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上海創(chuàng)凌生物科技有限公司
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SILAC+IP-MS-蛋白質互作定量分析整體服務2019/12/26
SILAC+IP-MS-蛋白質互作定量分析整體服務簡介:利用IP純化蛋白質復合物時,除了能捕獲到Target蛋白及其互作蛋白之外,細胞中一些與抗體/抗體偶聯(lián)材料(agarose、magneticbeads等)高親和的蛋白質也會被一起捕獲下來(非特異性粘附蛋白),并且這些蛋白都是高豐度的。故而,在后續(xù)的LC-MS鑒定時,這些非特性的蛋白質會被高頻率的檢測到。這就帶來了一個很困擾的問題:由于沒有定量信息,在眾多鑒定到的蛋白質中,如何才能排除非特性的粘附蛋白,找出真正的、與target特異性互作的蛋白
IP-MS 蛋白質互作/后修飾整體服務2019/12/26
IP-MS蛋白質互作/后修飾整體服務簡介:蛋白質相互作用(Protein-ProteinInteractions,PPIs)和翻譯后修飾(Post-TranslationalModifications,PTMs)的數(shù)據(jù)是能顯著提高基礎類研究文章檔次的*內容。篩選和發(fā)現(xiàn)目的蛋白(target)在細胞中新的互作蛋白或者新的后修飾,免疫沉淀(IP,Immunoprecipitation)結合LC-MS(液相色譜-質譜連用,蛋白質組學研究的核心工具)是目前的主流技術方案(IP-MS)。通過一次IP-MS
Label-free-定量蛋白質組學分析服務2019/12/26
Label-free-定量蛋白質組學分析服務簡介:與SILAC、iTRAQ/TMT等標記技術不同,Label-free不需要對蛋白質樣品進行任何標記處理,只要將蛋白質用trypsin酶解成肽段,進行LC-MS測試分析即可。label-free能保持樣品的“真實性”;原則上,label-free能分析無限多個樣品,其通量要遠高于SILAC、iTRAQ/TMT等標記技術,是真正的高通量蛋白質分析技術。但是其也有本身的缺陷,即(1)對LC-MS的穩(wěn)定性要求*;(2)每個樣品至少要做3次技術重復或者生物
iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服務2019/12/26
一、iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服務簡介:iTRAQ(IsobaricTagforRelativeandAbsoluteQuantitation)和TMT(TandemMassTag)分別是由ABSCIEX和ThermoScientific公司分別開發(fā)的、對trypsin酶解肽段進行標記的試劑盒。標記肽段通過LC-MS,能同時實現(xiàn)對蛋白質的鑒定和對蛋白質的相對定量分析。iTRAQ和TMT的技術原理*一樣,區(qū)別在于:(1)生產(chǎn)商不同;(2)分子結構稍有差異;(3)標記通量有差異。iTRAQ
SILAC-exosome定量分析服務2019/12/26
一、簡介:Exosome(外泌體)是具有脂質雙層膜結構、直徑約為30-150nm、密度在1.13-1.21g/ml的膜性囊泡。在exosome的囊泡結構中含有細胞來源相關的蛋白質、核酸、脂質和小分子等物質,能作為信號分子傳遞給其他細胞以進行細胞間通訊。研究發(fā)現(xiàn)exosome在眾多生理、病理過程中發(fā)揮著著重要作用。鑒于不同細胞分泌的exosome具有不用的組成成分和功能,故而exosome有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用,此外,基于exosome的膜性結構,亦可作為靶向藥物的載體進行疾病治療。E
SILAC-細胞差異蛋白質組分析服務2019/12/25
一、簡介SILAC(StableIsotopeLabelingwithAminoacidsinCellculture)是基于哺乳動物細胞生長對“必需氨基酸”的依賴原理,將穩(wěn)定同位素(13C、15N)標記的Lys(K)和Arg(R)加入細胞培養(yǎng)基中對細胞進行培養(yǎng)。在細胞的增殖過程中,穩(wěn)定同位素標記的K和R自然“摻入”到蛋白質中,從而在細胞中所有的蛋白質上引入了質量標簽(MassTag,3-10Da)。借助后續(xù)MS的高分辨率,在MS層面上,實現(xiàn)對蛋白質水平進行高精度定量的技術。SILAC技術基本的應
蛋白質LC-MS鑒定服務2019/12/25
技術服務簡介LC-MS(液相色譜-質譜連用)技術是目前對未知蛋白質樣品進行高通量鑒定分析的核心儀器。利用LC-MS實現(xiàn)對未知樣品中蛋白質的定性分析,確定樣品中具體有那些蛋白質,從而便于研究者發(fā)現(xiàn)和篩選目標分子。適用于Co-IP、pull-down(DNA、RNA、蛋白質)等方法純化的蛋白質復合物,可以直接以液體的方式進行后續(xù)LC-MS分析。適用SDS-PAGE分離的Co-IP、pull-down(DNA、RNA、蛋白質)等方法純化的蛋白質復合物,切割膠條,進行膠內酶解,后進行LC-MS分析。其他
多克隆抗體制備技術服務2019/12/25
技術服務介紹多克隆抗體是多個B淋巴細胞產(chǎn)生的多個免疫球蛋白的集合,可利用抗原免疫宿主得到。多克隆抗體可以識別同-抗原上的多個表位,與單克隆抗體相比有更好的親和力和更快的結合能力。創(chuàng)凌生物提供多克隆抗體生產(chǎn)服務。服務內容包括抗原生產(chǎn)(多肽或蛋白抗原),抗體制備,抗體標記等,可根據(jù)自己的需求選擇適合自己的實驗方案。技術服務實驗流程:多抗制備實驗方案(3-4個月)合成抗原多肽并進行偶聯(lián)得到抗原:根據(jù)客戶需要量定期配佐劑(*和不*福氏佐劑)各免疫2只新西蘭白兔(皮下多點注射四次)頸動脈放血收集血清;Pr
單克隆抗體定制服務2019/12/25
技術服務介紹上海創(chuàng)凌生物為您提供專業(yè)的單克隆抗體制備服務,包括抗原制備,細胞融合篩選,亞克隆,單抗制備等。我們根據(jù)抗原性質、數(shù)量純度,選擇佳的免疫方案;并通過HAT選擇培養(yǎng)基篩選融合細胞,并對融合細胞進行ELISA陽性篩選及亞克隆;篩選出的陽性單克隆,取腹水,用ProteinAG抗體純化柱純化抗體。創(chuàng)凌會為您定制適用您下游應用的方案并交付高質量的單克隆抗體,交付的單抗可以用于免疫組化、ELISA、體外診斷檢測等下游實驗。技術服務流程:抗原制備(可選)免疫;雜交瘤細胞株構建;亞克?。桓顾囵B(yǎng);抗體
免疫共沉淀生物技術服務2019/12/25
服務簡介免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究兩種蛋白質相互作用的有效方法。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合,也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔,已成為研究蛋白質相互作用的經(jīng)典方法。當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在argarosebeads上的蛋白質A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內結合的蛋白質B也能一起沉淀下來。再通過
染色質免疫共沉淀(ChIP)2019/12/23
染色質免疫沉淀技術服務簡介染色質免疫沉淀技術(ChromatinImmunoprecipitation,簡稱ChIP)是研究體內蛋白質與DNA相互作用的一種技術。在生理狀態(tài)下把細胞內的DNA與蛋白質交聯(lián)在一起,通過超聲或酶處理將染色質切為小片段后,利用抗原抗體的特異性識別反應,將與目的蛋白相結合的DNA片段沉淀下來。染色質免疫沉淀技術服務價格與周期服務項目內容價格(元)服務周期ChIP樣品進行破碎裂解,進行免疫沉淀和DNA的熒光定量PCR詢價4-5周染色質免疫沉淀技術服務內容獨立交聯(lián)的染色質,超
WB蛋白免疫印跡技術服務2019/12/23
服務簡介蛋白免疫印跡(WesternBlot)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。是將經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后的細胞或組織總蛋白從凝膠轉移到固相支持物(NC膜或PVDF膜)上,用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。WesternBlot服務價格與周期服務編號服務項目內容周期LC1037蛋白質抽提50/樣1周蛋白含量測定10/樣3-5天SDS-PAGE檢測200/樣1周WesternBlot檢測(含
ELISA酶聯(lián)免疫反應檢測服務2019/12/23
ELISA服務簡介ELISA是指以酶作為標記物、以抗原和抗體之間免疫結合反應為基礎的固相吸附測定方法。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物
Tunel凋亡檢測實驗服務2019/12/23
技術原理晚期凋亡細胞中染色體DNA雙鏈或單鏈斷裂產(chǎn)生粘性3'-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的催化下,將帶有熒光素分子的dUTP標記到DNA的3'-末端,然后通過熒光顯微鏡觀察、或進而用帶有HRP的一抗染色后DAB顯色,可以進行凋亡細胞的檢測,該實驗稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling,TUNEL)。Tunel檢測可以標記組織細胞中發(fā)生凋亡的細胞,通
免疫熒光細胞化學技術服務2019/12/23
服務介紹免疫熒光細胞化學是根據(jù)抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量技術測定含量。實驗原理及流程將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微
免疫組化技術與原理2019/12/20
技術原理抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性,免疫組織化學正是利用了這一原理,利用特異性的抗體探測組織或細胞中的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來,以其達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性,定位或定量的研究。免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性的研究。服務內容提供免疫組織化學(IHC
油紅O染色技術服務2019/12/20
技術服務介紹油紅O對脂滴的染色機制一般認為是物理學上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂質染色,即油紅O先溶于60%異丙醇中,然后切片浸入油紅O染液中時,油紅O在組織脂質的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,所以在染色時油紅O從60%異丙醇中轉移入脂質中使脂滴顯示紅色。細胞周圍在鏡下呈現(xiàn)空泡時,究竟是水樣變性、糖原,還是被溶解的脂肪?就需要用脂質染色來幫助鑒別診斷,如脂肪瘤或脂肪肉瘤,脂肪染色呈陽性。腎的透明細胞癌,在癌細胞胞質透亮,但脂肪染色為陰性。腎上腺皮脂腺瘤質染色也為陽性。動脈粥樣硬化時,
特殊染色免疫細胞化學技術2019/12/20
技術服務介紹免疫組織化學技術又稱免疫細胞化學技術,是利用特異性抗原抗體結合性質定量檢測化學物質的技術。應用免疫學基本原理--抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。軟組織腫瘤類型很多,由于普通病理切片還不能確定是哪種類型的腫瘤,因此通過一些特異性表達某種腫瘤的抗體進行標記,有望獲得明確的病理診斷,所以要借助于免疫組化及特殊染色。上海創(chuàng)凌生物可提供以下染色相關
Masson染色技術服務2019/12/20
Masson染色技術服務?介紹Masson染色(麗春紅酸性品紅-苯胺藍染色),是用于檢測動物組織中膠原纖維的一種染色方法之一,能夠將膠原纖維染成藍色,肌纖維、和紅細胞呈紅色,可用于鑒膠原纖維和肌纖維;并顯示各種組織膠原纖維含量及纖維化程度。實驗原理1.膠原纖維是人體中的結締組織的主要成分,分布在全身的各個部位,組成膠原纖維的主要成分是膠原蛋白。新鮮時呈白色,故一般稱為白色纖維。在HE染色中被染為淡紅色。它的性質是具有韌性及緊固性,因此它能夠抵抗的牽拉力而不至于撕裂或拉斷它們常聚集成粗細不等的束,
石蠟切片HE染色技術服務2019/12/20
技術服務介紹蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining),簡稱HE染色法,石蠟切片技術里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中基本、使用廣泛的技術方法。服務流程(1)樣本接收:石蠟切片、細胞爬片、冰凍切片。(2)實驗步驟:脫蠟至水—伊紅染色—染核(3)實驗結果:染色好的玻片客戶需知1、注意細胞核的分化程度;2、注意蘇木素和
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