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常見問題之影響蛋白表達因素有哪些？2021/11/25

1.蛋白本身的特性：蛋白分子量大小、蛋白來源/物種、是否為毒性蛋白，蛋白翻譯后修飾程度、蛋白自身結構的復雜程度2.宿主的選擇：宿主本身的特性、蛋白表達需求等都影響著蛋白表達3.蛋白需求量：蛋白應用范圍對應的需求量不同，所以要根據(jù)需求量確定表達系統(tǒng)4.質(zhì)粒載體的選擇：載體是攜帶外源基因的工具，要根據(jù)系統(tǒng)選擇合適的載體才能使蛋白更好的表達5.融合標簽的選擇：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶6.蛋白表達系

常見問題之HIS標簽蛋白沒有被洗脫下來2021/11/24

蛋白掛柱后洗脫不下來主要是因為蛋白和柱子結合能力太強或者洗脫條件太溫和，我們可以從以下幾方面考慮解決問題。1、洗脫條件太溫和：重新摸索洗脫條件，增加緩沖液中咪唑濃度或者適當降低緩沖液pH以確定最佳的洗脫條件或者更、換緩沖液的成分（換成tris-HCl緩沖液）。2、蛋白在柱子中沉淀：適當降低上樣量或蛋白濃度，用咪唑線性洗脫。使用添加劑或者改變NaCl的濃度，或者在變性的條件下洗脫（加4-8M的尿素或者4-6M的鹽酸胍）。3、非特異性的疏水或者其他作用：在洗脫液中加非離子的添加劑（例如0.2%的Tr

慢病毒構建原理2021/11/23

慢病毒載體（Lentivirus）是一類改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒載體，是逆轉錄病毒的一種，基因組是RNA，其毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源性目的基因所取代，屬于假型病毒。可利用逆轉錄酶將外源基因整合到基因組中實現(xiàn)穩(wěn)定表達，具有感染分裂期與非分裂期細胞的特性?！袈《净蚪M進入細胞后，在細胞漿中反轉錄為DNA，形成DNA整合前復合體，進入細胞核后，DNA整合到細胞基因組中。整合后的DNA轉錄成mRNA，回到細胞漿中，表達目的蛋白；或產(chǎn)生小RNA。慢病毒介導的基因表達或小RNA干擾作用持續(xù)且

帶你學會一種藥物研究利器——等溫滴定量熱法2021/11/23

等溫滴定量熱法(IsothermalTitrationCalorimetry,ITC)是近年來發(fā)展起來的一種研究生物熱力學與生物動力學的重要方法，它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續(xù)、準確地監(jiān)測和記錄一個變化過程的量熱曲線，原位、在線和無損傷地同時提供熱力學和動力學信息。ITC檢測方式與化學反應中的酸堿滴定法相似，在ITC測定中，首先將一種反應物置于一個溫控樣品池中，并通過一個熱電偶回路與一個參比池相偶聯(lián)，樣品池和參比池處于相同的外部環(huán)境。特定的滴定劑（按實驗需要選擇）定量滴加到樣品池中，當

NK細胞是屬于什么細胞呢？2021/11/22

NK（自然殺傷細胞）通過整合識別MHCI分子的激活和抑制類受體的信號對靶點進行識別，對靶細胞進行直接殺傷，同時不損傷自身健康細胞。人體NK細胞占血液和其他部位中淋巴細胞的5%-20%，含量豐富，在抗病毒和抗腫瘤免疫中發(fā)揮關鍵作用。NK是控制急性和慢性病毒感染所必需的，同時NK能夠促進多種腫瘤直接裂解，在不同部位巡邏防止轉移。NK細胞功能的多面性顯示出其在免疫介導的保護和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)平衡中具有動態(tài)作用。根據(jù)CD56和抗體結合Fc受體CD16的表達水平，人類NK可細分為成熟度和功能特性不同的兩個主要亞

為什么大多數(shù)細胞培養(yǎng)需要二氧化碳培養(yǎng)箱2021/11/19

細胞培養(yǎng)基的pH一般在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖體系是一種生理pH緩沖體系(是人體血液中最重要的pH緩沖體系)，大多數(shù)培養(yǎng)基都是用它來維持穩(wěn)定的pH值，用粉末配制培養(yǎng)液時，往往需要加入一定量的碳酸氫鈉。對于大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖體系的培養(yǎng)液，為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間，以維持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳濃度。同時，用于細胞培養(yǎng)的容器需要一定程度的通風，以便于氣體的交換。使用其他pH緩沖系統(tǒng)是否不需要二氧化碳培養(yǎng)箱？已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，由于空氣中二氧化碳濃度低，

警惕！細胞系的交叉污染可能是毀掉你實驗的元兇2021/11/18

您是否有過這樣的經(jīng)歷……新買到的細胞或者實驗室傳了幾代的細胞，又或者是儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞，需要用到時腦海里一直有著這樣的問題困擾著你，被污染了么?鑒定正確么？用它做研究會影響實驗結果么?據(jù)統(tǒng)計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識，只因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導致研究結論錯誤、結果不可重復、臨床細胞治療災難性后果……，這將浪費大量時間、精力和金錢。世人皆知，細胞身嬌體貴難養(yǎng)活，養(yǎng)好細胞實屬不易。而這其中最煩的是污染、最怕的是掉包。因為盡管研究僧們有方法把一切污染的源頭扼殺在搖籃之

安諾倫代理Atlas Antibodies品牌產(chǎn)品——活動好價熱銷中2021/11/16

AtlasAntibodies是提供人類蛋白圖譜(HPA)認證抗體的供應商。傳承HPA優(yōu)秀科研基因，擁有強大的供應能力，提供針對所有人類蛋白質(zhì)的高品質(zhì)抗體。HPA項目于2003年由瑞典研究人員發(fā)起，運用人類蛋白抗體和轉錄組學，對人體正常及癌變細胞組織樣本進行免疫染色(IHC)，建立shi界上第一個以IHC染色結果為主的、可供開放訪問的人類蛋白圖譜數(shù)據(jù)庫，以推動人類在新型診斷、治療靶點和創(chuàng)新藥等領域的探索。該項目成立之初便在科學界引起強烈反響，無數(shù)科學家希望獲得這些抗體用于研究，AtlasAnti

噬菌體繁殖有哪些特點？2021/11/15

1.毒性噬菌體指在宿主菌體內(nèi)復制增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細菌。毒性噬菌體的增殖方式是復制，其增殖過程經(jīng)歷吸附穿入、生物合成和成熟釋放3個階段。進入菌細胞內(nèi)的噬菌體核酸首先經(jīng)早期轉錄產(chǎn)生早期蛋白質(zhì)，并復制子代核酸，再進行晚期轉錄產(chǎn)生噬菌體的結構蛋白。子代噬菌體達到一定數(shù)量時，由于噬菌體合成酶類的溶解，菌細胞突然裂解，釋放出的噬菌體再感染其他敏感細菌。2.溫和噬菌體感染宿主菌后并不增殖。其基因整合于細菌染色體上，即前噬菌體，隨細菌染色體的復制而復制，并隨細菌分裂而分配至子代細菌的染色體中

抗體開發(fā)技術優(yōu)勢2021/11/12

艾柏森（北京）生物科技有限公司是美國一家以生命科學前沿領域研究與醫(yī)藥應用、工業(yè)化生產(chǎn)一體化為主要業(yè)務方向的高新技術服務企業(yè)。目前，公司圍繞多位外籍科學家先后組建了分子細胞生物學研究技術團隊、蛋白生產(chǎn)與抗體制備實驗中心、模式動物基因工程研究團隊以及生物化學仿制藥研究技術團隊等多個技術研發(fā)部門。以抗體藥物研發(fā)一條鏈解決方案為基礎，我們主要為客戶提供抗體制備、重組蛋白/抗體制備、蛋白晶體學、蛋白質(zhì)組學、噬菌體庫構建、噬菌體庫篩選，單克隆抗體藥物開發(fā)（抗體篩選、抗體藥效學、抗體測序、抗體分析、抗體人源化

艾柏森抗體親和力成熟技術2021/11/11

目前，藥用抗體的研發(fā)主要基于雜交瘤細胞或者體外抗體庫。通過抗原設計和抗體篩選，人們初步獲得陽性的hits，再進一步通過一系列生物性質(zhì)檢測和功能驗證，終得到有藥用潛力的抗體。在實際研發(fā)過程中，經(jīng)過了常規(guī)篩選所得的抗體，有諸多方面需要更細致的改進，包括親和力、免疫原性、半衰期等等，抗體領域這些年來做了很多相關的研究和實踐。其中，抗體親和力成熟是研究的重要方向之一。理論上，抗體親和力的提高有助于改善抗體的特異性和效力，有助于減少用藥劑量，降低毒副作用等。雖然實際的研究證明親和力的提高與抗體效價的提高并

安諾倫代理Gerbu品牌產(chǎn)品——提供用于多抗與單抗生產(chǎn)的高性價比佐劑2021/11/10

GERBU公司在原材料采購和制造領域有超過25年的豐富經(jīng)驗。GERBU提供廣泛的精細化學品，生物試劑，緩沖液，洗滌劑，介質(zhì)等。例如ACES、AEBSF、白蛋白、氨芐青霉素、抗生物素蛋白、DTT、甘氨酸、HEPES、IPTG、煙酰胺衍生物等。GERBU完mei的生物相容性佐劑已經(jīng)越來越成為單克隆和多克隆抗體生產(chǎn)的標準。GERBU成立于1986年，建立生化生產(chǎn)，并與保加利亞（格爾布）和俄羅斯進行貿(mào)易；它記錄了跨越兩代人的經(jīng)歷和接觸。它今天的重點是西部貿(mào)易：然而，良好的關系使得能夠在全球范圍內(nèi)建立大宗

CAR T細胞免疫療法是什么？2021/11/10

CAR-T英文全稱是ChimericAntigenReceptorT-Cell，中文叫嵌合抗原受體T細胞。CAR-T細胞免疫療法是醫(yī)學界新出現(xiàn)的治療腫瘤和癌癥的一種方法。它先從病人身上提取出免疫T細胞，然后利用基因工程技術，在體外寫入能讓T細胞識別特定腫瘤細胞并殺死腫瘤細胞的基因片段，這種CAR-T細胞在實驗室中大量培養(yǎng)，之后再把擴增后的這種"加強型"免疫T細胞回輸?shù)讲∪梭w內(nèi)進行治療。CAR-T治療簡單來說分為下列步驟：1、采用血漿分離置換法提取收集患者體內(nèi)白細胞，該步驟提取血液細胞，并分離出一

生物實驗的基本原理2021/11/09

生物學實驗都是些看不見，摸不著的東西，所以基本上都是使用這個方法，看不見的，我們拿看的見的去標記它，測不著的或者不好測的，拿可以測容易測的去標記它。很多的實驗手段，其實最初都是很簡單的，為了提高靈敏度和精度，不斷改進，越來越煩瑣，抑或者出現(xiàn)了一些分支。通常這時候，最初那個簡單的，最根本的東西就被人所忘記?？吹降谋M是表面上的細節(jié)。至少現(xiàn)在的書太二了，本來基本上一樣的實驗，闡述原理的時候被描成了兩樣的東西。同位素標記，熒光標記自不用說。芯片實驗也是標記，array上的spot序列是已知的，它會跟什么

干貨分享！比一比，分選細胞您需要多長時間？2021/11/08

細胞分選在多種研究領域都有涉及，例如腫瘤學，神經(jīng)生物學，免疫學等。上次和大家分享了磁珠分選，除了磁珠分選還有流式分選，今天小編在這里跟大家聊一下流式分選的原理、應用及與磁珠分選的區(qū)別，希望能幫到大家一二。1流式細胞儀分選原理流式細胞儀分選細胞有兩種方法：一是“CatchTuber”即“捕獲管法”就是機械手臂以極快的速度出入樣品液流，在細胞通過激光照射并被確認之后快速捕獲目標細胞至收集系統(tǒng)中，此種方法常用于小型臺式機。另一種方法是電子偏轉的方式，即將熒光染色確認的細胞標記正或負電荷，通過電磁場偏轉

免疫組化：非特異性染色的八大原因2021/11/08

免疫組化，免疫組織化學技術（immunohistochemistry），是一項利用抗原抗體反應，通過使標記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原，對蛋白定位，定性的實驗技術。非特異性染色的八大原因然而，結果卻未必都是那么如意的，常常出現(xiàn)下面這種狀況，好好的一張片子染得臟臟的，這就是最常見的非特異性染色。1.抗體問題，真的是一分錢一分貨??！一抗用多克隆抗體容易出現(xiàn)非特異性染色，建議用高純度，高效價的針對更具特異性抗原決定簇的單克隆抗體來解決。單克隆抗體很貴，不過結果真的很好。尤其是背景非特異性染色不

安諾倫重磅代理LB產(chǎn)品精品推薦！雙11折扣*超多福利~2021/11/05

今天你領汪汪幣了嗎？今天你扔喵糖qiang紅包了嗎？今天你參與瓜分二十億、贏二十億了嗎？一年一度雙十一又又又來了全民雙十一，科研不缺席安諾倫生物一年一度雙十一*推薦驚喜來襲！折上滿減熱銷*好禮相贈0元試用LB產(chǎn)品折上滿減LeadingBiology是一家不斷發(fā)展的生物技術公司，在全球范圍內(nèi)提供高純度蛋白，為研究社區(qū)提供細胞因子相關產(chǎn)品，用于癌癥、凋亡、發(fā)育、內(nèi)分泌學、免疫學、神經(jīng)科學、蛋白酶和干細胞研究。LeadingBiology的蛋白質(zhì)包括干擾素、白介素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、腫瘤壞死因子、瘦素、

細胞衰老檢測方法與步驟2021/11/05

細胞衰老是細胞在正常環(huán)境條件下發(fā)生的功能減退、逐漸趨向死亡的現(xiàn)象。zhong所周知，衰老的細胞表現(xiàn)為細胞體積變大，呈扁平狀；細胞核變大，核膜內(nèi)陷，染色質(zhì)聚集、固縮、裂解；胞質(zhì)內(nèi)顆粒增加，有空泡形成；線粒體的數(shù)目及形狀發(fā)生改變；膜流動性降低；溶酶體內(nèi)容物增多，導致溶酶體酶β-半乳糖苷酶活性升高。衰老細胞所具有的上述特征成為各種細胞衰老檢測手段的依據(jù)。其中，對衰老相關β-半乳糖苷酶的檢測是有效檢測細胞衰老的經(jīng)典方法。X-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）是β-半乳糖苷酶的底物，X-

安諾倫代理BioVendor品牌價格優(yōu)品質(zhì)有保障2021/11/04

BioVendor是歐洲的一家醫(yī)藥科技公司，專注于為分子和細胞學實驗室提供體外研究產(chǎn)品，主要產(chǎn)品有重組蛋白、抗體和ELISA試劑盒。目前公司致力于有關激素和細胞活素利用方面的研究，產(chǎn)品相關方向：能量代謝和體重調(diào)節(jié)、骨代謝、心血管疾病和shen病、感染和發(fā)炎、鐵代謝研究、肌肉生長控制、神經(jīng)組織損壞標記、腫瘤學、胰腺調(diào)節(jié)分子、分泌型磷脂酶A2等。BioVendor–LaboratorníMedicínaa.s.(BioVendorLM)isa“mothercompany”ofthecorporate

兔子單克隆抗體制備2021/11/04

單克隆抗體制備限于技術保護的原因，目前，兔單克隆雜交瘤細胞制備技術被一家公司壟斷，所以我們無法通過像類似制備小鼠單克隆抗體那樣，制備兔源雜交瘤細胞獲得兔源單克隆抗體。為此，公司在一大批免疫學與基因工程學專家的幫助下，先后建立了兩套兔源單克隆抗體制備方案。這兩種方案均不依賴于兔源骨髓瘤細胞，但是其抗體的種源特性毫無疑問是兔源，在保留兔源單克隆抗體優(yōu)勢的同時，大大壓縮試驗周期，提高試驗成功率。方案一噬菌體展示技術M13單鏈絲狀噬菌體展示系統(tǒng)是目前應用廣泛的文庫展示系統(tǒng)，通過將蛋白、抗體或多肽與噬菌體