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2023
02-15

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞細(xì)胞簡(jiǎn)介
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞細(xì)胞簡(jiǎn)介：大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織得到，視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視維、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)從狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)抱。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較
2023
02-13

如何正確使用無(wú)血清凍存液凍存MG63細(xì)胞？
細(xì)胞基本信息細(xì)胞名稱：MG63(人骨肉瘤細(xì)胞)細(xì)胞別稱：M-G63；MG63細(xì)胞貨號(hào)：SNL-229生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳(CO2)，5%細(xì)胞簡(jiǎn)介：MG63細(xì)胞是從一名患有骨肉瘤的14歲白人男性患者的左股骨中分離出來(lái)成纖維細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞，表達(dá)TGF-βRI、TGF-βRII，使用聚肌苷-多肽酸、環(huán)己酰亞胺和放線菌素D可以誘導(dǎo)MG63細(xì)胞產(chǎn)生大量干擾素。MG63細(xì)胞可以用于3D細(xì)胞培養(yǎng)，也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。MG63細(xì)胞正常生長(zhǎng)
2023
02-07

TF-1細(xì)胞中為什么要加刺激因子GM-CSF？
細(xì)胞基本信息細(xì)胞名稱：TF-1(人紅白血病細(xì)胞)細(xì)胞別稱：TF1;MFD-1細(xì)胞貨號(hào)：SNL-222生長(zhǎng)特性：懸浮培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+2ng/mLGM-CSF+1%P/S培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳(CO2)，5%細(xì)胞簡(jiǎn)介：TF-1細(xì)胞是由Kitamura·T等人于1987年建立，源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本，該患者具有嚴(yán)重的全血細(xì)胞減少癥。TF-1細(xì)胞生長(zhǎng)依賴于IL-3或GM-CSF，對(duì)IL-5無(wú)反應(yīng)。多種淋巴因子和細(xì)胞因子對(duì)TF-1細(xì)胞都有作用，如：IL-1、
2022
12-10

抗生素的幾大分類
抗生素是指由微生物(包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬)或高等動(dòng)植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其他活性的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物，能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。臨床常用的抗生素有微生物培養(yǎng)液中的提取物以及用化學(xué)方法合成或半合成的化合物。按照其化學(xué)結(jié)構(gòu)，抗生素可以分為：喹諾酮類抗生素、β-內(nèi)酰胺類抗生素、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類抗生素等。而按照其用途，抗生素可以分為抗細(xì)菌抗生素、抗真菌抗生素、抗腫瘤抗生素、抗病毒抗生素、畜用抗生素、農(nóng)用抗生素及其他微生物藥物(如麥角菌產(chǎn)生的具有藥理活性的麥角堿類，有收
2022
11-29

原代細(xì)胞的培養(yǎng)
原代細(xì)胞是接近和最能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于藥物敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。原代細(xì)胞的培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的第一步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。常用的原代細(xì)胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊
2022
10-28

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)4大常用合成培養(yǎng)基
體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞已經(jīng)有近百年的歷史，但該技術(shù)真正得以廣泛應(yīng)用及各種類型組織細(xì)胞大量體外培養(yǎng)成功是由于適合細(xì)胞體外生長(zhǎng)需要的合成培養(yǎng)基的問世。合成培養(yǎng)基是對(duì)細(xì)胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件下的模擬。這種模擬不是被動(dòng)的、不加選擇的，而是在體外反復(fù)實(shí)驗(yàn)和篩選，進(jìn)行強(qiáng)化和重新組合后形成的人工合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基種類很多，據(jù)報(bào)道已有數(shù)十種，每種合成培養(yǎng)基最初都是為培養(yǎng)某種細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，但應(yīng)用后發(fā)現(xiàn)其他細(xì)胞也可以生長(zhǎng)或經(jīng)改良也適合其他細(xì)胞的生長(zhǎng)。01199培養(yǎng)基199培養(yǎng)基是Morgan、Mo
2022
10-27

293細(xì)胞該如何進(jìn)行復(fù)蘇？
293細(xì)胞的另一生長(zhǎng)特性是貼壁所需時(shí)間長(zhǎng)且貼壁不牢。細(xì)胞冷凍后復(fù)蘇時(shí),都有不同程度的腫脹,若以50ml培養(yǎng)瓶待細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底的70%～80%時(shí)消化凍存,復(fù)蘇時(shí)將其全部接種至2個(gè)50ml瓶中時(shí)較為合適。剛復(fù)蘇的293貼壁很慢，復(fù)蘇接種后24小時(shí)內(nèi),應(yīng)盡量減少觀察細(xì)胞次數(shù)或不作觀察,以免因晃動(dòng)而影響細(xì)胞貼壁。復(fù)蘇后48小時(shí)左右觀察貼壁情況并進(jìn)行更換培養(yǎng)基比較合適,如果用一次性塑料培養(yǎng)瓶可增加細(xì)胞貼壁牢度。換液前宜將培養(yǎng)基預(yù)熱。293細(xì)胞傳代：倒去廢液，PBS洗一次(輕)，用0.02%EDTA與0.25
2022
10-25

你了解細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基嗎？
細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基其工作基礎(chǔ)是用合適的激索、營(yíng)養(yǎng)物和促貼壁的物質(zhì)的組合置換培養(yǎng)基中的成分，專門用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)，它的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、黃體酗、腐胺和硒。胰島索和胰島索樣生長(zhǎng)因子對(duì)于大多數(shù)類型細(xì)胞的存活和生長(zhǎng)有巫要作用，硒是谷胱甘肽產(chǎn)生的合作因子，可能有助于過氧化物和超氧化物的水解，有報(bào)道說還能防止細(xì)胞的光照損傷。隨后的其他配方如N1N3則含有較低濃度的轉(zhuǎn)鐵蛋白。未料到的是上述配方構(gòu)成的培養(yǎng)基可以支持神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系快速增殖，隨后又發(fā)展了能支持原代
2022
10-21

動(dòng)物細(xì)胞分離培養(yǎng)移液器的標(biāo)準(zhǔn)使用步驟
尚恩生物動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室一般采用吸管吸取、移動(dòng)液體或滴加樣品，取少量或微量液體則采用移液器（加樣器）。吸管主要分為刻度吸管、無(wú)刻度吸管?？潭任苤饕糜谖?、轉(zhuǎn)移液體，常用的有1mL、2mL、5mL、10mL等規(guī)格。無(wú)刻度吸管又有直頭吸管和彎頭吸管之分。彎頭吸管除可作吸取、轉(zhuǎn)移液體外，還常用于吹打、混勻及傳代細(xì)胞。移液器（加樣器），俗稱移液槍，用于吸取移動(dòng)液體或滴加樣品，移液槍可根據(jù)需要調(diào)節(jié)量的大小，吸量準(zhǔn)確、方便。特別是微量移液槍，可使實(shí)驗(yàn)樣品或試劑取量準(zhǔn)確，重復(fù)性好。當(dāng)，有可高溫消毒、多通道的
2022
10-20

原代細(xì)胞復(fù)蘇操作
一、準(zhǔn)備材料(1)儀器：凈化工作臺(tái)、離心機(jī)、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱(2)玻璃器皿：吸管(彎頭、直頭)、培養(yǎng)瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、廢液缸(3)塑料器皿：吸頭、槍頭、膠塞、移液管(10ml)、15ml離心管、凍存管(1～2ml)(4)其他物品：微量加樣槍、紅血球計(jì)數(shù)板、記號(hào)筆、醫(yī)用橡皮膏、移液槍(5)試劑：PBS、小牛血清、培養(yǎng)液、雙抗(青霉素、鏈霉素)、胰蛋白酶(0.08%)二、操作步驟(1)原代細(xì)胞從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時(shí)搖動(dòng)令其
2022
10-14

解析：細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的原因
就一個(gè)實(shí)驗(yàn)室而言無(wú)論運(yùn)作的多么好，總會(huì)因?yàn)楦镄录夹g(shù)或拓展方向二影響原來(lái)的流程，從而產(chǎn)生各種各樣的問題。有些地方錯(cuò)誤的操作有可能帶來(lái)嚴(yán)重的后果，那么今天主要列舉細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的兩大原因。01培養(yǎng)體系出現(xiàn)問題01檢查你所培養(yǎng)的細(xì)胞是否存在污染。（1）如果培養(yǎng)細(xì)胞未添加抗生素，細(xì)胞污染則是不可避免的。①用肉眼和顯微鏡進(jìn)行檢查。②如果細(xì)胞被污染則要棄掉。（2）由于支原體污染不容易覺察到，因此必須定期檢測(cè)。（3）檢測(cè)可能污染的途徑和原因。02檢查你用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基和血清（例如：是否批次不同或廠商不同）。
2022
09-27

vero細(xì)胞易于培養(yǎng)，適合大規(guī)模生產(chǎn)
vero細(xì)胞是非洲綠猴腎細(xì)胞，該細(xì)胞易于培養(yǎng)，適合大規(guī)模生產(chǎn)。這種細(xì)胞(作為人用疫苗的細(xì)胞基質(zhì)是安全可靠的)已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織推薦為生產(chǎn)人用疫苗的理想細(xì)胞基質(zhì)。疫苗在全國(guó)范圍推廣使用后，對(duì)降低發(fā)病，保護(hù)免疫者不發(fā)病，起了非常明顯的作用，但是由于疫苗沒有經(jīng)過濃縮和提純，二針免疫后，僅有60%的保護(hù)，而且疫苗注射后時(shí)有過敏反應(yīng)發(fā)生。新的Vero細(xì)胞乙腦疫苗抗體的有效率達(dá)90%以上。目前，國(guó)際上生產(chǎn)和使用的乙腦疫苗有兩種，一種是用小白鼠腦組織培養(yǎng)乙腦病毒，另一種是用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)乙腦病毒。但這兩種疫苗
2022
09-19

胎牛血清正確的保存方法
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料，經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過濾后而成。所以胎牛血清是品質(zhì)也高，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。胎牛血清保存方法：1、需要長(zhǎng)期保
2022
09-16

6步教你動(dòng)物細(xì)胞如何培養(yǎng)？
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為當(dāng)今生命科學(xué)各領(lǐng)域的基礎(chǔ)技術(shù)和基本技能，它也是細(xì)胞工程、基因工程和生物醫(yī)學(xué)工程的重要研究手段。那我們?cè)趯?shí)際的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中需要注意哪些基本要求呢？1實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)前必須分門別類地制訂操作卡片，如清洗卡、消毒卡、細(xì)胞常用液（細(xì)胞培養(yǎng)液、BSS液、消化液）配制卡、牛血清檢測(cè)分裝卡、細(xì)胞原代和傳代操作卡等。各卡片上注明實(shí)驗(yàn)所需器材的名稱、規(guī)格、數(shù)量、操作要領(lǐng)和實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)等。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)按卡片收集、清點(diǎn)所需用品，一并放入超凈臺(tái)內(nèi)，這樣可避免操作時(shí)因物品不全而往返拿取所浩成的污染。同
2022
09-13

抗生素的作用及如何正確使用抗生素！
抗生素的作用：抗生素不僅能殺滅細(xì)菌，而且對(duì)霉菌、支原體、衣原體等其它致病微生物也有良好的抑制和殺滅作用。抗生素可以是某些微生物生長(zhǎng)繁殖過程中產(chǎn)生的一種物質(zhì)，用于治病的抗生素除由此直接提取外，還有*用人工合成或部分人工合成的。通俗地講，抗生素就是用于治療各種細(xì)菌感染或其以致病微生物感染的藥物。怎樣正確使用抗生素：1、病毒性疾病不宜用抗生素治療。上呼吸道感染以及咽痛、咽峽炎，大部分是病毒感染所致，因此這類疾病無(wú)需抗生素而應(yīng)使用病毒靈、病毒脞等抗病*藥物以及中草藥治療。2、新生兒、老年人和肝腎功能不全
2022
08-26

磷酸鹽緩沖液是無(wú)機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念
什么是緩沖溶液？緩沖液(Buffersolution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對(duì)所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對(duì)，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。磷酸鹽緩沖液是無(wú)機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念，分析測(cè)試中，在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的，
2022
08-19

一文帶您詳細(xì)了解大鼠原代細(xì)胞
大鼠原代細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)選用體重200g的SD大鼠，用胰酶代替膠原酶進(jìn)行肝臟灌注，分離得到的肝細(xì)胞存活率大于90%，且純度很高。其中，胰酶的濃度很重要，濃度過低肝細(xì)胞消化不*，導(dǎo)致雜細(xì)胞和結(jié)締組織很多；過高則對(duì)肝細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，影響存活率。經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)得出胰酶的濃度為0.18%，且灌流時(shí)維持溫度37℃。另外，接種密度也是影響肝細(xì)胞存活率的一個(gè)重要因素，該試驗(yàn)采用細(xì)胞密度為6×105個(gè)/mL。細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，既能保證細(xì)胞活率，又能滿足下一步試驗(yàn)要求。肝細(xì)胞接種4h后，需用滴管輕吹換液，去除雜細(xì)胞及未貼壁
2022
08-19

動(dòng)物細(xì)胞分離培養(yǎng)準(zhǔn)備工作
動(dòng)物細(xì)胞分離培養(yǎng)是用無(wú)菌操作的方法將動(dòng)物體內(nèi)的組織（或器官）取出，模擬動(dòng)物體內(nèi)的生理?xiàng)l件，在體外進(jìn)行培養(yǎng)，人們借以觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和細(xì)胞分化以及細(xì)胞凋亡或死亡的過程。因?yàn)榉蛛x的細(xì)胞沒有免疫防御系統(tǒng)，所以動(dòng)物細(xì)胞分離操作需要比外科手術(shù)更加嚴(yán)格的無(wú)菌操作，無(wú)菌操作的原則就是保證細(xì)胞分離過程中的操作環(huán)境，使用的器械、耗材以及試劑無(wú)菌。硬/件/準(zhǔn)/備01儀器：超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、倒置顯微鏡、培養(yǎng)箱、冰箱、高壓蒸汽消毒裝置、移液器。02器械：止血鉗、手術(shù)刀、眼科剪、手術(shù)剪、鑷子、細(xì)胞過濾篩等。所有器械
2022
08-12

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞通過去泛素化和穩(wěn)定ＫＬＦ４抑制非小細(xì)胞肺癌
今天我們來(lái)看看一篇關(guān)于非小細(xì)胞肺癌的文獻(xiàn)，首先還是了解下背景。肺癌是世界上普遍認(rèn)為的死亡率最高的癌癥，沒有之一。肺癌中約有８５％是非小細(xì)胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）。據(jù)報(bào)道，早期肺癌患者５年存活率為７０％，晚期患者５年存活率不高于２０％。在如此高死亡率的情況下，找到新的靶標(biāo)分子對(duì)探索ＮＳＣＬＣ治療有非凡意義。之前的研究發(fā)現(xiàn)，泛素化涉及包括癌癥在內(nèi)的多種疾病，被認(rèn)為是潛在的治療靶點(diǎn)。ＯＴＵＤ１作為泛素酶的一員，是由４８１個(gè)氨基酸組成的，與影響諸多分子的各種生理功能有關(guān)。在乳腺癌、胰管腺癌、甲狀腺癌等均有相
2022
07-26

293細(xì)胞正確的培養(yǎng)步驟
293細(xì)胞被用于腺病毒載體的繁殖。利用病毒進(jìn)化目標(biāo)基因并將其轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中是一種有效的方法。然而，由于病毒作為病原體的特性，它們也會(huì)帶來(lái)風(fēng)險(xiǎn)。因此，為了繁殖這種病毒載體，需要一種能夠表達(dá)缺失基因的細(xì)胞系。不僅具有生成人糖基化譜和建立調(diào)控記錄的能力，而且具有多種優(yōu)勢(shì)，是一種特別有吸引力的重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)。293細(xì)胞培養(yǎng)步驟：一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將

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