国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

搜全站

19126518388

深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年
如何解決酶切切過頭的問題？2021/08/25
之前談到了酶切切不動(dòng)的問題。這一次，我們探討一下酶切的另外一端：酶切切過頭的問題。還是按照一貫的做法和思路，發(fā)現(xiàn)主要是兩個(gè)原因?qū)е碌?，解決辦法也是有的。一、酶切時(shí)間過長酶切時(shí)間過長的確有時(shí)候會(huì)對(duì)目的條帶有影響，因?yàn)槟阌玫拿缚赡軙?huì)有星號(hào)活性。那么什么叫星號(hào)活性呢？通俗一點(diǎn)講，就是酶不去切它該切的地方，瞎切一氣......酶切時(shí)間過長，會(huì)導(dǎo)致最后亂切。安培建議：雙酶切不要超過5小時(shí)。其實(shí)一般3-4小時(shí)足夠了。你應(yīng)該有提供給你酶的生物試劑公司的相應(yīng)的說明書的吧？上面都有寫明酶的活性和作用時(shí)間。現(xiàn)在的酶
【技術(shù)】酶切、酶切，切還是不切？2021/08/24
酶切，作為一種常用的分子克隆的手段，如果應(yīng)用得當(dāng)，可謂寶刀屠龍，無往而不利；如果應(yīng)用不當(dāng)，又會(huì)步步維艱。真是讓人歡喜讓人憂愁。酶切，最常見的問題就是切不動(dòng)和切過了。這些問題比較復(fù)雜。下面，先講一講切不動(dòng)的問題。切不動(dòng)可能的原因：1.酶不匹配解決的方法：如果是雙酶切A和B，預(yù)實(shí)驗(yàn)中必須做A和B各自的單酶切和A+B的雙酶切,好確認(rèn)這幾種酶都好用，質(zhì)粒上的切點(diǎn)都好用。2.體系的問題解決的方法：酶切盡量用大體系，如50ul、100ul等。大體系能稀釋內(nèi)切酶包裝中的甘油，對(duì)反應(yīng)有利。3.酶的量太少解決的方
瓊脂糖凝膠電泳、酶和試劑的使用等一些注意事項(xiàng)2021/08/24
基因克隆在發(fā)明后的32年，需求一直不斷增加，但是有些小伙伴的重組質(zhì)粒就是怎么樣都構(gòu)建不出來。其實(shí)，看似簡(jiǎn)單的傳統(tǒng)基因克隆，可是存在著重重陷阱！美國羅林斯研究中心（RollinsResearchCenter）IchiroMatsumura在一期的《BioTechniques》上分享了他的經(jīng)驗(yàn)：“WhyJohnnycan’tclone:Commonpitfallsａndnotsocommonsolutions.”小編今天就把核心的“姿勢(shì)”給大家提煉出來，主要是瓊脂糖凝膠電泳、酶（DNA聚合酶、限制性
DNA載體構(gòu)建——【干貨】三圖讓你秒懂質(zhì)粒圖譜2021/08/24
很多人拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜，第一反應(yīng)只能是仰天長嘯，這是什么玩意？這些ori、RBS、tet是什么鬼？這些箭頭代表什么，轉(zhuǎn)錄的方向嗎？為什么都不相同，不會(huì)“撞車”么？來，看幾張圖，上面的問題就能一一破解。第一步：先了解質(zhì)粒的基本組成元素。1）復(fù)制起始點(diǎn)Ori。該位點(diǎn)決定了質(zhì)粒的宿主及質(zhì)粒的拷貝數(shù)，它是質(zhì)粒中一段特定序列，富含AT和重復(fù)序列。Tips：圖譜上只有一個(gè)Ori，表示質(zhì)粒是原核克隆表達(dá)質(zhì)粒；有兩個(gè)Ori，則表示該質(zhì)粒是，穿梭質(zhì)粒，即可在原核也可在真核中復(fù)制。2）抗性篩選基因。圖譜中Kan/t
為什么不能用質(zhì)粒DNA抽提試劑來提取基因組DNA？2021/08/24
導(dǎo)讀為什么同樣抽提質(zhì)粒DNA的試劑不能用來抽提基因組DNA呢？差別很大么？要買兩種試劑盒真是麻煩啊！你還不要不相信，有小伙伴試過，還真沒抽提出來。今天小編就來和大家一起探究下原因！基因組DNA的抽提，一般不會(huì)用到質(zhì)粒抽提的試劑盒，究其原因是由于兩者的原理*不同。兩者不都是DNA抽提么？其實(shí)關(guān)鍵在于這兩者在實(shí)驗(yàn)的初始設(shè)計(jì)上就*不同。先給大家解釋一下質(zhì)粒抽提吧。質(zhì)粒抽提質(zhì)粒抽提通常用的是堿裂解法，一般的試劑盒都會(huì)有SolutionⅠ，SolutionⅡ，SolutionⅢ，有的還會(huì)有Solution
【技術(shù)貼】DNA 純化實(shí)驗(yàn)的幾種常用方法2021/08/24
DNA純化是分子生物學(xué)研究中經(jīng)常需要用到的一種方法。一般來說，做DNA純化有3個(gè)目的：1.獲得高純度的DNA；2.濃縮DNA；3.用DNA做測(cè)序，芯片等生物信息學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)。下面，談一談DNA純化的幾種常用方法。DNA純化實(shí)驗(yàn)基本上可以分為PCR清潔試劑盒純化法和DNA凝膠回收純化法兩大類。PCR清潔試劑盒純化法又稱為硅膠膜吸附法。因?yàn)樗脑硎牵汗枘z膜可在高鹽條件下結(jié)合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。而DNA溶液中的其他渣渣包括引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等，因?yàn)闆]有DNA的這種神
干貨貼：NCBI 上的這些字母都是什么意思？2021/08/24
NCBI上基因前面有個(gè)accession（編號(hào)）分別有NC、NM、NP、GI、XP、XM、BC、AB、NG、AJ、AC、AY和AF等等，然后后面是一串?dāng)?shù)字，都是什么意思？？特別是看Blast結(jié)果時(shí)，這些編號(hào)到處都是的，根本不知道哪個(gè)才是想要的好么！！莫慌，今天就給大家理理順！ACCESSION是NCBI序列數(shù)據(jù)中我們常用到編號(hào)（另一個(gè)是GI）。ACCESSION形式為CC_#####，其中CC為兩個(gè)字母，其不同組合又可以區(qū)分為蛋白序列、核酸序列或基因組序列，而#為位數(shù)不等的數(shù)字；ACCESSIO
DNA序列比對(duì)——Blast，序列比對(duì)界中的先鋒！2021/08/23
NCBI中的Blast被譽(yù)為序列比對(duì)界中的先鋒，并非浪得虛名的，它多才多藝（功能多樣），博學(xué)多識(shí)（比對(duì)面面俱到），還廣交天下名人雅士（可獲得各大數(shù)據(jù)庫的信息）。今天，小編讓大家見識(shí)一下老大的風(fēng)采。首先，登陸blast主頁blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgiBlast導(dǎo)航主頁面主體包括三部分BLASTAssembledGenomes、BasicBLAST和SpecializedBLAST。BLASTAssembledGenomes：就是讓你選擇你要對(duì)比的物種，點(diǎn)擊物種之
如何在 NCBI 上進(jìn)行菌種的同源性比對(duì)2021/08/23
當(dāng)我們將未知菌株送到公司測(cè)序時(shí)，并不意味著公司會(huì)直接告訴我們未知菌株是什么種什么屬的，他們只會(huì)給你未知菌株的測(cè)序序列，這時(shí)候就需要我們自己在NCBI上進(jìn)行同源性比對(duì)。下面結(jié)合實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷跟大家交流一下。首先，我們先來弄清楚幾個(gè)概念：Query：數(shù)據(jù)庫中的序列alignments：比對(duì)上的兩個(gè)序列hits：兩個(gè)序列比對(duì)上的片段Score：比對(duì)得分，如果序列匹配上得分，不一樣，減分，分值越高，兩個(gè)序列相似性越高EValue：相對(duì)的一個(gè)統(tǒng)計(jì)值，值越小，越可信Length：輸入序列的長度Identities
Thp-1細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)染條件分享2021/08/23
一、轉(zhuǎn)染材料準(zhǔn)備1.轉(zhuǎn)染試劑用量：10ul2.siRNA濃度：20um/L3.細(xì)胞密度：1*106-1*1054.轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板：6孔板5.轉(zhuǎn)染試劑：AdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑；貨號(hào)：AD6000256.轉(zhuǎn)染時(shí)間：48小時(shí)7.細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清：Z7180FBS-500超低內(nèi)毒素胎牛血清8.細(xì)胞凍存液：L0100無血清細(xì)胞凍存液.注意：本細(xì)胞轉(zhuǎn)染用量條件不適合lipo使用。操作過程：1.提前1天接種細(xì)胞：細(xì)胞匯合度在60-80%左右，再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。2.核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照比例
U937細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)染條件分享2021/08/23
一、轉(zhuǎn)染材料準(zhǔn)備1.轉(zhuǎn)染試劑用量：10ul2.DNA/siRNA濃度：電訊3.細(xì)胞密度：1*106-1*1054.轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板：6孔板5.轉(zhuǎn)染試劑：zetalife,AdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑；貨號(hào)：AD6000256.轉(zhuǎn)染時(shí)間：15小時(shí)7.細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清：Z7181FBS-500胎牛血清8.細(xì)胞凍存液：L0100無血清細(xì)胞凍存液注意：本細(xì)胞轉(zhuǎn)染用量條件不適合lipo使用。操作過程：1.提前1天接種細(xì)胞：細(xì)胞匯合度在60-80%左右，再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。2.核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按
如何預(yù)測(cè)新基因編碼蛋白的氨基酸序列2021/08/21
當(dāng)我們想研究一個(gè)新基因的功能時(shí)，我們首先預(yù)測(cè)一下它是否編碼蛋白，如果編碼蛋白，那編碼出的蛋白的最有可能的氨基酸序列是什么？當(dāng)我們預(yù)測(cè)出該基因編碼的蛋白的氨基酸序列后，在數(shù)據(jù)庫中比對(duì)，如果比對(duì)出了一個(gè)高度相似的已知蛋白，那我們可以根據(jù)該蛋白的功能來大概的推測(cè)我們要研究的新基因所編碼的蛋白的功能，這將為我們之后研究該新基因的功能提供方向。接下來我們就來說一下怎樣預(yù)測(cè)一個(gè)新基因編碼的蛋白的氨基酸序列。首先我們需要做的就是通過5’-ａnd3’-RACE技術(shù)得到該基因的全長cDNA序列，然后按以下步驟進(jìn)行
【干貨】如何尋找基因信息？用 Pubmed 來尋找基因信息2021/08/21
說起Pubmed我們大家都不陌生，當(dāng)然，找文獻(xiàn)可都靠它呢。不過，這個(gè)美國國立醫(yī)學(xué)圖書館的搜索引擎可不止能干這個(gè)。它只是NCBIEntrez整個(gè)數(shù)據(jù)庫查詢系統(tǒng)中的一個(gè)。PubMed界面提供與綜合分子生物學(xué)數(shù)據(jù)庫的鏈接，其他的內(nèi)容還包括：DNA與蛋白質(zhì)序列，基因圖數(shù)據(jù)，3D蛋白構(gòu)象，人類孟德爾遺傳在線等。這次我們要講的就是怎么用里面的NCBI來查找所需要的基因信息。如何尋找基因信息首先，打開NCBI網(wǎng)頁ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/，選擇[gene]，輸入您要的基因名稱（可簡(jiǎn)寫），
NCBI 竟然能批量下載基因序列!2021/08/21
第一步：整理排列好基因登入號(hào)，NCBI檢索nucleotide第二步：調(diào)整展示界面DisplaySettings第三步：選擇文件發(fā)送內(nèi)容Send第四步：合適的打開方式DNAstar軟件下面就給你們演示下：第一步：每個(gè)基因都有它的Accessionnumber（基因登入號(hào)，好比ID一樣），這個(gè)你們已經(jīng)拿到手了吧，首先登入NCBI網(wǎng)站ncbi.nlm.nih.gov/，在AllDatabases處下拉，選擇nucleotide，將基因的Accessionnumber都排列在一起，用空格隔開，不要有回
【DNA序列查詢】NCBI——序列尋找之旅2021/08/21
Pubmed也是科研人員常用工具之一，其實(shí)NCBI的功能不僅僅局限在查文獻(xiàn)上，其他功能由于用的少，只給大家介紹下基因序列的查找，包括全基因組、CCDS、剪接體等等。①打開NCBI主頁在下拉框里選擇Gene選項(xiàng)，輸入基因名稱（p53）②搜索結(jié)果會(huì)有種屬的區(qū)別，要看清你要的種屬（homo）③結(jié)果頁的右側(cè)是它包含的內(nèi)容，可以直接選擇你要的項(xiàng)，調(diào)到那個(gè)位置④Genomicregeions，transcripts，andproducts這個(gè)選項(xiàng)中，是以圖的形式顯示基因序列，在tool中選擇sequence
DNA序列查詢——NCBI良心教程，尋找基因轉(zhuǎn)錄本序列及相關(guān)編碼蛋白2021/08/21
提及NCBI我們大家都不陌生，研究物種基因功能可都靠它呢。在NCBI的快速搜索下，基因轉(zhuǎn)錄本序列以及相關(guān)編碼蛋白信息那也是手到擒來。然而當(dāng)我們查找某個(gè)基因的相關(guān)信息時(shí)，就會(huì)發(fā)現(xiàn)該基因有很多個(gè)轉(zhuǎn)錄本。所以盡管基因查詢很簡(jiǎn)單，但要精確定位到自己所需的轉(zhuǎn)錄本核酸序列及蛋白信息仍是一個(gè)問題，今天小編就手把手教大家如何通過經(jīng)NCBI搞定此難題，以栗子為主，包學(xué)包會(huì)。步驟1.打開pubmed：ncbi.nlm.nih.gov/pubmed2.選擇基因并輸入你要查找的基因名稱，這里以TP53基因?yàn)槔?.點(diǎn)擊
PCR實(shí)驗(yàn)耗材你選對(duì)了嗎？2021/08/19
聚合酶鏈?zhǔn)皆谀姆磻?yīng)？PolymeraseChainReaction聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)什么是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)？聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction，PCR）是一項(xiàng)用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它是在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下，將該段DNA擴(kuò)增至足夠數(shù)量，以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析。影響PCR實(shí)驗(yàn)的因素之一——耗材在PCR實(shí)驗(yàn)中，影響擴(kuò)增效果的因素有很多。我們能想到的有dNTP的質(zhì)量與濃度、模板核酸的量與純化程度、引物的設(shè)計(jì)、DNA聚合酶的濃度、擴(kuò)增長度等問題
間充質(zhì)干細(xì)胞如何培養(yǎng)？2021/08/19
間充質(zhì)干細(xì)胞如何培養(yǎng)？間充質(zhì)干細(xì)胞是干細(xì)胞的一個(gè)研究分支。干細(xì)胞是一類具有自我復(fù)制和多向分化能力的細(xì)胞，它們可以不斷地自我更新，并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構(gòu)成人體組織或器官的細(xì)胞。干細(xì)胞是機(jī)體的起源細(xì)胞，是形成人體各種組織器官的始祖細(xì)胞。什么是間充質(zhì)干細(xì)胞？間充質(zhì)干細(xì)胞存在于多種組織(如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤組織、脂肪組織等），具有多向分化潛力，非造血干細(xì)胞的成體干細(xì)胞。這類干細(xì)胞具有向多種間充質(zhì)系列細(xì)胞（如成骨、成軟骨及成脂肪細(xì)胞等）或非間充質(zhì)系列細(xì)胞分化的潛能，并具有*的細(xì)胞因子
血清知識(shí)——熱滅活血清如何處理？有必要對(duì)血清進(jìn)行熱滅活嗎？2021/08/18
血清熱滅活1.為何會(huì)有熱滅活血清呢？加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動(dòng)的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中，培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。2.血清熱滅活是否必要？血清熱滅活的步驟在1970年代就已建立，至今成為很多實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)血清前處理步驟；但許多先前認(rèn)為必須熱滅活的原因，卻早已經(jīng)不再成立：●去除支原體污染?早期血清加工使用的450nm濾膜，早已被100nm濾膜取代；且隨著加工技術(shù)的創(chuàng)新及嚴(yán)格的監(jiān)控，血清
血清沉淀是否會(huì)影響細(xì)胞生長？如何避免？2021/08/18
血清是細(xì)胞培養(yǎng)試劑中最基礎(chǔ)普遍的試劑之一，之前我們已經(jīng)介紹過了有關(guān)特殊加工工藝血清的一些小知識(shí)（了解和認(rèn)識(shí)胎牛血清，特殊加工工藝血清，您知道幾種？），那么今天我們將繼續(xù)了解有關(guān)血清沉淀與血清熱滅活的相關(guān)知識(shí)~血清沉淀是否會(huì)影響細(xì)胞生長？如何避免？血清沉淀1.血清沉淀是什么？血清中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見的沉淀，其成分有多種類型，產(chǎn)生的原因有很多。主要有纖維蛋白（絮狀沉淀）、甲胎蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻粘連蛋白、磷酸鈣（顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀）、膽固醇等?！窭w維蛋白（Fibrin）血清中肉眼可見的沉淀物大
383940414243共43頁858條記錄
青州市| 平定县| 阿瓦提县| 丰都县| 祁阳县| 彭州市| 靖安县| 台安县| 牟定县| 临海市| 伊吾县| 邵东县| 永济市| 高密市| 万源市| 霍林郭勒市| 安泽县| 漳浦县| 遂平县| 南部县| 正定县| 如东县| 新安县| 郧西县| 大方县| 洱源县| 若尔盖县| 甘孜县| 长武县| 西乡县| 平昌县| 洛阳市| 梅河口市| 哈巴河县| 抚宁县| 光泽县| 永宁县| 宜春市| 山丹县| 会同县| 新营市|