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2022
11-02

淺述γ干擾素ELISA檢測(cè)試劑盒使用的基本原理
γ干擾素ELISA檢測(cè)試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，檢測(cè)釋放至血漿中的γ-干擾素，根據(jù)γ-干擾素水平判斷被檢牛是否感染過(guò)牛分枝桿菌。檢測(cè)準(zhǔn)確：預(yù)先包被的抗體是IFNγ單克隆抗體。檢測(cè)相抗體也是IFNγ單克隆抗體，并經(jīng)生物素標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò)PBS或TBS的洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人IFNγ呈正相關(guān)。γ干擾素ELI
2022
10-21

atcc菌種保藏方法,你知道幾個(gè)呢？
atcc菌種具有多種保藏菌種的方法：1、冷凍干燥保存法它的原理是首先將微生物冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分。從菌體中除去大部分水分后，細(xì)胞的生理活動(dòng)就會(huì)停止，因此可以達(dá)到長(zhǎng)期維持生命狀態(tài)的目的。該方法適用于絕大多數(shù)微生物ATCC菌種（包括噬菌體和立克次氏體等）的保存。2、懸液保存法即使微生物混懸于適當(dāng)溶液中進(jìn)行保存的方法。常用的有：蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸
2022
10-13

熒光PCR如何實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)控的呢？
PCR可以被認(rèn)為是與發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程相似的技術(shù)，其結(jié)果都是以原來(lái)的DNA為模板產(chǎn)生新的互補(bǔ)DNA片段。細(xì)胞中DNA的復(fù)制是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程。參與復(fù)制的有多種因素。PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相似，但反應(yīng)體系相對(duì)較簡(jiǎn)單。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的
2022
10-10

酶聯(lián)免疫分析試劑盒實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大要素分別是什么？
酶聯(lián)免疫分析試劑盒是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用廣泛的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理，能測(cè)量人促卵泡素，只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測(cè)大分子抗原，后者用于測(cè)定特異抗體。酶聯(lián)免疫分析試劑盒實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大要素：1、實(shí)驗(yàn)因素：所有影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的條件都稱為影響因素，實(shí)驗(yàn)研究的目的不同，對(duì)實(shí)驗(yàn)的要求也不同.影響因素有客觀與主觀，
2022
09-19

使用ELISA檢測(cè)試劑盒時(shí)需要遵守的問(wèn)題有很多？
ELISA檢測(cè)試劑盒可實(shí)現(xiàn)多種分泌性蛋白（細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等）的同時(shí)檢測(cè)和定量，對(duì)于生物系統(tǒng)的綜合研究而言具有寶貴價(jià)值。不但具有更優(yōu)的效率、速度和檢測(cè)范圍。采用多重檢測(cè)能降低每個(gè)靶標(biāo)結(jié)果的成本。ELISA檢測(cè)試劑盒的作用原理：1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，或是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；2.抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)
2022
09-13

抗原修復(fù)方法
抗原修復(fù)方法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或高檔繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來(lái)水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修
2022
09-09

柱式細(xì)菌RNA提取試劑盒在運(yùn)輸和保存過(guò)程中，有哪些需要我們注意的
柱式細(xì)菌RNA提取試劑盒的特點(diǎn)：1.不使用有毒的苯酚，氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。2.快速，簡(jiǎn)捷，單個(gè)樣品操作一般可在30分鐘內(nèi)完成。3.研發(fā)成功基因組DNA清除柱技術(shù)確保有效清除gDNA殘留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)。4.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9～2.0，基本無(wú)DNA殘留，可用于RT-PCR，Northern-blot和各種實(shí)驗(yàn)。運(yùn)輸及保存：本試劑盒在室溫儲(chǔ)存6個(gè)月不影響使用效果，溶菌酶儲(chǔ)存于4
2022
09-06

是否所有核酸染料都有毒性？
核酸染料對(duì)動(dòng)物和人的毒性由多方面決定。一是染料的膜通透性。EB被歸類為強(qiáng)誘變劑是由于其分子量較小，容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。而EB二聚體EthidiumHomodimer（EthD）嵌入DNA的能力比EB強(qiáng)上千倍，但毒性很小，就是由于其分子比EB大，不能透過(guò)細(xì)胞膜，所以毒性反而更低。SYBR系列染料雖然低毒，但由于一般都溶于DMSO（因?yàn)槿菀姿猓荒苁褂盟芤鹤鋈軇┲?，所以如果濺到皮膚表面，更容易進(jìn)入皮膚。二是染料是否容易被人體降解。比如EB在體外就很難降解，一旦進(jìn)入體內(nèi)能在人體內(nèi)殘留的時(shí)間可能比較長(zhǎng)
2022
09-05

水通道蛋白elisa試劑盒檢測(cè)前后的工作都有什么？
水通道蛋白elisa試劑盒采用天然抗體包被而成，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。往預(yù)先包被樣本抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關(guān)。接下來(lái)帶大家看一看試劑盒檢測(cè)前后的工作。水通道蛋白elisa試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備工作：1、請(qǐng)確保試劑盒在使用前已在室溫環(huán)境下回溫。2、核準(zhǔn)本次檢測(cè)涉及樣品數(shù)，規(guī)劃
2022
08-17

總RNA提取試劑盒使用注意事項(xiàng)
總RNA提取試劑盒提供了一種快速，簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)有效的方法，可從全血，哺乳動(dòng)物細(xì)胞，細(xì)菌細(xì)胞和真菌細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上，同時(shí)使污染物通過(guò)柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫，不用酚提取或醇沉淀。總RNA提取試劑盒使用注意事項(xiàng)如下：1、如果需要測(cè)量RNA的A260/A280的比值，建議使用RNA定量緩沖液對(duì)樣品稀釋后，進(jìn)行測(cè)量。2、所有離心管，槍頭及相關(guān)溶液都必須無(wú)RNA酶污染。耐高
2022
08-11

DMEM高糖*培養(yǎng)基在使用中需要注意什么
*培養(yǎng)基（Completemedium）這是一種在基本培養(yǎng)基內(nèi)加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)，即加入生長(zhǎng)因子而制成的各種營(yíng)養(yǎng)基，可用來(lái)滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要，是微生物學(xué)上常用的一種培養(yǎng)基。產(chǎn)品形態(tài)：液體。產(chǎn)品規(guī)格：500mL/瓶。培養(yǎng)基成分：（含10%血清，雙抗）。pH值：7.2-7.4。儲(chǔ)存條件：2-8℃/-20℃。有效期：2-8℃2個(gè)月/-20℃半年。運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸。細(xì)菌檢測(cè)：陰性。真菌檢測(cè)：陰性。支原體檢測(cè)：陰性。細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正
2022
08-04

細(xì)胞*培養(yǎng)基優(yōu)化的步驟怎樣的
培養(yǎng)基既是供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的環(huán)境，所以非常重要。細(xì)胞培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液基礎(chǔ)上，添加了碳水化合物、氨基酸、脂類、無(wú)機(jī)鹽、維生素、微量無(wú)素和細(xì)胞生長(zhǎng)因子等。細(xì)胞*培養(yǎng)基是人工模擬動(dòng)物細(xì)胞的體內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境，維持體外細(xì)胞存活和增殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)基礎(chǔ)，其主要功能是為細(xì)胞提供適宜的pH和滲透壓，以及細(xì)胞本身不能合成的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)基必須含有充分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，才能滿足新細(xì)胞合成、細(xì)胞代謝等生化反應(yīng)所需要的物質(zhì)和能量。細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化
2022
07-26

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室-生物污染
生物污染簡(jiǎn)介：細(xì)胞培養(yǎng)物污染往往是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常遇到的問(wèn)題，有時(shí)會(huì)帶來(lái)十分嚴(yán)重的后果。細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類。一是化學(xué)污染物，例如：培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑，二是生物污染物，例如：細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。盡管無(wú)法*消除污染，但是可以通過(guò)充分了解污染源以及采用良好的無(wú)菌技術(shù)，降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。此部分將概括介紹主要的幾種生物污染。細(xì)菌：細(xì)菌是一大類廣泛存在的單細(xì)胞微生物。細(xì)菌直徑一般為幾個(gè)微米，外形多樣，例如：球狀、桿狀和螺旋
2022
07-18

細(xì)胞專用培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng)
細(xì)胞專用培養(yǎng)基是人工模擬動(dòng)物細(xì)胞的體內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境，維持體外細(xì)胞存活和增殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)基礎(chǔ)，其主要功能是為細(xì)胞提供適宜的pH和滲透壓，以及細(xì)胞本身不能合成的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。細(xì)胞專用培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng)：1、細(xì)胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水（經(jīng)石英蒸餾器蒸餾）或超純水，醫(yī)藥生產(chǎn)上一般為注射用水。2、建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用，因?yàn)榘b一旦打開，組分可能會(huì)變質(zhì)或因受潮而結(jié)團(tuán)。3、溶解干粉培養(yǎng)基
2022
07-18

伊氏錐蟲(TE)核酸檢測(cè)試劑盒適用于哪種儀器實(shí)驗(yàn)
伊氏錐蟲(TE)核酸檢測(cè)試劑盒采用TaqMan探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，設(shè)計(jì)一對(duì)伊氏錐蟲(TE)特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR技術(shù)對(duì)伊氏錐蟲(TE)的DNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。ABI、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列熒光定量PCR檢測(cè)儀。PCR技術(shù)即聚合酶鏈反應(yīng)（polymerasechainreaction，PCR）是由美國(guó)PECetus公司的KaryMullis在1983年（19
2022
07-06

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室-無(wú)菌技術(shù)
無(wú)菌技術(shù)簡(jiǎn)介：細(xì)胞培養(yǎng)的成功很大程度上取決于保護(hù)細(xì)胞免受細(xì)菌、真菌和病毒等微生物的污染。非無(wú)菌物品、培養(yǎng)基和試劑、帶有微生物的空氣顆粒、不干凈的培養(yǎng)箱和污染的工作臺(tái)面均是導(dǎo)致微生物污染的來(lái)源。無(wú)菌技術(shù)的作用是在環(huán)境微生物與無(wú)菌的細(xì)胞培養(yǎng)物之間形成一道屏障，它通過(guò)一套操作流程來(lái)降低培養(yǎng)物被上述污染源污染的可能。無(wú)菌技術(shù)的組成要素包括：無(wú)菌工作區(qū)域、良好的個(gè)人衛(wèi)生、無(wú)菌試劑和培養(yǎng)基以及無(wú)菌操作。無(wú)菌工作區(qū)域簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)的減少空氣顆粒和氣體揮發(fā)（例如：灰塵、芽抱、皮屑、噴嚏）污染的方法就是采用細(xì)胞培養(yǎng)通
2022
07-06

快速檢測(cè)試劑盒安全使用技巧解析
快速檢測(cè)試劑盒安全使用技巧：檢測(cè)過(guò)程中建議穿潔凈工作服，帶一次性手套，使用的槍頭需提前滅菌。陽(yáng)性對(duì)照可能會(huì)作為污染源，污染其他試劑和待檢樣品，導(dǎo)致出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，在加樣過(guò)程中建議最后加入陽(yáng)性對(duì)照。檢測(cè)空間應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)操作，在空間條件允許情況下，試劑配置區(qū)用于配置反應(yīng)所需要的所有試劑；樣品前處理區(qū)用于待測(cè)樣品的處理及加樣；擴(kuò)增觀察區(qū)用于反應(yīng)進(jìn)行和結(jié)果判讀。各區(qū)內(nèi)空間獨(dú)立，試驗(yàn)用品專用，避免交叉污染。另外，樣品處理區(qū)建議配備超凈工作臺(tái)，所有步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書的要求進(jìn)行。上機(jī)前注意檢查反應(yīng)管是否蓋緊，以
2022
06-13

DNA/RNA提取試劑盒（吸附柱法）的主要檢測(cè)方法
DNA/RNA提取試劑盒（吸附柱法）可以從多種樣本中提取DNA/RNA，包括血清、血漿、動(dòng)物組織、體液等。處理的樣本通過(guò)加入裂解液后，把混合物移至吸附柱中，之后可以通過(guò)洗滌、洗脫，即可分離出病毒DNA/RNA。本試劑盒提取的核酸可以用于Real-timePCR，NorthernBlot，BlottingHybridization，cDNAlibraryConstruction等實(shí)驗(yàn)。檢測(cè)方法：一、樣本前處理動(dòng)物、植物組織：將樣本用生理鹽水或PBS緩沖液充分研磨，離心取上清后進(jìn)行樣本提取操作。血清
2022
06-10

大鼠一氧化氮（NO）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書
大鼠一氧化氮（NO）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T1μmol/L-40μmol/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中一氧化氮（NO）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠一氧化氮（NO）水平。用純化的大鼠一氧化氮（NO）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮（NO），再與HRP標(biāo)記的一氧化氮（NO）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成
2022
05-13

柱式血液DNAout使用說(shuō)明
1.在0.02-1mL新鮮或抗凝血液（冷凍血需先37℃水浴融化）中加入0.5mL紅細(xì)胞裂解液（A型），吹打混勻。注意：溶液A非常容易長(zhǎng)菌，取用需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。a)哺乳動(dòng)物，血液使用量以300uL以下為宜，使用量越大產(chǎn)量越高，但產(chǎn)率會(huì)降低。如果血液多于300uL，重復(fù)1-2步兩次可以提高產(chǎn)率。b)禽類動(dòng)物，血液使用量以20uL以下為宜，可以從第3步做起。2.室溫12,000-15,000rpm離心5分鐘，沉淀呈粉紅色，小心傾去上清。3.再短暫離心半分鐘，吸棄殘留的液體。此步有利于后面的細(xì)胞裂

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