送技術(shù)依賴于不同的納米級分子，包括：脂質(zhì)囊泡、病毒衣殼和納米顆粒。肽是許多這些納米材料的組成部分，并克服了與基于脂質(zhì)或病毒的遞送系統(tǒng)相關(guān)的一些限制，例如可調(diào)性、穩(wěn)定性、特異性、炎癥和抗原性。本綜述側(cè)重于自組裝形成囊泡/膠囊的生物基藥物遞送納米材料的演變。雖然脂質(zhì)囊泡在這些結(jié)構(gòu)中最為突出；基于肽的結(jié)構(gòu)正在出現(xiàn)，特別是肽雙層分隔膠囊。新型生物材料支化兩親肽膠囊(BAPC)顯示出許多理想的特性。
2023
06-15

與分支兩親肽膠囊相關(guān)的質(zhì)粒 DNA 的基因傳遞和免疫調(diào)節(jié)作用
我們最近報道了一類新的支鏈兩親肽，它們與雙鏈DNA結(jié)合并促進(jìn)真核細(xì)胞的體外轉(zhuǎn)染。在本研究中，我們測試了一種不同的配方，其中質(zhì)粒DNA與通過兩個支鏈兩親肽的自組裝形成的預(yù)制20-30nm陽離子膠囊的表面結(jié)合。在這些條件下，帶負(fù)電荷的DNA通過大量靜電相互作用與BranchedAmphiphilicPeptideCapsules(BAPC)的陽離子表面相互作用，生成大小范圍為50至250nm的肽-DNA復(fù)合物。BAPCs-DNA納米顆粒能夠?qū)⒉煌笮〉馁|(zhì)粒DNA遞送到培養(yǎng)的細(xì)胞中，從而產(chǎn)生高轉(zhuǎn)染率和
2023
06-15

支鏈兩親肽膠囊結(jié)構(gòu)、大小和DNA轉(zhuǎn)染效率簡介
支鏈兩親肽膠囊：兩種組成肽的不同比例直接決定不同的雙層結(jié)構(gòu)、大小和DNA轉(zhuǎn)染效率支鏈兩親性肽膠囊（BAPC）是生物衍生的雙層分隔納米囊泡，能夠被各種溶質(zhì)包被或包封。囊泡及其貨物很容易被細(xì)胞吸收，并定位在細(xì)胞的核周區(qū)域。當(dāng)BAPC與DNA混合時，BAPC充當(dāng)陽離子成核中心，DNA圍繞其纏繞。BAPCs-DNA納米顆粒能夠在體內(nèi)和體外遞送質(zhì)粒DNA，產(chǎn)生高轉(zhuǎn)染率和最小的細(xì)胞毒性。BAPC與脂質(zhì)囊泡具有多種生物物理特性。然而，它們在尿素和氯化胍等離液物質(zhì)、陰離子洗滌劑、蛋白酶和高溫（～95°C）的存在
2023
06-15

支鏈兩親性寡肽雙層的組織和結(jié)構(gòu)
最近開發(fā)了一類自組裝支鏈兩親肽膠囊（BAPC），可用作新的藥物遞送載體。BAPCs在組裝過程中可以包封高達(dá)～12kDa的溶質(zhì)，異常穩(wěn)定，并且容易被細(xì)胞毒性低的細(xì)胞吸收。粗粒度模擬支持BAPC由雙層定義，類似于二酰磷脂形成的雙層。在這里，進(jìn)行了原子模擬以表征由三種支鏈兩親性肽（BAP）形成的雙層的結(jié)構(gòu)和組織：雙（AcFLIVIGSII）-K-K4-CO-NH2，雙（Ac-CHA-LIVIGSII）-K-K4-CO-NH2和雙（Ac-FLIVI）-K-K4-CO-NH2。結(jié)果表明，除了疏水側(cè)鏈相互作
2023
06-15

多功能支鏈兩親肽雙層共軛金納米粒子的合成與表征
我們提供強(qiáng)有力的化學(xué)和生物物理證據(jù)，證明已知在溶液中組裝成球形納米組件的支鏈兩親性肽（BAP）確實組裝為肽雙層分隔膠囊。這些納米組件被稱為支鏈兩親性肽膠囊。BAPC被細(xì)胞吸收并積聚在核周區(qū)域以持續(xù)存在而不會明顯降解。BAPCs還捕獲小蛋白質(zhì)和溶質(zhì)，并穩(wěn)定地包封發(fā)射α粒子的放射性核素。我們設(shè)計了一種利用硫醇化學(xué)將這些肽序列偶聯(lián)到金納米顆粒（≤5nm）上的方法，目的是證明這些肽組裝成雙層。肽最初通過與金表面的相互作用組裝成單層半胱氨酸殘基在有機(jī)溶劑中的肽C末端。在過量肽存在下，這些肽單層保護(hù)的金納米
2023
06-14

新生支鏈兩親肽膠囊中的熱誘導(dǎo)構(gòu)象轉(zhuǎn)變
支鏈兩親肽膠囊（BAPC）是生物相容的雙層分隔聚陽離子納米球，在室溫下通過兩種兩親支鏈肽的共組裝自發(fā)形成：雙（FLIVI）-K-K4和雙（FLIVIGSII）-K-K4。BAPC很容易被培養(yǎng)中的細(xì)胞吸收，在那里它們逃逸和/或逃避內(nèi)吞途徑并積聚在核周區(qū)域，在那里持續(xù)存在而不會發(fā)生明顯的降解或外滲。藥物、小蛋白質(zhì)和溶質(zhì)以及發(fā)射放射性核素α粒子被長時間穩(wěn)定封裝。BAPC在室溫下通過梭形過程形成，48小時后觀察到一系列BAPC尺寸，直徑從50nm到幾微米。此前有報道稱，將BAPC從25個冷卻到4個°C然
2023
06-14

細(xì)胞因子詳細(xì)介紹
細(xì)胞因子是一組調(diào)節(jié)蛋白，關(guān)鍵地參與許多生理過程，如免疫識別、細(xì)胞分化和細(xì)胞增殖。它們已經(jīng)在許多脊椎動物物種中被鑒定出來，并由各種不同的細(xì)胞類型產(chǎn)生。細(xì)胞因子通常是短暫和局部產(chǎn)生的，以旁分泌或自分泌方式起作用。它們與每個細(xì)胞因子或細(xì)胞因子組特異性的高親和力細(xì)胞表面受體相互作用，并且在非常低的濃度下具有活性，主要在皮克范圍內(nèi)。現(xiàn)在，抗原特異性免疫應(yīng)答的類型在很大程度上取決于定義的CD4+T輔助細(xì)胞亞群（即Th1和Th2）的選擇或優(yōu)先激活。這些亞群的激活的特征在于分泌不同模式的細(xì)胞因子。h1，但不是T
2023
06-14

酶聯(lián)免疫吸附法在研究中的應(yīng)用
細(xì)胞因子是一組信號蛋白，在免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖和趨化性等各種生理過程中起著至關(guān)重要的作用。細(xì)胞因子由許多脊椎動物物種中的各種細(xì)胞類型產(chǎn)生，并且在非常低的濃度下具有活性，通常在皮克到飛克范圍內(nèi)。細(xì)胞因子通常是瞬時和局部產(chǎn)生的，作用于旁分泌或自分泌，并與細(xì)胞表面受體相互作用，對每個細(xì)胞因子或細(xì)胞因子組具有高親和力。細(xì)胞因子包括趨化因子、干擾素（IFN）、白細(xì)胞介素（IL）和腫瘤壞死因子（TNF）。趨化因子是一類小細(xì)胞因子（分為四個主要亞家族：CC，CXC，CX3C和C），可以介導(dǎo)細(xì)胞之間的化
2023
06-14

T 細(xì)胞 ELISPOT 測定法檢測分泌細(xì)胞的細(xì)胞因子
T細(xì)胞ELISPOT測定T細(xì)胞ELISPOT測定是一種簡單靈敏的免疫測定法，用于在單細(xì)胞水平檢測分泌蛋白質(zhì)的T細(xì)胞。U-CyTech生物科學(xué)提供廣泛的人，猴，小鼠和大鼠T細(xì)胞ELISPOT試劑盒，包括用于檢測細(xì)胞因子或顆粒酶產(chǎn)生細(xì)胞的試劑盒，如IFN-γ，IL-2，IL-4，IL-10，IL-17A，IL-21，GM-CSF，顆粒酶B和TNF-α。這些ELISPOT試劑盒有不同的形式（2板或5板試劑盒），并配有酶著色劑（產(chǎn)生紅點(diǎn)）。猴子試劑盒中的抗體已被驗證可用于檢測各種舊世界猴子的細(xì)胞因子產(chǎn)生
2023
06-14

構(gòu)巢曲霉對支鏈兩親肽膠囊的攝取
支鏈兩親肽膠囊(BAPC)將有效載荷封裝和運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞中的能力提供了遞送活性成分(AI)的新方法。到目前為止，我們發(fā)現(xiàn)BAPC在之前測試過的真核細(xì)胞中是惰性的。然而，已收集到的照片表明，構(gòu)巢曲霉（一種常見的土壤真菌）表現(xiàn)出細(xì)胞內(nèi)攝取并隨后分解BAPC納米顆粒，從而在真菌細(xì)胞內(nèi)釋放包封的染料。圖1.BAPC在構(gòu)巢曲霉中分解，在真菌細(xì)胞內(nèi)釋放封裝的染料。實驗旨在優(yōu)化殺真菌劑向該真菌物種的遞送。在后續(xù)實驗中，觀察到BAPC可以包裹和遞送殺菌劑硫脲。當(dāng)發(fā)現(xiàn)在曲霉菌擴(kuò)散的牛奶平板上時，包封BAPC的硫脲顯示
2023
06-13

GEMINI O2 和 CO2 監(jiān)測儀進(jìn)行代謝監(jiān)測
介紹使用間接量熱法測量實驗動物的能量消耗、耗氧量(VO2)和二氧化碳生成量(VCO2)的歷史由來已久。包括人類在內(nèi)的大型動物可以方便地使用帶有用于流量測量的呼吸機(jī)和用于氣體分析儀的采樣端口的貼合面罩進(jìn)行監(jiān)測。對于嚙齒動物等較小的動物，這種方法很難或不可能成功實施，因此改用代謝室。代謝室可以是任何具有一個入口和一個出口的密封外殼（見圖1）。新鮮空氣(Vi)以已知流速流過腔室，因此動物從該氣流中吸氣并呼氣。由于動物通過代謝活動既消耗O2又產(chǎn)生CO2，因此腔室出口氣體將具有減少的O2分?jǐn)?shù)(FoO2)和
2023
06-13

小動物的機(jī)械通氣策略
許多臨床前或基礎(chǔ)研究需要對小型實驗動物進(jìn)行長期機(jī)械通氣，如果沒有合適的呼吸機(jī)，這可能具有挑戰(zhàn)性。CWE有一個解決方案，我們的SAR-1000高級小動物呼吸機(jī)。雖然正壓通氣的原理很簡單，但通常證明很難在不引起呼吸機(jī)引起的肺損傷（VILI）和伴隨的生理狀態(tài)退化的情況下維持小動物（尤其是小鼠）超過幾個小時。此處的評論提供了一些指南，以在長時間使用呼吸機(jī)期間成功保持動物健康。這些建議主要針對小鼠，但適用于所有小型實驗室哺乳動物。CWE的SAR-1000小動物呼吸機(jī)專門設(shè)計用于在長期和短期手術(shù)中安全有效地
2023
06-13

生理監(jiān)測：呼氣
在我們新的生理監(jiān)測系列的第一部分中，我們想研究為什么在實驗室實驗中測量呼出的空氣如此重要。當(dāng)然，最初的原因包括提高小動物的手術(shù)生存能力和在手術(shù)過程中驗證呼吸狀態(tài)，但呼吸氣體監(jiān)測的積極影響甚至更遠(yuǎn)。CWE的呼吸氣體分析儀系列提供特色，流線型（確切地說是側(cè)流）且易于使用的設(shè)備，用于測量從小鼠到人類，從海豚到大象的各種應(yīng)用中的潮氣末CO2和O2;包括缺氧和呼吸控制研究，小鼠，大鼠和大型動物的一般手術(shù)，海洋哺乳動物的研究等。但這還不是全部...常規(guī)CO2測量的一些好處是：驗證氣管插管是否正確（避免食管插
2023
06-13

1 臺 CWE 呼吸機(jī)同時為多達(dá) 5 只動物通風(fēng)
您是否知道，使用正確的附件，CWESAR-1000或SAR-830/AP呼吸機(jī)可以從1臺動物呼吸機(jī)轉(zhuǎn)變?yōu)?、3、4或5臺動物呼吸機(jī)？下面的圖表相關(guān)附件說明了使用一臺SAR-1000呼吸機(jī)在任何地方為1到5只嚙齒動物通風(fēng)所需的一切。在使用中，SAR-1000（或SAR-830/AP）用作動物#1呼吸機(jī)，您可以在其中設(shè)置所需的潮氣量、轉(zhuǎn)速、分鐘通氣量等。設(shè)置完成后，將顯示的流速“復(fù)制”到EFM-4流量計。然后，額外的動物#2-#5將連接到控制呼吸機(jī)，并具有相同的體積，速率等。
2023
06-13

CWE 的 SAR-1000 呼吸機(jī)用于密蘇里大學(xué)的 ALS 研究
“支鏈淀粉側(cè)索硬化癥（ALS）是一種毀滅性的疾病，導(dǎo)致進(jìn)行性運(yùn)動神經(jīng)元變性和通氣衰竭死亡。密蘇里大學(xué)研究員NicoleNichols博士加入了對ALS治療和最終治愈的全球搜索，使用CWE的SAR-1000高級小動物呼吸機(jī)和CapStar-100潮氣末CO2分析儀來研究ALS和運(yùn)動神經(jīng)元疾病的機(jī)制。最近發(fā)表在2018年10月15日版《華爾街日報》上的一篇論文神經(jīng)以Nichol博士對吞咽困難（吞咽困難）及其與ALS的關(guān)系的研究為中心。第二篇文章發(fā)表在2018年10月版的呼吸與生理學(xué)與神經(jīng)生物學(xué)雜志專
2023
06-12

可生物降解藥物遞送肽納米膠囊
長期以來，納米粒子的研究總是需要某種程度的權(quán)衡。納米載體可能有效轉(zhuǎn)染，但對細(xì)胞有毒。其他人可能不會引起免疫反應(yīng)，但由于缺乏生物降解性，會隨著時間的推移在環(huán)境中積聚。BAPC不僅克服了現(xiàn)有納米載體的所有問題，而且提供了一定程度的定制，使它們成為幾乎任何應(yīng)用的選擇。支鏈兩親肽膠囊（BAPC）是一種高效的運(yùn)輸系統(tǒng)，可以輸送核酸、小蛋白和溶質(zhì)。BAPC的分解能力對于它們作為人類和農(nóng)業(yè)應(yīng)用的運(yùn)載工具的采用至關(guān)重要。然而，到目前為止，BAPCs被證明對哺乳動物的降解系統(tǒng)是惰性的。在這里，我們使用BAPCs封
2023
06-12

支鏈兩親肽膠囊：細(xì)胞攝取和保留包封溶質(zhì)
支鏈兩親性肽膠囊（BAPC）是由兩個支鏈肽序列bis（FLIVI）-K-KKKK和bis（FLIVIGSII）-K-KKKK的等摩爾比例組成的肽納米球，它們自組裝形成雙層分隔膠囊。在最近的兩篇出版物中，我們描述了BAPC的脂質(zhì)類似特征，檢查了它們的初始組裝，融合方式，溶質(zhì)包封和調(diào)整大小，并描述了它們通過在4°C下儲存來保持特定尺寸的能力。在本報告中，我們描述了穩(wěn)定性、尺寸限制BAPC在體內(nèi)的包封，細(xì)胞定位，保留和生物分布。我們的構(gòu)建體能夠保留發(fā)射α粒子的放射性核素而沒有任何明顯的泄漏，并且它們在
2023
06-12

支鏈寡肽形成具有脂質(zhì)囊泡特性的納米膠囊
混合支鏈肽組裝的特殊性質(zhì)，其中等摩爾雙（FLIVI）-K-KKKK和雙（FLIVIGSII）-K-KKKK自締形成能夠捕獲溶質(zhì)的雙層分隔膠囊。這些聚陽離子囊泡樣膠囊很容易被培養(yǎng)物中的上皮細(xì)胞吸收，逃逸或逃避內(nèi)吞途徑，并積聚在核周區(qū)域，在那里它們持續(xù)存在而沒有任何明顯的降解。在本報告中，我們研究了該系統(tǒng)的脂質(zhì)特性，包括初始組裝;溶質(zhì)封裝和洗滌;通過具有一定孔徑的聚碳酸酯過濾器進(jìn)行膜擠出進(jìn)行融合和調(diào)整尺寸。調(diào)整大小的肽膠囊在nm尺寸范圍內(nèi)具有均勻的直徑。調(diào)整大小后，膠囊可以通過將其儲存在4°C來保持
2023
06-12

由支鏈兩親性肽自組裝形成的肽納米囊泡
基于肽的包裝系統(tǒng)作為更安全的藥物輸送系統(tǒng)顯示出巨大的潛力。它們克服了與基于脂質(zhì)或病毒遞送系統(tǒng)相關(guān)的穩(wěn)定性、特異性、炎癥、抗原性和調(diào)諧能力方面的問題。在這里，我們描述了一組15和23殘基支鏈兩親性肽，它們在分子結(jié)構(gòu)中模仿磷酸甘油酯。這些肽經(jīng)歷超分子自組裝，并形成溶劑填充的雙層分隔球體，直徑為50-200nm，經(jīng)TEM，STEM和DLS證實。雖然弱疏水力驅(qū)動和維持脂質(zhì)雙層組裝，但這些全肽結(jié)構(gòu)通過疏水相互作用和氫鍵潛在地穩(wěn)定，并且在低微摩爾濃度和較高溫度下保持完整。缺乏分支點(diǎn)的線性肽沒有自組裝特性。我

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