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2025
04-21

關(guān)于原代細(xì)胞？看這一篇就夠了！
一、原代細(xì)胞的定義原代細(xì)胞（primaryculturecell）是指從機(jī)體的組織（如人源組織、鼠源組織和兔源組織等）經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的初始細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞相比較細(xì)胞系遺傳物質(zhì)未改變，更能反應(yīng)機(jī)體原有的特性,用于科學(xué)研究時(shí)更具有針對(duì)性和說服力。原代細(xì)胞生長緩慢，一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。研究中常用的細(xì)胞
2025
04-07

細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死有什么區(qū)別
細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死是細(xì)胞死亡的兩種不同形式，它們?cè)谛螒B(tài)學(xué)、發(fā)生機(jī)制、生物學(xué)意義等方面存在顯著區(qū)別。以下是兩者的詳細(xì)比較：一、形態(tài)學(xué)區(qū)別細(xì)胞凋亡：細(xì)胞膜：保持完整性，不破裂。細(xì)胞質(zhì)：濃縮，細(xì)胞器緊密聚集。細(xì)胞核：固縮，染色質(zhì)邊緣化，形成凋亡小體。凋亡小體：最終會(huì)被周圍的吞噬細(xì)胞吞噬清除，不引發(fā)炎癥反應(yīng)。細(xì)胞壞死：細(xì)胞膜：破裂，細(xì)胞內(nèi)容物外泄。細(xì)胞質(zhì)：腫脹，細(xì)胞器溶解。細(xì)胞核：溶解或碎裂。炎癥反應(yīng)：細(xì)胞壞死會(huì)釋放細(xì)胞內(nèi)容物，引發(fā)周圍組織的炎癥反應(yīng)。二、發(fā)生機(jī)制區(qū)別細(xì)胞凋亡：主動(dòng)過程：由基因控制的細(xì)胞
2025
03-27

百問百答 | 細(xì)胞有小黑點(diǎn)，是碎片還是污染？
各位奮戰(zhàn)在科研前線的戰(zhàn)友們，你們是否曾在凌晨三點(diǎn)的細(xì)胞房里，在顯微鏡下盯著細(xì)胞培養(yǎng)瓶里可疑的那些小黑點(diǎn)，糾結(jié)這到底是細(xì)胞碎片還是污染，這細(xì)胞還能做實(shí)驗(yàn)嗎？事實(shí)上，細(xì)胞碎片和微生物污染都有其明顯的特征，了解這些特征，我們就能夠簡(jiǎn)單有效地將它們區(qū)分開。01細(xì)胞內(nèi)黑點(diǎn)和細(xì)胞外黑點(diǎn)的區(qū)分細(xì)胞內(nèi)黑點(diǎn)：首先需要明確的是，細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒既不是碎片也不是污染，是細(xì)胞器及細(xì)胞外分泌泡，屬于細(xì)胞自身的結(jié)構(gòu)及特性。不同類型的細(xì)胞，胞內(nèi)顆粒的數(shù)量可能不同。培養(yǎng)條件也會(huì)影響細(xì)胞內(nèi)顆粒的數(shù)量。▲細(xì)胞內(nèi)黑色顆粒為自身結(jié)構(gòu)特
2025
03-04

手把手教學(xué)！慢病毒轉(zhuǎn)染實(shí)操超全攻略來了!
上兩期我們講了細(xì)胞轉(zhuǎn)染以及慢病毒轉(zhuǎn)染的相關(guān)內(nèi)容，這期我們繼續(xù)為大家介紹慢病毒轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)操作、注意事項(xiàng)以及常見問題。一慢病毒實(shí)驗(yàn)步驟慢病毒的實(shí)驗(yàn)流程大致分為：質(zhì)粒構(gòu)建—病毒包裝—病毒收集與濃縮—感染靶細(xì)胞—篩選與驗(yàn)證1質(zhì)粒構(gòu)建構(gòu)建重組質(zhì)粒，將外源目的基因片段插入質(zhì)粒載體，得到重組質(zhì)粒，在大腸桿菌內(nèi)轉(zhuǎn)化，并抽提得到重組質(zhì)粒DNA。2病毒包裝將重組質(zhì)粒DNA和其他包裝質(zhì)粒按照說明書的一定比例一起共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，48小時(shí)、72小時(shí)分別收獲含病毒的上清。3病毒收集濃縮收集的含病毒上清3000rpm離心
2025
03-04

腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的的分離方法有哪些？
腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離方法主要包括酶消化法和機(jī)械刮脫法，以下是具體的操作步驟：一、酶消化法材料準(zhǔn)備：無菌溶液：所有用于培養(yǎng)的溶液都需在37℃水浴中預(yù)熱。血管選擇：通常選擇新鮮的腦靜脈血管，確保血管無損傷、無凝血阻塞。血管處理：將血管放入含有抗生素(如青霉素和鏈霉素)的D-Hanks液中。在血管兩端插入磨平的注射器針頭并用絲線扎緊。用注射器從一端注入D-Hanks液沖洗血管，直至流出的液體無血跡。酶消化：注入適量的膠原酶溶液(濃度通常為0.1%)，使血管充盈。將血管放入37℃無菌的D-Hanks
2025
02-14

兔海綿體平滑肌細(xì)胞可以用于哪些研究呢
兔海綿體平滑肌細(xì)胞在研究中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，特別是在男性生殖健康、勃起功能障礙(ED)機(jī)制探索以及新藥研發(fā)等領(lǐng)域。以下是對(duì)兔海綿體平滑肌細(xì)胞可用于的研究方向的詳細(xì)歸納：一、男性生殖健康研究兔海綿體平滑肌細(xì)胞作為勃起組織的主要成分，其結(jié)構(gòu)和功能的完整性對(duì)于維持正常的勃起功能至關(guān)重要。因此，研究兔海綿體平滑肌細(xì)胞可以深入了解男性生殖健康的生理和病理機(jī)制，為相關(guān)疾病的預(yù)防和治療提供理論基礎(chǔ)。二、勃起功能障礙(ED)機(jī)制探索受體與信號(hào)傳導(dǎo)研究：兔海綿體平滑肌細(xì)胞含有豐富的腎上腺素能受體、膽堿能受體等多
2025
02-10

磷酸鹽緩沖液有哪些用途
磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferedSaline，簡(jiǎn)稱PBS)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和化學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的用途。以下是一些主要的用途：細(xì)胞培養(yǎng)：PBS作為細(xì)胞培養(yǎng)基的組成部分，為細(xì)胞提供一個(gè)穩(wěn)定且適宜的生存環(huán)境。在細(xì)胞傳代、換液和收獲等操作中，PBS常用于洗滌細(xì)胞，以去除殘留的血清、培養(yǎng)基或藥物等物質(zhì)。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：在各種生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，PBS作為稀釋液、洗滌液和反應(yīng)液，用于準(zhǔn)備樣品、洗滌實(shí)驗(yàn)器材和維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿平衡。在流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡等檢測(cè)方法中，PBS用于稀釋抗體、熒光染料等試劑，并
2025
02-06

細(xì)胞復(fù)蘇失敗原因分析——復(fù)蘇篇
細(xì)胞復(fù)蘇成敗和凍存及復(fù)蘇操作密切相關(guān)。上個(gè)星期和大家分享了細(xì)胞凍存方面容易出錯(cuò)的細(xì)節(jié)，詳見《細(xì)胞復(fù)蘇失敗原因分析——凍存篇》。本篇主要從復(fù)蘇角度分析，排查復(fù)蘇過程中容易出現(xiàn)的問題。復(fù)蘇步驟同樣，我們先復(fù)習(xí)一下復(fù)蘇步驟：1.提前將水浴鍋預(yù)熱至37℃，培養(yǎng)基復(fù)溫，離心機(jī)設(shè)置好轉(zhuǎn)速；2.準(zhǔn)備一個(gè)15ml離心管并加入適量培養(yǎng)基。3.取出凍存管，浸入水浴鍋迅速搖晃使細(xì)胞在2min內(nèi)充分融化；4.將細(xì)胞懸液緩慢滴入提前加了培養(yǎng)基的離心管，1000rpm3min離心；5.棄上清，重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)器皿中，放
2025
02-06

細(xì)胞復(fù)蘇失敗原因分析——凍存篇
最近經(jīng)常有同學(xué)和小尚反映細(xì)胞復(fù)蘇不起來，復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)常規(guī)操作，但其中有諸多細(xì)節(jié)容易被忽視，復(fù)蘇成敗和凍存、復(fù)蘇操作都密切相關(guān)，稍不注意就可能一失足成千古恨。本篇主要從凍存角度進(jìn)行分析，下周將更新復(fù)蘇操作的原因排查，歡迎同學(xué)們收藏追更~我們先復(fù)習(xí)一下凍存步驟：1.提前準(zhǔn)備好凍存液備用；2.離心獲得細(xì)胞沉淀后，加凍存液輕輕重懸細(xì)胞；3.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移入凍存管；4.如果使用程序凍存液，將凍存管放進(jìn)程序凍存盒，放入-80℃冰箱過夜后液氮保存。如果使用非程序凍存液，則無需凍存盒。?凍存常見的錯(cuò)誤操
2024
12-23

胎牛血清需要滅活嗎？
關(guān)于是否應(yīng)對(duì)胎牛血清進(jìn)行熱滅活處理一直存在爭(zhēng)議。血清滅活起源于20世紀(jì)70年代之前，在過去并未有人質(zhì)疑滅活的必要性，滅活一直是默認(rèn)的常規(guī)操作。然而越來越多的證據(jù)表明，血清熱滅活對(duì)細(xì)胞并沒有顯著的正面作用。隨著研究者們對(duì)血清的理解加深以及胎牛血清生產(chǎn)工藝的不斷進(jìn)步，如今熱滅活不再是必選項(xiàng)。什么是滅活血清熱滅活是指將溶解狀態(tài)的血清置于56℃水浴加熱30min。滅活的主要目的是為了去除血清中的補(bǔ)體成分或者支原體等病原體。什么是補(bǔ)體補(bǔ)體是存在于動(dòng)物血液與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì)，它們可輔
2024
12-16

血清沉淀大揭秘：沉淀類型與應(yīng)對(duì)策略
血清中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，包括各種蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，其中一些物質(zhì)在特定的條件下容易形成沉淀。無論血清產(chǎn)地、品質(zhì)如何，血清凍融后產(chǎn)生沉淀是無法避免的，因此各類血清以及含有血清的產(chǎn)品都可能會(huì)產(chǎn)生沉淀。血清沉淀類型血清中的沉淀主要為兩類：一類是絮狀沉淀，這是血清中的纖維蛋白原在解凍過程中轉(zhuǎn)化成纖維蛋白而形成的，絮狀物較大時(shí)肉眼可見?！w維蛋白絮狀沉淀一類是白色顆粒樣沉淀，主要是血清中的磷酸鈣的析出。也有部分脂蛋白、膽固醇、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白等一些脂質(zhì)或蛋
2024
12-09

純正血源，嚴(yán)格質(zhì)量把控——尚恩生物血清系列產(chǎn)品
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用歷史可以追溯到上世紀(jì)50年代。當(dāng)時(shí)的研究人員就已經(jīng)認(rèn)識(shí)到血清對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)的重要性，并將其作為添加物加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中，取得了較好的培育效果。血清是天然混合物，其中成分復(fù)雜，對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)過程具有多種促進(jìn)作用，血清應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)極大促進(jìn)了包括細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、生物醫(yī)藥、疫苗生產(chǎn)等學(xué)科及領(lǐng)域的發(fā)展，同時(shí)技術(shù)的發(fā)展也促進(jìn)了血清生產(chǎn)技術(shù)、成分研究的發(fā)展，血清品質(zhì)也越來越好。目前動(dòng)物血清應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)主要集中于牛血清，包括胎牛血清、新生牛血清、小牛血清等，還有其他動(dòng)物血清如馬血清
2024
12-02

配制PBS磷酸鹽緩沖液的具體步驟
配制PBS磷酸鹽緩沖液的具體步驟如下：一、準(zhǔn)備材料與設(shè)備材料：NaCl(氯化鈉)KClNa2HPO4(磷酸氫二鈉，注意根據(jù)結(jié)晶水的不同選擇適當(dāng)重量)KH2PO4(磷酸二氫鉀)去離子水設(shè)備：磁力攪拌器燒杯(至少兩個(gè)，一個(gè)用于溶解，一個(gè)用于定容)轉(zhuǎn)子量筒(用于精確測(cè)量液體體積)微波爐或水浴鍋(用于加熱去離子水)稱量天平pH計(jì)(可選，用于精確調(diào)整pH值)0.22微米濾器(用于無菌過濾，可選)二、配制步驟清洗與準(zhǔn)備：清洗干凈所有將要用到的燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒，確保無雜質(zhì)殘留。預(yù)熱與溶解：向一個(gè)燒杯中加入約1
2024
11-25

細(xì)胞“罷工”？！細(xì)胞傳代后增殖緩慢之謎！
培養(yǎng)箱里，我們的“小勞?！奔?xì)胞們每天忙著分裂增殖，為我們的實(shí)驗(yàn)貢獻(xiàn)著力量。然而，有時(shí)候，這些小家伙們卻會(huì)突然“罷工”，傳代后的增殖速度變得慢如蝸牛，仿佛一夜之間愛上了慢生活。這背后究竟是什么原因呢？怎樣才能讓細(xì)胞們恢復(fù)干勁呢？請(qǐng)看下文：接種密度低你知道嗎？很多細(xì)胞都有密度依賴。細(xì)胞自身會(huì)分泌一些因子到培養(yǎng)基中促進(jìn)周圍的細(xì)胞生長（旁分泌）。細(xì)胞密度太低，這種化學(xué)信號(hào)的傳遞減弱，細(xì)胞狀態(tài)受到影響。接種密度越低，增殖越慢，甚至不增殖。解決方案：根據(jù)細(xì)胞生長速度確定合適的傳代比例和接種密度。如果細(xì)胞已經(jīng)
2024
11-05

SiHa細(xì)胞特征與應(yīng)用意義
SiHa細(xì)胞來源于一位55歲日本女性的原發(fā)性子宮組織樣本片段，是從其宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中建立起來的。這些細(xì)胞具有遺傳特性和豐富的細(xì)胞學(xué)特征，是研究宮頸癌和其他相關(guān)疾病的重要工具。細(xì)胞特性：形態(tài)與生長：SiHa細(xì)胞形態(tài)上呈上皮細(xì)胞樣，生長特性為貼壁生長。在電鏡下，可以觀察到細(xì)胞間典型的橋粒和細(xì)胞質(zhì)中豐富的張力絲。遺傳特性：SiHa細(xì)胞是一種超三倍體人類細(xì)胞系，模式染色體數(shù)為71，存在于24%的細(xì)胞中。大多數(shù)細(xì)胞的染色體數(shù)量分布在69到72之間。此外，SiHa細(xì)胞還整合了HPV16基因組，每個(gè)細(xì)胞中
2024
10-28

染色凋亡試劑盒在細(xì)胞凋亡研究中扮演著重要角色
染色凋亡試劑盒在細(xì)胞凋亡研究中扮演著重要角色，通過合理選擇和使用這些試劑盒可以更準(zhǔn)確地揭示細(xì)胞凋亡的機(jī)制和過程。染色凋亡試劑盒的使用注意事項(xiàng)：1.確保試劑新鮮有效：在使用之前，應(yīng)檢查所有試劑是否在有效期內(nèi)，并確保它們處于良好的狀態(tài)。過期或變質(zhì)的試劑可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.正確儲(chǔ)存試劑：根據(jù)試劑盒說明書的要求，將試劑儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)臏囟群蜅l件下。例如，某些試劑如TdT酶需要稀釋后當(dāng)天使用，并且對(duì)于不同的試劑要嚴(yán)格遵循存儲(chǔ)條件，如溫度和避光等要求，以保證其穩(wěn)定性和活性。3.避免交叉污染：在實(shí)驗(yàn)過
2024
10-23

染色凋亡試劑盒的應(yīng)用場(chǎng)景包括但不限于以下幾個(gè)方面
細(xì)胞凋亡，也稱為程序性細(xì)胞死亡，是一種基因調(diào)控的細(xì)胞自我毀滅過程，對(duì)于維持生物體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和功能平衡至關(guān)重要。在生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中，準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)胞凋亡狀態(tài)是了解疾病機(jī)制、評(píng)估治療效果以及進(jìn)行藥物篩選的關(guān)鍵步驟。染色凋亡試劑盒的應(yīng)用場(chǎng)景包括但不限于以下幾個(gè)方面：一、基礎(chǔ)科學(xué)研究在基礎(chǔ)科學(xué)研究中，染色凋亡試劑盒被用于深入探索細(xì)胞凋亡的機(jī)制。細(xì)胞凋亡是一種有序的、程序化的細(xì)胞自我毀滅過程，對(duì)于維持生物體的發(fā)育和健康至關(guān)重要。通過染色凋亡試劑盒，研究人員可以檢測(cè)和定量細(xì)胞凋亡，觀察凋亡細(xì)胞在形態(tài)和生
2024
10-08

黑膠蟲清除試劑的使用說明
黑膠蟲清除試劑含有特殊成分，能夠殺滅和抑制“黑膠蟲”的生長。這些試劑經(jīng)過了多種細(xì)胞的測(cè)試和長期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，對(duì)細(xì)胞無害，但對(duì)清除“黑膠蟲”污染效果很顯著。黑膠蟲清除試劑的使用說明：保存條件：黑膠蟲清除試劑通常需要保存在-20℃的環(huán)境中，避光保存，避免反復(fù)凍融。配制方法：根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)胞的特性，將黑膠蟲清除試劑配制成相應(yīng)的完全培養(yǎng)基。建議現(xiàn)配現(xiàn)用，以保證試劑的活性。稀釋比例：不同品牌的黑膠蟲清除試劑稀釋比例可能有所不同。例如，有的試劑推薦稀釋比例為1:200，即10mL的完全培養(yǎng)基加入50μL的清除試
2024
09-26

染色凋亡試劑盒在生物學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用
染色凋亡試劑盒在生物學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。它們可以用于研究細(xì)胞凋亡的機(jī)制、藥物篩選、疾病診斷和治療等領(lǐng)域。通過使用，研究人員可以更準(zhǔn)確地檢測(cè)和定量細(xì)胞凋亡，從而深入了解細(xì)胞死亡的調(diào)控機(jī)制，并為疾病的預(yù)防和治療提供新的策略，需要注意的是，其選擇應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和目標(biāo)來確定。不同的試劑盒可能適用于不同類型的細(xì)胞和凋亡標(biāo)志物。因此，在使用之前，研究人員應(yīng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書，并遵循正確的操作步驟，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。細(xì)胞凋亡是一種有序的、程序化的細(xì)胞自我毀滅過程，對(duì)于維持生物體的發(fā)育
2024
09-19

染色凋亡試劑盒的操作指南
染色凋亡試劑盒是用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)工具。它通常包含一組特定的染料和試劑，用于標(biāo)記和檢測(cè)細(xì)胞在凋亡過程中發(fā)生的特定變化。這些試劑盒通常基于不同的凋亡標(biāo)志物進(jìn)行設(shè)計(jì)，如DNA斷裂、膜聯(lián)蛋白V結(jié)合、線粒體膜電位變化等。細(xì)胞凋亡是一種程序性的細(xì)胞死亡過程，它在生物體的發(fā)育、組織更新和疾病防御中起著重要作用。凋亡過程涉及一系列生化和形態(tài)學(xué)的變化，包括細(xì)胞縮小、核濃縮、DNA斷裂和膜泡化等，其作用是通過特定的染料和試劑來檢測(cè)這些變化，從而確定細(xì)胞是否處于凋亡狀態(tài)。染色凋亡試劑盒的操作指南：-實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

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