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流式細胞增殖-實驗原理介紹2022/08/17

技術(shù)原理EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2'-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面，EdU上的乙炔基能與熒光標記的小分子疊氮化物探針(如AzideAlexaFluor488、AzideAlexaFluor555、AzideAlexaFluor594、AzideAlexaFluor647等)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反

細胞克隆實驗原理介紹2022/08/17

技術(shù)原理：細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數(shù)，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞?？寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀。實驗方法Step1：細胞培養(yǎng)Step2：轉(zhuǎn)染或藥物處理Step3：細胞收集Step4：計數(shù)種板Step5：染色檢測結(jié)果展示實驗周期及交付標準1.實驗周期：2-3周，具體示工作量而定。2.交付標準：克隆形成圖片、計數(shù)結(jié)果、柱狀圖、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）

細胞凋亡檢測實驗原理2022/08/17

技術(shù)原理細胞凋亡是細胞的基本特征，在機體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。在正常的活細胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine，PS）位于細胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細胞中，PS從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面，暴露在細胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36kDa的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合，可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。碘化丙啶（PropidiumIodide，PI）用

細胞自噬實驗原理介紹2022/08/17

技術(shù)原理自噬是一個吞噬自身細胞質(zhì)蛋白或細胞器并使其包被進入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過程，藉此實現(xiàn)細胞本身的代謝需要和某些細胞器的更新。標記及追蹤LC3以及自噬流的變化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白，而mRFP是穩(wěn)定的熒光表達基團，不受外界影響。由于自噬小體進入第二階段后，與溶酶體進行融合，形成自噬溶酶體。自噬溶酶體由于溶酶體內(nèi)部的酸性環(huán)境，可以導(dǎo)致PH下降，GFP淬滅，因此，GFP的減弱可指示自噬溶酶體形成的順利程度，GFP越少，則從自噬小體到自噬溶酶體階段流

siRNA合成與驗證-RNAi干擾實驗2022/08/16

RNAiRNA干擾（RNAinterference，RNAi）是一種特異的基因缺失性研究工具，是AndrewFire和CraigMello在線蟲中發(fā)現(xiàn)的一種由雙鏈RNA（dsRNA）介導(dǎo)的基因沉默現(xiàn)象，幾乎存在于所有真核生物中。RNAi已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各種真核生物的基因功能研究，藥靶發(fā)現(xiàn)及藥物篩選。結(jié)果展示實驗周期及交付標準1.實驗周期：2-4周2.交付標準：siRNA需確認的信息1.基因的種屬及ID號2.基因序列

質(zhì)粒構(gòu)建-基因克隆實驗介紹2022/08/16

基因克隆基因ORF或者干擾序列表達質(zhì)粒是現(xiàn)代分子生物學(xué)常用的研究工具。但也因為常規(guī)亞克隆方法比較麻煩且耗時，給科研人員造成了很多不便。開發(fā)并完善了的亞克隆方法--SpeedyCloneTM，讓客戶體驗速克隆法，快3天拿到目標質(zhì)粒。實驗流程我們的優(yōu)勢：1、SpeedyCloneTM系統(tǒng)，讓您的亞克隆速完成；2、人類全基因組15000個ORFcDNA文庫，可以瞬間完成基因調(diào)取；3、超全的質(zhì)?，F(xiàn)貨庫，CNSTOPHOT基因現(xiàn)貨質(zhì)粒，滿足您對質(zhì)粒多樣化的需求；4、真核/原核表達載體，慢病毒載體，腺病毒載

穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株相關(guān)實驗介紹2022/08/16

穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株在宿主細胞中過表達或者沉默該基因，使該基因在宿主細胞中可長時間的穩(wěn)定表達，然后對目的基因進行一些列的功能研究。結(jié)果展示細胞侵染圖片WB/QPCR驗證結(jié)果實驗周期及交付標準1.實驗周期：3-6月2.交付標準：穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株、驗證結(jié)果、侵染熒光圖片、測序驗證結(jié)果、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）需確認的信息1.需穩(wěn)轉(zhuǎn)的細胞株2.基因種屬及ID號3.基因序列信息

慢病毒包裝實驗原理介紹2022/08/16

慢病毒包裝慢病毒（Lentivirus）載體是以HIV-1（人類免疫缺陷I型病毒）為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體。區(qū)別一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。在眾多基因操作工具中，慢病毒擁有四項巨大優(yōu)勢1.宿主基因組整合率高，外源基因表達時間長2.侵染細胞類型眾多，應(yīng)用廣泛3.在基因過表達以及干擾兩方面都具有很強的適用性4.構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的工具結(jié)果展示不稀釋同濃度的慢病感染效果實驗周期及交付標準1.實驗周期：2-6周2.交付標準：測序驗證結(jié)果、慢病毒、實驗報告（實驗步驟、試劑

qPCR-實時熒光定量PCR探針法與染料法的優(yōu)缺點2022/08/16

qPCR即實時熒光定量PCR，就是在PCR的擴增過程中，通過熒光的信號，對PCR的進程進行實時的定性、定量檢測。探針法與染料法的優(yōu)缺點1.探針法通過探針可以增加反應(yīng)收集信號的特異性，只有探針結(jié)合的片段上發(fā)生擴增才能收集到信號，能夠用多重體系反應(yīng)的方法，能夠預(yù)測和提前進行反應(yīng)條件的優(yōu)化，缺點是要合成探針，成本高，周期長。2.染料法經(jīng)濟實惠，可以做溶解曲線，分析全部PCR產(chǎn)物的TM值，缺點就是特異性沒有探針法好。結(jié)果展示實驗周期及交付標準實驗周期：1-2周交付標準：擴增曲線、溶解曲線、Ct值、引物、

免疫組化-石蠟/冰凍切片免疫組化實驗介紹2022/08/11

免疫組化免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及相對定量的研究，稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。實驗流程結(jié)果展示實驗完成周期及交付標準1.實驗周期：2-3周2.交付標準：蠟塊、切片、染色圖片、柱狀圖、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）需確認的信

病理染色-HE染色介紹2022/08/11

HE染色HE染色法為石蠟切片技術(shù)里常用的染色法。蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實驗流程結(jié)果展示肺卵巢實驗完成周期及交付標準1.實驗周期：2-3周2.交付標準：蠟塊、切片、染色圖片、實驗報告（試劑、儀器、材料等）需確認的信息1.樣本種屬2.樣本類型4.拍照要求

免疫熒光-石蠟/冰凍切片免疫熒光實驗介紹2022/08/11

免疫熒光技術(shù)又稱為熒光抗體技術(shù)，將熒光標記技術(shù)和免疫學(xué)方法結(jié)合起來，利用抗原抗體相互作用從而對組織或細胞內(nèi)的抗原或抗體物質(zhì)進行定位、示蹤、定性以及相對定量等。實驗流程結(jié)果展示實驗完成周期及交付標準1.實驗周期：2-3周2.交付標準：蠟塊、切片、熒光圖片、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）需確認的信息1.是做石蠟切片還是冰凍切片2.樣本的種屬和類型，是組織還是細胞？3.樣本的數(shù)量4.拍照要求

蛋白互作-免疫共沉淀（ Co-IP）實驗原理介紹2022/08/11

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）：蛋白質(zhì)是細胞活性和功能的執(zhí)行者，且蛋白質(zhì)是依靠蛋白間相互作用執(zhí)行功能的，因而研究蛋白的相互作用對于研究細胞活性和功能、解釋生命過程和現(xiàn)象具有重要意義。實驗原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是研究蛋白-蛋白間相互作用的經(jīng)典方法，屬于免疫沉淀技術(shù)的一類，常被用于鑒定特定蛋白復(fù)合物的中未知蛋白組分。免疫共沉淀的設(shè)計理念是，假設(shè)一種已知蛋白是某個大的蛋白復(fù)合物的組成成員，那么利用這種蛋白的特異性

動物實驗服務(wù)-腫瘤動物模型介紹2022/08/11

腫瘤動物模型裸鼠皮下成瘤實驗裸鼠腫瘤模型無胸腺裸鼠（NudeMouse，簡稱裸鼠）目已成為醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究域中*的實驗動物模型，它是先天性胸腺缺陷的突變小鼠，裸鼠接種成活的腫瘤對化療藥物的敏感性與臨床所見十分相近。根據(jù)腫瘤細胞的特性和接種細胞的量，一般皮下成瘤的周期為1-2個月。腫瘤大小測量一般為1周兩次，游標卡尺測量腫瘤長和短部位，腫瘤不宜生長過大，一般不要超過1000mm3。常見案例PDTX模型患者來源的腫瘤異種移植模型(patient-derivedtumorxenograftmodel,P

線粒體組學(xué)－細胞ATP含量檢測實驗介紹2022/08/10

技術(shù)原理乳酸脫氫酶肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸，生成磷酸肌酸，用磷鉬酸比色法進行檢測。實驗方法Step1：細胞培養(yǎng)Step2：轉(zhuǎn)染或藥物處理Step3：細胞收集Step4：試劑盒檢測案例展示實驗周期及交付標準1.實驗周期：2-3周2.交付標準：完整實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）需確認的信息1.樣本種屬及類型（組織或細胞）2.樣本數(shù)量3.是否提供探針

線粒體組學(xué)－線粒體膜電位檢測實驗介紹2022/08/10

技術(shù)原理JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光（Ex=585nm,Em=590nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514nm,Em=529nm）。JC-1不僅可用于定性檢測，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測

線粒體組學(xué)－線粒體形態(tài)學(xué)檢測電鏡實驗介紹2022/08/10

線粒體線粒體是細胞生成ATP的主要地點，是促進細胞能量轉(zhuǎn)換、參與細胞凋亡的重要細胞器。實驗方法Step1：細胞培養(yǎng)Step2：轉(zhuǎn)染或藥物處理Step3：細胞收集Step4：電鏡檢測結(jié)果展示實驗周期及交付標準1.實驗周期：1個月左右2.交付標準：透射電鏡圖片、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）需確認的信息1.樣本的種屬及類型（組織還是細胞）2.樣本的數(shù)量3.拍照要求以及分析要求

外泌體研究實驗介紹2022/08/10

外泌體外泌體是多泡體限制性膜與細胞質(zhì)膜融合而釋放的脂質(zhì)雙層膜囊泡，直徑約30～200nm，電子顯微鏡下呈雙凹碟形或杯狀，外泌體能夠運載其內(nèi)源性的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸、miRNA等信息物質(zhì)參與細胞間通訊和機體的生理代謝過程，被認為是細胞間通訊、疾病診斷和預(yù)后循環(huán)生物標志物的重要載體，在臨床診斷和治療方面展現(xiàn)出了具景的研究價值。外泌體通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學(xué)活性，從而參與機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等生物學(xué)過程。外泌體的負富集分離外泌體在大小、來源

流式表面抗原檢測技術(shù)原理介紹2022/08/10

流式細胞檢測實驗原理流式細胞術(shù)（Flowcytometry，F(xiàn)CM）是一種在液體系統(tǒng)中，可快速測定單個細胞或細胞器的生物學(xué)性質(zhì)，并把特定的細胞或細胞器從群體中加以分類收集的技術(shù)。其特點是通過快速測定庫爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來定量測定細胞DNA含量、細胞體積、蛋白質(zhì)含量、酶活性、細胞膜受體和表面抗原等許多重要參數(shù)。根據(jù)這些參數(shù)將不同性質(zhì)的細胞分開，以獲得供生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究用的純細胞群體。流式細胞儀器介紹規(guī)格型號：ATTUNENXT激光：（藍色，紅色）可支持染料：FITC,AlexaFluo

蛋白定量-Label-Free非標定量實驗流程介紹2022/08/09

非標定量（Label-free）非標記定量(label-free)蛋白質(zhì)組學(xué)按其原理主要分為兩種方法：1)Spectrumcounts類的非標記定量方法：發(fā)展比較早，已經(jīng)形成多種定量算法，但主要原理都是以MS2的鑒定結(jié)果為定量基礎(chǔ)，各種方法的差別在于后期算法在大規(guī)模數(shù)據(jù)上的修正。2)以MS1為基礎(chǔ)，計算每個肽段的信號強度在LC-MS色譜上的積分，Maxquant是現(xiàn)代高靈敏度質(zhì)譜(Highresolutionofmodernspectrometers)結(jié)果的分析軟件，已經(jīng)漸漸成為蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域內(nèi)