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季銨鹽類消毒劑是什么2022/11/22
季銨鹽類消毒劑是什么?季銨化合物廣泛用作消毒劑。季銨鹽是較好的清潔劑,但高硬度的水和棉和紗布墊等材料會使它們的殺菌性降低,因為不溶性沉淀物或棉布和紗布墊分別吸收了活性成分。季銨化合物與其他幾種消毒劑(例如酚類物質(zhì)、碘伏)一樣,革蘭氏陰性菌可以在其中存活或生長。季銨化合物消毒劑的化學性質(zhì)在化學上,季銨鹽是有機取代的銨化合物,其中氮原子的化合價為5,其中四個取代基(R1-R4)是給定大小或鏈長的烷基或雜環(huán)基,第五個(X-)是鹵化物、硫酸鹽或類似的自由基.每種化合物都表現(xiàn)出自己的抗菌特性,因此需要尋找
過氧化氫消毒液的應用2022/11/22
過氧化氫消毒液的消毒原理:過氧化氫的作用是產(chǎn)生破壞性的羥基自由基,這些自由基可以攻擊膜脂、DNA和其他基本細胞成分。由具有細胞色素系統(tǒng)的需氧生物和兼性厭氧菌產(chǎn)生的過氧化氫酶可以通過將過氧化氫降解為水和氧氣來保護細胞免受代謝產(chǎn)生的過氧化氫的影響。過氧化氫消毒液的滅菌活性:過氧化氫對多種微生物具有活性,包括細菌、酵母菌、真菌、病毒和孢子。0.5%的加速過氧化氫在1分鐘內(nèi)表現(xiàn)出殺菌和殺病毒活性,在5分鐘內(nèi)表現(xiàn)出殺分枝桿菌和殺真菌活性。尿液中過氧化氫的殺菌效果和穩(wěn)定性已被證明可對抗多種與醫(yī)療保健相關的病
細胞傳代的步驟-貼壁細胞傳代培養(yǎng)步驟2022/11/22
傳代培養(yǎng)是細胞培養(yǎng)常規(guī)保種方法之一,也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋,分種成多瓶,細胞才能繼續(xù)生長。這一過程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行,每一步都需要認真仔細的無菌操作。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。本實驗以傳代大鼠骨髓充間質(zhì)干細胞為例進行細胞傳代的步驟做一介紹。一、傳代前準備實驗開始前,將無菌培養(yǎng)瓶、15ml離心管、移液管、槍頭等放入無菌超凈工作臺,紫外線照射30min,以進行工作臺的消
多克隆抗體和單克隆抗體之間的主要區(qū)別及應用2022/11/21
什么是單克隆抗體?單克隆抗體定義:與靶抗原上的特定表位結(jié)合的一種(單一)抗體構成單克隆抗體。單克隆抗體生產(chǎn)為了產(chǎn)生單克隆抗體,是將免疫原注射到宿主動物中。一旦免疫原引起免疫反應,脾臟中的B細胞就會被提取出來并與骨髓瘤細胞(癌細胞B細胞)融合。健康的脾細胞不會在細胞培養(yǎng)中無限期地存活,因此進行此融合過程以制造永生細胞系。通過該過程產(chǎn)生雜交瘤細胞系。通過將脾臟中的單個B細胞融合并培養(yǎng)到它們自己的雜交瘤中,產(chǎn)生了所有產(chǎn)生相同特異性抗體的B細胞的單一培養(yǎng)物。B細胞將單克隆抗體分泌到細胞培養(yǎng)基中。在這里,
便攜式顯微鏡在神經(jīng)膠質(zhì)瘤研究實驗中的應用2022/11/21
便攜式顯微鏡在神經(jīng)膠質(zhì)瘤研究實驗中的應用神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)較為常見的原發(fā)性惡性腫瘤。髓樣分化蛋白2(MD2)作為toll樣受體4(TLR4)的輔助受體介導先天免疫反應。然而,MD2在調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤進展和免疫細胞浸潤中的實際作用仍不清楚??茖W研究曾在探討MD2是否可以通過介導膠質(zhì)瘤中的免疫細胞浸潤成為獨立的預后因素。實驗方法便攜式顯微鏡采用高清攝影系統(tǒng)成像圖片,并支持在線多人同步在線同屏閱片。實驗原理使用CGGA、TCGA和Rembrandt數(shù)據(jù)庫進行MD2的mRNA表達和DNA甲基化差異分析,
細胞轉(zhuǎn)染效率低的原因2022/11/18
細胞轉(zhuǎn)染效率低的原因細胞轉(zhuǎn)染實驗是指將DNA、RNA等外源物質(zhì)通過電轉(zhuǎn)染或化學轉(zhuǎn)染的方式導入至細胞內(nèi)的實驗方法。不同的細胞系轉(zhuǎn)染難度也各部相同,尤其是對生長條件要求較為苛刻的細胞,比如原代細胞的轉(zhuǎn)染效率會遠低于其他細胞。這里,盤點了一下那些可能導致細胞轉(zhuǎn)染效率低的原因、轉(zhuǎn)染試劑選擇指南,以便提升您的細胞轉(zhuǎn)染效率。一、實驗條件和操作方法不合規(guī)正常情況下,做細胞轉(zhuǎn)染實驗前需要充足的準備,比如:細胞、DNA、轉(zhuǎn)染試劑、培養(yǎng)基等。除了合規(guī)的實驗條件以外,還有較為重要的就是實驗操作方法,實驗是一個較為嚴謹
Western實驗步驟2022/11/18
Western,也稱Westernblot、Westernblotting、Western印跡,常簡寫為WB,是用抗體檢測蛋白表達的重要方法之一。碧云天試劑總結(jié)Western實驗步驟可如下進行操作。1.收集蛋白樣品(Proteinsamplepreparation)根據(jù)實驗需要,使用適當?shù)牧呀庖?,例如碧云天生產(chǎn)的Western及IP細胞裂解液(P0013/P0013J)、RIPA裂解液(P0013B/P0013C/P0013D/P0013K)、NP-40裂解液(P0013F)或SDS裂解液(P0
Nano-300微量分光光度計操作說明2022/11/18
Nano-300微量分光光度計操作說明操作步驟1)開機∶打開儀器背面電源開關,儀器啟動并進入自檢界面,根據(jù)實驗目的選擇相應功能。2)檢測(以dsDNA檢測為例)∶在主頁面選擇核酸功能,將儀器上的無塵紙移開,準備開始檢測。a)在主界面選“核酸檢測”b)依照DNA所溶于的液體準備該溶液作為空白液。取2ul空白液加到下基座上,放下上基座并點擊“空白檢測”。b)使用干凈無塵紙把基座上的空白液擦拭干凈,輸入樣品名稱等信息。c)取2ul樣品加到下基座上,放下上基座并點擊“樣品檢測”。注意∶每次檢測的樣品都必
轉(zhuǎn)染試劑分類和應用2022/11/17
轉(zhuǎn)染是一種將外來顆粒和核酸轉(zhuǎn)移到細胞中的技術,它可以通過化學的方式來實現(xiàn)。轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒灥男剩瑥亩梢栽趹没蚝突蚪M令人難以置信的功能領域進行大量研究。在所有轉(zhuǎn)染實驗中,轉(zhuǎn)染方式的選擇尤為重要。下面描述了一些較突出的基于化學的轉(zhuǎn)染試劑。一、基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑脂質(zhì)體是包裹帶負電荷的核酸序列的陽離子脂質(zhì)。它們被細胞膜吸引并通過內(nèi)吞作用整合到宿主細胞中。內(nèi)體酶分解脂質(zhì)體,DNA片段被釋放到細胞質(zhì)中。這些囊泡是由磷脂人工制造的,主要來自含有帶負電荷和中性脂質(zhì)的混合物,這些脂質(zhì)能夠自動與
Lip 3000轉(zhuǎn)染試劑與Lipofectamine2000的區(qū)別2022/11/17
Lipofectamine3000簡稱LIP3000采用了脂質(zhì)體納米微粒技術,提供了出眾的轉(zhuǎn)染性能和可重復的結(jié)果。它適用于各種難以轉(zhuǎn)染的細胞和常見的細胞,在保證轉(zhuǎn)染效率的同時也提高了細胞存活率。Lipofectamine3000試劑可以將難轉(zhuǎn)染細胞系的轉(zhuǎn)染效率提升10倍左右,同時還可以降低細胞的死亡率。另外,LIP3000還具有多功能性,在某些情況下,它甚至可以取代電穿孔,由于提升了轉(zhuǎn)染后細胞的存活率,從而也簡化了工作流程。盡管Lipofectamine2000十分受歡迎,但對于某些敏感的細胞,
基于聚合物的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是什么2022/11/17
細胞轉(zhuǎn)染是在體外和體內(nèi)將外源核酸引入細胞的過程。為了進行轉(zhuǎn)染,使用脂質(zhì)體、膠束和其他類似化合物形式的脂質(zhì)。這些結(jié)構與細胞質(zhì)膜融合并將貨物分子輸送到細胞內(nèi)部。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑通常適用于將生物活性物質(zhì)引入許多類型的真核細胞,例如蛋白質(zhì)、DNA、RNA、肽和核糖體。基于聚合物的轉(zhuǎn)染試劑陽離子的脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑(帶負電荷的DNA與帶正電荷的脂質(zhì)體結(jié)合的試劑)比如:Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染試劑、Lipofectamine3000轉(zhuǎn)染試劑等這些轉(zhuǎn)染試劑簡單易用,在許多細胞系中都被廣泛使用。但是脂質(zhì)體
瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的區(qū)別2022/11/17
轉(zhuǎn)染是指將外源DNA(宿主基因組以外的遺傳物質(zhì))引入細胞。轉(zhuǎn)染的主要目的是改變宿主基因組以表達或阻斷與基因相關的蛋白質(zhì)的表達。基于對轉(zhuǎn)染產(chǎn)物的穩(wěn)定性可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩種,這里著重于瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的區(qū)別。轉(zhuǎn)染定義:轉(zhuǎn)化:這是用于定義和保留用于非病毒基因傳遞方法的術語。這種遺傳物質(zhì)的宿主或受體可以是細菌或真核動物細胞。轉(zhuǎn)導:也稱為轉(zhuǎn)導感染。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染:目標遺傳物質(zhì)被整合到宿主基因組中的轉(zhuǎn)染方式。瞬時轉(zhuǎn)染:是指遺傳物質(zhì)不整合到宿主細胞基因組中的轉(zhuǎn)染方式。轉(zhuǎn)染:它可以定義為將非病毒基因遞送到受
蛋白抗體生產(chǎn)過程中瞬時轉(zhuǎn)染的優(yōu)化方案2022/11/17
隨著藥物靶點復雜性的增加,哺乳動物細胞系統(tǒng)中的基因重組蛋白質(zhì)生產(chǎn)變得越來越普遍。通過瞬時轉(zhuǎn)染的方式適當?shù)倪M行蛋白質(zhì)的折疊、組裝和翻譯后修飾對于哺乳動物細胞表達也具有重要的意義。源自CHO和HEK293細胞的懸浮細胞系通常用于哺乳動物蛋白質(zhì)生產(chǎn)。這些細胞系具有許多理想的特性,包括高表達水平、可擴展性(密度和體積)等等。部分基因藥物會使用穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染劑,以實現(xiàn)批次間的一致性和大規(guī)模的低成本。在過去十年中的細胞轉(zhuǎn)染方面也有著許多進展,瞬時轉(zhuǎn)染方法在改進的細胞系、表達載體、培養(yǎng)基和遞送方法、哺乳動物蛋白表
移液器校準方法-移液器是如何校準的2022/11/16
移液器的校準,意味著確定分配體積和選定體積之間的差異。移液器校準是指通過校對調(diào)整移液器,使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內(nèi)。工廠校準期間,可以通過不同的稱量在量程的MAX體積和MIN或MAX體積的10%(以較高者為準)檢查性能。當您購買移液器時,您應該選擇一款能夠針對不同溫度和各種粘性液體進行重新校準和調(diào)整的移液器。在質(zhì)量體系中校準移液器質(zhì)量系統(tǒng)中移液器校準的主要目標是確保以預期的精度進行測量。誤差限制通常來自制造商的規(guī)格,而執(zhí)行工作所需的精度要低得多。移液器的校準實質(zhì)是根據(jù)*標準(DIN12650
移液器校準-移液槍維修2022/11/16
移液器是作為生物實驗室中微量液體轉(zhuǎn)移的工具被廣泛使用,如何進行移液器校準,移液槍維修,移液器設備的維護保養(yǎng)以及消毒和滅菌方法有哪些?如何延長移液器的使用壽命,提高移液器移液的準確度呢?一、移液器維護保養(yǎng)方法:1、移液器每次使用結(jié)束后,盡量把移液器的量程調(diào)至MAX的刻度,以使彈簧處于松弛狀態(tài)。2、移液器如果需要進行高溫,那么在高溫消毒之前,要先確認該移液器屬于整支滅菌還是半支滅菌。3、移液器的校準可以使用SmartCheck移液器驗證儀,只需要在60s內(nèi)就可以完成移液器校準工作。4、對于保修期限內(nèi)
低吸附槍頭-盒裝吸頭-導電吸頭-選購技巧2022/11/16
移液器又稱為微量進樣器,初始于1956年,由德國科學家Schnitger發(fā)明,傳統(tǒng)移液器的吸液范圍一般在0.5—1200mL之間,適用范圍較廣,主要有生物科學、化學、食品、物理實驗室甚至石油工業(yè)等行業(yè)使用。移液器發(fā)展至今,在精確度都有著較大的提升,后來逐漸出現(xiàn)微量移液器、多通道微量加樣器、電動移液器,大容量電動移液器,全自動移液工作站等以滿足不同實驗需求的移液器。移液器所匹配的移液槍頭也各種各樣,瑞寧吸頭怎么樣?那么移液器吸頭的選購技巧有哪些呢?其實,選購好移液器吸頭也是保證移液準確度的關鍵,移
紫外分光光度計常見問題2022/11/15
什么是紫外可見光譜?關于紫外可見分光光度計的常見問題:紫外-可見光譜或紫外可見分光光度法(UV-Vis或UV/Vis)是指紫外-可見光譜區(qū)域的吸收光譜或反射光譜。紫外-可見(UV-VIS)光譜法是一種分析方法,可以根據(jù)分析物接收到的光量來測量分析物的量。紫外可見分光光度計紫外/可見區(qū)域(UV-VIS)測量的波長范圍從大約200nm到800nm。紫外線或可見光輻射分子的吸收導致分子的電能水平之間的轉(zhuǎn)變。不同材料的光學和電子特性,例如薄膜、粉末、整體固體和液體,都適用于表征。紫外可見光譜是一種經(jīng)濟、
無粉乳膠手套-丁晴手套和乳膠手套哪個好2022/11/15
實驗室用的手套是每個實驗常用消耗品,常見的一次性手套主要有丁晴手套和乳膠手套、PVC手套三種,那么丁晴手套和乳膠手套哪個好?PVC手套是什么?實驗該選擇哪一種手套呢?下面就談談這三種手套的區(qū)別:一、PVC手套、丁晴手套和乳膠手套的區(qū)別關于在實驗中究竟選擇乳膠手套還是丁晴手套是很多實驗者困惑的問題,然而,手套除了保護手之外,它們還各具特點。了解這三種手套的不同特點才能根據(jù)自己的實驗區(qū)選擇對應的適合自己的手套類型。PVC手套PVC手套是主要采用PVC材質(zhì),PVC手套無過敏原、無粉塵產(chǎn)生,離子的含量較
siRNA轉(zhuǎn)染試劑與轉(zhuǎn)染方法介紹2022/11/15
RNA代表核糖核酸和siRNA——小干擾RNA(也稱為沉默RNA)。siRNA是分子中的一種短(21-23bp)雙鏈RNA核苷酸,在細胞中發(fā)揮各種生物系統(tǒng)的功能。siRNA轉(zhuǎn)染是“轉(zhuǎn)移”,將siRNA細胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細胞中,這是一個涉及基因沉默的過程。為了成功優(yōu)化siRNA轉(zhuǎn)染,需要合適的轉(zhuǎn)染試劑和轉(zhuǎn)染方法來進行體外和體內(nèi)RNAi實驗。這些過程因細胞類型和轉(zhuǎn)染方法而異。對于siRNA轉(zhuǎn)染有許多針對特定細胞類型優(yōu)化的體外siRNA轉(zhuǎn)染試劑。siRNA轉(zhuǎn)染技術體內(nèi)siRNA于siRNA轉(zhuǎn)染技術應用是基于
如何提高細胞轉(zhuǎn)染效率2022/11/15
=細胞轉(zhuǎn)染是將外來核酸RNA或DNA等小分子物質(zhì)轉(zhuǎn)移到健康細胞中以產(chǎn)生“轉(zhuǎn)基因細胞”的過程。在轉(zhuǎn)染過程中,外源核酸鏈進入健康細胞后,核酸與細胞中現(xiàn)有的DNA結(jié)合,形成一個轉(zhuǎn)基因細胞。細胞轉(zhuǎn)染過程中如何提高轉(zhuǎn)染效率,轉(zhuǎn)染效率的影響因素有哪些。細胞轉(zhuǎn)染的主要方法是什么?細胞轉(zhuǎn)染主要分為兩大類,即:穩(wěn)定轉(zhuǎn)染和瞬時轉(zhuǎn)染。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是將外源核酸繞過細胞膜,進入細胞,并通過核膜傳遞從而使外源核酸與宿主DNA(或RNA)整合以產(chǎn)生修飾基因。這種轉(zhuǎn)染方式所培育的細胞后代都將整合這種修飾基因,主要應用領域為:藥物篩
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