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優(yōu)誓（北京）生物技術(shù)有限公司
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熒光PCR凍干-甘露醇2020/08/20
甘露醇是山梨糖醇的同分異構(gòu)體，兩種醇類物質(zhì)的二號碳原子上羥基朝向不同，易溶于水，為白色透明的固體，有類似蔗糖的甜味.甘露醇主要用于醫(yī)藥和食品，可作添加劑、保護(hù)劑等。甘露醇作為蛋白質(zhì)的抗凍劑和保護(hù)劑由來已久，甘露醇對蛋白質(zhì)的保護(hù)作用與其濃度、形態(tài)結(jié)構(gòu)有關(guān),而其濃度與結(jié)晶形態(tài)有時呈一定的關(guān)聯(lián)性。通常認(rèn)為無定型甘露醇具有使蛋白質(zhì)穩(wěn)定的作用,而結(jié)晶態(tài)的甘露醇則失去保護(hù)功能;1%的濃度或更低濃度的甘露醇通過無定型結(jié)構(gòu)的形成，而阻止蛋白質(zhì)藥物的聚集,但是高濃度的甘露醇則易于形成結(jié)晶態(tài)而促進(jìn)蛋白質(zhì)藥物的聚集。
熒光PCR凍干保護(hù)劑-磷酸鹽2020/08/20
磷酸鹽是磷酸的鹽，在無機(jī)化學(xué)，生物化學(xué)及生物地址化學(xué)上是很重要的物質(zhì)。磷酸鹽是蛋白質(zhì)配方中常見的緩沖劑之一，特別是含水蛋白質(zhì)藥物，有效pH值范圍為5.8-8.0，并且具有生物相容性。然而，正如“冷凍過程中的pH變化”所討論的那樣，磷酸鹽緩沖液，特別是磷酸氫二鈉，在冷凍過程中會發(fā)生顯著的pH變化，因此不推薦用于pH敏感蛋白質(zhì)。相反，磷酸鉀，組氨酸，三羥甲基氨基甲烷(Tris)和檸檬酸鹽緩沖液在冷凍期間顯示出小的pH變化。此外，低緩沖液濃度可有助于降低pH變化。然而，選擇適當(dāng)?shù)睦鋬龈稍锼灾苿?，包?
蛋白藥物凍干時出現(xiàn)的常見現(xiàn)象2020/08/20
生物藥品是以微生物，寄生蟲，動物霉素，生物組織為起始材料，采用生物學(xué)工藝或分離純化技術(shù)制備。對于大多數(shù)生物藥品來說，冷凍干燥都是生產(chǎn)過程的一項極為重要的制劑手段。對于藥品的品質(zhì)起了關(guān)鍵作用。蛋白藥物凍干時出現(xiàn)的常見現(xiàn)象，1.快速凍結(jié)大多對蛋白類藥品凍干不利，是因為快速凍結(jié)過程中，冰晶與凍結(jié)濃縮的溶液間界面面積增大，使變性蛋白質(zhì)量增大。2.低溫回火常有利于蛋白類藥品的凍干，是因為低溫回火促使冰晶生長，冰界面面積減小。3.凍干過程中濃度較高的蛋白溶液凍干后穩(wěn)定性相對較好。是因冰界面處蛋白處于飽和狀態(tài)
凍干機(jī)放大工藝要考慮的因素2020/08/19
試驗型凍干機(jī)凍干結(jié)果的放大工藝，要考慮這些因素1.箱體壁溫TW,2.隔板溫度Th，3.箱體真空壓力Po,4.隔板，箱體壁，藥瓶之間的幾何關(guān)系。傳到板層上藥瓶的熱量與這些因素有關(guān)，1.從箱體壁面?zhèn)鞯桨鍖佣瞬克幤總?cè)部的熱量比板層中心部藥瓶的熱量多的多，并且從下隔板的空余面往端部藥瓶側(cè)面有追加傳熱量，因此，中心部藥瓶的升華干燥時間約為端部藥瓶的2倍。2.箱體壁溫，對于壁面?zhèn)鳠岬蕉瞬克幤總?cè)面以及中心藥瓶上部的熱量影響很大，隨著箱體壁溫的降低，壁面?zhèn)鞯剿幤康臒崃縿t大為減少。3.隨著隔板溫度的降低，從下隔板
抗生素類藥物及凍干2020/08/18
抗生素（antibiotics）是由微生物（包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬）或高等動植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產(chǎn)物，能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。抗生素提取方法溶媒萃取法，離子交換法，直接沉淀法。抗生素類藥物的制備與凍干時需要知道的幾個方面1.配料的水溫、加料的順序、活性炭的吸附時間和溫度、料液放置時間。2、有的原料存在多晶型，不同晶型的穩(wěn)定性是不一樣的；有的原料對溫度敏感；有的原料對pH敏感；有的原料對氧化敏感等。不穩(wěn)定性物質(zhì)的分解物很可能就是異物的來源。3
抗體及冷凍干燥2020/08/17
抗體是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白?？贵w按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等?？贵w在醫(yī)療實踐中應(yīng)用廣泛?？贵w的溶解方法是用移液器加0.1ml雙蒸水到試管內(nèi)，混勻，-20℃保存。怎樣分裝呢？抗體溶解后，將其分裝成5-10支（如0.1ml抗體，20ulx5支或10ulx10支），-20℃保存，用一支取一支，避免反復(fù)凍溶?？乖贵w凍干保護(hù)劑機(jī)理：甘油、山梨醇可以保持抗原抗體表面的滋潤，使其不至于因失水而失活。以血漿為例介紹一下其制備及冷凍干燥1.先將冰
輔酶及凍干法制備工藝2020/08/15
輔酶A為白色或微黃色粉末，具典型的硫醇味。有引濕性，一溶于水不溶于丙酮、乙醇。易被空氣（特別在痕量重屑離子存在時）、過氧化氫、碘或高猛酸堿鹽等氧化成無活性的二硫化物，故在制劑中加穩(wěn)定劑和賦形劑（填充劑）。輔酶A為水溶液中不穩(wěn)定的藥物，需采用凍干法制備成粉針。凍干法制備工藝先是藥品的準(zhǔn)備，包括無菌配液→過濾→分裝（安瓿瓶或西林瓶），此時藥品溶液要保持一定的濃度，為了有利于干燥和凍干后形成穩(wěn)定的多孔結(jié)構(gòu)，還需要添加賦形劑：對于激素、酶、疫苗等劑量相對較小的熱敏型藥品，加入凍干保護(hù)劑：為保護(hù)含有蛋白質(zhì)
多肽的穩(wěn)定性及凍干保存2020/08/14
多肽是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。通常由三個或三個以上氨基酸分子脫水縮合而成的化合物都可以成為叫多肽。多肽在其制劑研究中存在不穩(wěn)定性，其原因較多。但對某一個多肽來說引起不穩(wěn)定的主要原因并不多?？梢栽敿?xì)研究外界條件（如PH、溫度、光照、氧濃度等）對多肽穩(wěn)定性的影響有助于設(shè)計合理的制劑配方。怎樣能提高多肽的穩(wěn)定性？可通過加入添加劑，如糖類、多元醇、明膠、氨基酸和某些鹽類，可以提高多肽的穩(wěn)定性。在凍干過程中，上述物質(zhì)還可以取代水而與多肽形成氫鍵來穩(wěn)定多肽的天然構(gòu)象，而且還可以提高凍干制品的玻璃化溫度。多肽發(fā)
緩沖溶液及溶液凍干升華2020/08/13
緩沖溶液是由能抵抗外加的少量酸，堿或稀釋而保持本身的PH值基本不變的溶液，用來配制緩沖溶液的試劑叫緩沖試劑。在生物制品冷凍干燥配方中選擇緩沖試劑應(yīng)注意什么呢？如每一種緩沖劑不能都用于任何溶液，如蛋白質(zhì)溶液對于PH敏感，這時就應(yīng)該避免使用磷酸鈉緩沖劑。這是由于在凍結(jié)過程中磷酸氫二鈉易于優(yōu)先結(jié)晶，溶液PH值降低，終會引起蛋白質(zhì)變性。又如緩沖劑的濃度也是很重要的，例如，β-牛乳糖水溶液（2μg/ml）冷凍干燥過程中，因為甘露醇結(jié)晶而不能起到保護(hù)作用。當(dāng)添加濃度為10mM的磷酸鹽緩沖液（pH7.4）后，
冷凍干燥之凍干曲線2020/08/12
凍干曲線是表示凍干過程中產(chǎn)品的溫度、壓力隨時間變化的關(guān)系曲線。實踐中凍干曲線往往用擱板溫度（或箱內(nèi)空間溫度）與時間的關(guān)系曲線來表示。在制定凍干曲線時要考慮下列幾個因素：1.有些產(chǎn)品受冷凍的影響較大，有些產(chǎn)品則影響較??；一般細(xì)菌性的產(chǎn)品受冷凍的影響較大，病毒性的產(chǎn)品受冷凍的影響較小。共熔點低的產(chǎn)品要求預(yù)凍的溫度低，加熱時板層的溫度相應(yīng)要低些；為了長期保存產(chǎn)品，殘余水份含量要求低的產(chǎn)品，凍干時間需長些。殘余水份含量要求高的產(chǎn)品，凍干時間可縮短；2.總裝液量和每一容器內(nèi)產(chǎn)品裝液量的多少，裝液量多則凍干
生物制品冷凍干燥的升華要點2020/08/11
生物制品的溶液是由主要功能成分（如藥用成分）、多種天加組分（如抗氧化劑、填充劑等）和蒸餾水混合的膠體懸浮液。在冷凍干燥時升華時的要點，升華時所需的熱量由加熱設(shè)備(通過擱板)提供。從擱板傳來的熱量由下列途徑至產(chǎn)品的升華界面：1.由玻璃瓶底與擱板接觸部位傳到玻璃瓶底，穿過瓶底和產(chǎn)品的凍結(jié)部分到達(dá)升華界面；2.上擱板的下表面和下擱板的上表面向玻璃瓶及產(chǎn)品干燥層上表面輻射，再通過玻璃瓶壁及凍結(jié)層或已干燥層的導(dǎo)熱到達(dá)升華界面；3.通過擱板與玻璃瓶外表面問殘存氣體的對流，由于傳熱中必需有傳熱溫差，各段傳熱溫
藥液在凍干后出現(xiàn)的常見問題及凍干工藝優(yōu)化2020/08/08
藥液在凍干前分裝，方便、準(zhǔn)確，可實現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)，且在低溫凍干過程中微生物和酶的作用幾乎不進(jìn)行，可較好保持被凍干藥物的性狀，凍干的藥物大多疏松多孔，脫水*藥物可以進(jìn)行長時間的貯存，而且容易重新吸收水分和恢復(fù)活性。藥液在冷凍干燥后會出現(xiàn)的一些常見問題及解決方法，如凍干產(chǎn)品出現(xiàn)萎縮、塌陷、空洞、硬殼、灰散或形成不定形結(jié)構(gòu)等現(xiàn)象，有以下幾種原因:1.產(chǎn)品干燥不*，殘存冰晶，出箱后，產(chǎn)品的溫度、壓力均處于共熔點以上，冰晶融化，水被周圍已干燥的物質(zhì)吸收，使得產(chǎn)品出現(xiàn)空洞、萎縮。解決方法:可能是由于干燥時間不
溶液凍干時的要素及冷凍干燥過程2020/08/08
溶液凍干時的關(guān)鍵要素如確定處方，處方包括：活性成分；賦形劑；工藝用水。溶液的組成關(guān)系到冷凍、升華等步驟的實施。如凍干工藝曲線的設(shè)定，包括過冷的程度；結(jié)晶的程度；崩解溫度或共晶溫度；亞穩(wěn)狀態(tài)間隙物質(zhì)的相變化；溶液的結(jié)晶熱；間隙物質(zhì)的熔化溫度。溶液凍干過程分為以下幾個步驟：1.預(yù)凍是將溶液中的水固化，防止抽空干燥時起泡、濃縮、收縮和溶質(zhì)移動等不可逆的變化。溶液在凍結(jié)過程中，需過冷到冰點以下，其內(nèi)產(chǎn)生晶核以后，水開始結(jié)晶，同時放出結(jié)晶熱，使其溫度上升到冰點，隨著晶體的生長，溶液濃度增加，當(dāng)濃度到達(dá)共晶
凍干工藝及優(yōu)化-蛋白2020/08/07
冷凍干燥作為蛋白類藥物干燥常用的方法，能保持蛋白類藥物的活性，干燥后能保持原形，體積幾乎不變，凍干藥品疏松多孔，呈海綿狀，復(fù)水性好。藥品脫水*能長期保存。想要凍干藥品復(fù)水性好并且能長期保存，凍干工藝及優(yōu)化很重要，例舉幾個方面如冷凍干燥過程中凍結(jié)中形成的冰晶形態(tài)和大小以及玻璃化程度不光影響干燥效率，還影響凍干藥品的質(zhì)量。在凍結(jié)過程中要考慮配方、凍結(jié)速率、凍結(jié)方式以及是否退火等問題。配方中如果固體含量少于2%，藥品的性能就會不穩(wěn)定，尤其在干燥過程中，藥品微粒不能粘在基質(zhì)上，溢出的水蒸汽會把微粒帶到小
熒光PCR凍干保護(hù)劑-甘氨酸2020/08/03
甘氨酸又名氨基乙酸，是結(jié)構(gòu)簡單的氨基酸，其甜度為蔗糖的0.8倍，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飼料、電鍍、有機(jī)合成等領(lǐng)域。在藥物制劑中的應(yīng)用甘氨酸作為蛋白穩(wěn)定劑，在生物制品中得到廣泛的應(yīng)用，如人白細(xì)胞干擾素口含片、液體干擾素制劑，也可作為凍干制劑的骨架成分，混懸劑的穩(wěn)定劑。甘氨酸經(jīng)常用作凍干蛋白質(zhì)制劑的填充劑。甘氨酸在用作填充劑時具有優(yōu)勢，因為它是無毒的。它具有高共晶/共熔溫度(Teu)，可實現(xiàn)高效冷凍干燥和高溶解度。甘氨酸對特定蛋白質(zhì)藥物如LDH和轉(zhuǎn)化生長因子-b1具有穩(wěn)定作用，其穩(wěn)定效果取決于其濃度
實時熒光定量PCR的方法2020/07/28
實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的方法有實時熒光PCR一步法與實時熒光PCR兩步法。一步法與兩步法有什么區(qū)別呢？一步法為反轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增在同一個管內(nèi)完成。兩步法為反轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增分兩步進(jìn)行，先從RAN模板反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，得到的cDNA在進(jìn)行一次或多次不同的PCR反應(yīng)。一步法與兩步法有那些優(yōu)點呢？一步法:快速,簡便,敏感,減少污染機(jī)會,減少了RNA二級結(jié)構(gòu),聚合
熒光PCR凍干-DTT2020/07/27
二硫蘇糖醇（簡稱為DTT）是一種小分子有機(jī)還原劑，其還原狀態(tài)下為線性分子。DTT有什么特點？怎么保存呢？DTT是一種常用還原劑，有抗氧化作用，進(jìn)口分裝。DTT和巰基乙醇相比，DTT的刺激性氣味要小很多，毒性也比巰基乙醇低很多。另外DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時，兩者效果相近。DTT一般保存條件為-20℃保存。1MDTT溶液可以在-20℃保存2年以上。由于容易被空氣氧化，DTT的穩(wěn)定性較差;但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。DTT作為PCR的添加劑與DMSO、甜菜堿、BSA混合配制
熒光PCR凍干保護(hù)劑-牛血清白蛋白2020/07/26
牛血清白蛋白是牛血清中的一種球蛋白。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用。牛血清白蛋白一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中，因為有些酶在低濃度下不穩(wěn)定或活性低。加入牛血清白蛋白后起到“保護(hù)”或“載體”作用，不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。在37℃，酶切反應(yīng)超過1h時，牛血清白蛋白可以使酶更加穩(wěn)定。牛血清白蛋白可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。牛血清白蛋白在熒光PCR凍干時常作為凍干保護(hù)劑使用，其中與甘油、海藻糖、DTT、
熒光PCR凍干-吐溫2020/07/25
吐溫溶于水，容易分散。按結(jié)構(gòu)式中R不同，分為吐溫20、吐溫40、吐溫80和吐溫85等種類。由司班分子中殘余的羥基與氧化乙烯縮合而成。主要用作乳化劑，色層分析固定液。吐溫的應(yīng)用例如吐溫80在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中易溶，在礦物油中極微溶解。應(yīng)用于注射液及口服液的增溶劑或乳化劑；膠囊劑用分散劑；軟膏劑用乳化劑和基質(zhì)，栓劑用基質(zhì)等。例如吐溫20在實時熒光PCR反應(yīng)緩沖液的應(yīng)用，反應(yīng)緩沖液包括這些原料如三羥甲基氨基甲烷?鹽酸緩沖液、氯化鎂、硫酸銨、二甲基亞砜、脫氧核糖核苷三磷酸、甘油、牛血清蛋白、吐溫
熒光PCR凍干保護(hù)劑-PEG2020/07/24
聚乙二醇（PEG）是親水性高分子物質(zhì)，可作為增塑劑以改變聚合物的物理機(jī)械性質(zhì)，使其更具柔順性、塑性。聚乙二醇可作為增塑劑、潛溶劑、注射用溶劑、半極性溶劑、抗粘劑、潤濕劑。聚乙二醇在化妝品工業(yè)和制藥工業(yè)中的應(yīng)用很廣泛。聚乙二醇有哪些作用呢？1、由于聚乙二醇具有水溶性、不揮發(fā)性、生理惰性、溫和性等可選取不同相對分子質(zhì)量級分的聚乙二醇改變制品的粘度、吸濕性和組織結(jié)構(gòu)。2、在清洗劑中，聚乙二醇也用作懸浮劑和增稠劑。3、聚乙二醇廣泛用于多種藥物制劑，如注射劑、局部用制劑、眼用制劑、口服和直腸用制劑。4、聚
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