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2021
07-23

丙酮酸鈉培養(yǎng)基在醫(yī)學(xué)臨床中的價值
丙酮酸鈉培養(yǎng)基是生物體系中重要的有機小分子，在三大物質(zhì)代謝中起重要的樞紐作用。丙酮酸鈉是常見的丙酮酸鹽，別名焦葡萄酸鈉、丙酮酸鈉鹽，分子式為CaH，Na03，是一類內(nèi)源性小分子化合物，其應(yīng)用領(lǐng)域主要包括用作醫(yī)藥原料及食品添加劑；測定乳酸脫氫酶（LDH）的底物及肝功能試驗中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性；用作健身和減肥膳食的補充劑等。丙酮酸鈉溶液有其*的優(yōu)勢：它不僅“治標”，還針對性地“提高細胞缺氧耐受性和增強氧化代謝”，相當程度上抑制和逆轉(zhuǎn)原發(fā)病的發(fā)展，起到“治本”的作用。丙酮酸鈉在體內(nèi)的代謝速度很快，既可以
2021
07-16

【實驗指南】細胞合成培養(yǎng)基的配制步驟及注意事項
雖然各種培養(yǎng)基的組成各有不同，但商品化的干粉型培養(yǎng)基的配制方法大同小異。絕大多數(shù)合成培養(yǎng)基的生產(chǎn)都已標準化、商品化，較為常用的培養(yǎng)基可在市場上購得。這種干粉型培養(yǎng)基性質(zhì)穩(wěn)定，便于儲存、運輸，價格便宜，為使用和配制合成培養(yǎng)基帶來很大方便。特殊需求也多可在現(xiàn)有合成培養(yǎng)基基礎(chǔ)上補加或調(diào)整某些成分予以滿足。以往實驗室自購各個組分，稱量后再按一定順序進行溶解配制的老方法，一方面需購置大量各種各樣的成分，而且每種成分用量很少，很難控制和統(tǒng)一；另一方面要精確稱量，順序溶解，步驟繁瑣，質(zhì)量難以保證。因此，自行配
2021
07-08

細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細胞中使用
細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是化學(xué)組成比較復(fù)雜的液體培養(yǎng)基。合適的培養(yǎng)基可支持細胞多次傳代培養(yǎng)。標準的培養(yǎng)基成分包括鹽、碳水化合物、維生素、氨基酸、生長因子、代謝的前體物質(zhì)、激素和微量元素組成。不同細胞系對營養(yǎng)的需求不同，因而有許多不同的培養(yǎng)基配方。絕大多細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle'sMEM的混合物，其中含有13種必需氨基酸、8種維生素。而Ham/sF12也包括非需要氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)
2021
06-07

胎牛血清能夠用在科研，生物技術(shù)等控制領(lǐng)域
胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細胞培養(yǎng)中，應(yīng)用很廣泛。比如，能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。血清是血液凝固后的液體部分，不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等，含有多種對細胞生長需要的營養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是血清主要成分。此外，重要的是，胎牛血清中含有大量對細胞生長需要的生長因子，也含有一些小分子物質(zhì)，如氨基酸、糖類、脂類及激素類物質(zhì)。胎牛血清采血：1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛，經(jīng)剖腹獲取小牛。2、將小牛清洗干凈后，側(cè)放在萬級潔凈房間內(nèi)的采血臺上
2021
05-24

磷酸鹽緩沖液作為常用緩沖劑的原因是什么？
磷酸鹽緩沖液使用中的注意事項：不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分，如，氨-氯化銨中的氨酷酸-醋酸鈉中的醋酸?，F(xiàn)在，不少實驗室引入了定量加液器，用定量加液器加試劑，具有簡便準確誤差恒定的特點，特別是在做成批樣品時更顯出它的*性，不少同志也喜歡用它來加緩沖液，但是，應(yīng)注意緩沖液不能長久存放在定量加液器中，因該器皿不密閉，易造成氨的揮發(fā)（醋酸-醋酸鈉緩沖液中的醋酸也同理），從而，導(dǎo)致溶液失效，正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制，使用后及時密閉并置于低溫中保存。當往某些溶液中加入一定量的酸和堿時，有阻礙溶液pH變化
2021
05-11

非洲綠猴腎細胞在醫(yī)藥研究中廣泛應(yīng)用
Vero細胞來源于非洲綠猴腎細胞，被成功的用來培養(yǎng)狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗，在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻，在醫(yī)藥研究中廣泛應(yīng)用。形態(tài)：上皮細胞生長特性：貼壁注釋：該細胞是日本千葉大學(xué)的Y.Yasumura和Y.Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養(yǎng)出來的。培養(yǎng)液：MEM（含2mML-谷氨酰胺和Earle'sBSS，1.5g/LNaHCO3,0.1mM非需氨基酸,1.0mM丙酮酸鈉），10%胎牛血清傳代：吸去培養(yǎng)液。用0.25%(w/v)Trypsin
2021
04-14

細胞系的用途有哪些？
細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后所繁殖的細胞群體，也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞?，F(xiàn)在細胞系廣泛的應(yīng)用于科學(xué)研究和藥物生產(chǎn)，用途包括：1、科學(xué)研究：藥物研究開發(fā)與基礎(chǔ)研究藥物研究與開發(fā)（1）新藥篩選：如化學(xué)合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。（2）疫苗研究與開發(fā)：如病毒性疫苗的研究與開發(fā)（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。（3）基因工程藥物研究與開發(fā)：如干擾素研究與開發(fā)，細胞生長因子研究與開發(fā)等。（4）細胞工程藥物研究與開發(fā)：生物活性多肽研究與開發(fā)，人參皂甙、紫杉醇
2021
04-07

原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞接近和最能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。原代細胞的培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是從供體取得組織細胞在體外進行的*培養(yǎng)，是建立細胞系的首步，是一項基本技術(shù)。原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：①組織塊培養(yǎng)法組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。②消化培養(yǎng)法③懸浮細胞培養(yǎng)法對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、
2021
04-07

原代細胞的取材和分類方法
將動物機體的各種組織從機體中取出，經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養(yǎng)。原代細胞培養(yǎng)的步驟一般是：取材→分離→培養(yǎng)和維持，今天我們重點介紹原代細胞的取材和分離方法。一、取材人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。取材的基本要求：①取材要注意新鮮和保鮮②應(yīng)嚴格無菌③防止機械損傷④去除無用組織和避免干燥⑤應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等⑥作好記錄各類組織的取材
2021
04-07

原代細胞的復(fù)蘇步驟
細胞一般儲存在液氮中，溫度達-196℃，理論上儲存時間是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。細胞復(fù)蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細胞恢復(fù)到一般的生長狀態(tài)，今天我們來看看原代細胞的復(fù)蘇步驟。一、檢查收到細胞株包裹時，請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請立即處理告訴寄方。細胞株請盡速開始培養(yǎng)，或立即冷凍保存(置于–70°C，隔夜后，移到liqN2)。二、冷凍細胞解凍1、依據(jù)細胞株說明書規(guī)定的基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它規(guī)定之成份和比例，制備培
2021
04-07

原代細胞傳代方法有哪幾種？
原代細胞是指從機體的組織（如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等）經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞，稱為原代細胞。一股認為，培養(yǎng)的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細抱培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞瘍變、細胞工程等問題的研究。那么關(guān)于原代細胞的傳代培養(yǎng)，我們應(yīng)該怎么做呢?一股有以下兩種方法：一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白鱷或與EDTA混合液）輕輕接動

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