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天津益元利康生物科技有限公司

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  • 2024

    11-06

    一文了解mNGS

    繼上文《一文了解tNGS》之后,今天我們講講它的“兄弟”——mNGS吧~一、?mNGS簡(jiǎn)介?mNGS(MetagenomicNextGenerationSequencing)?是一種無(wú)需培養(yǎng)即可快速鑒定感染病原體的新技術(shù),即宏基因組學(xué)二代測(cè)序技術(shù),正在改變病原微生物檢測(cè)的現(xiàn)狀。它通過(guò)無(wú)需培養(yǎng)樣本的方式,實(shí)現(xiàn)高通量、快速鑒定感染病原體,顯著提高了檢測(cè)的敏感性和特異性。其原理、優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用場(chǎng)景如下。二、?mNGS原理mNGS通過(guò)對(duì)臨床樣本的DNA或RNA進(jìn)行高通量測(cè)序,無(wú)差別、無(wú)選擇性地對(duì)樣本中的核酸
  • 2024

    11-01

    ALZET微型滲透壓泵的灌注與預(yù)浸泡

    一、前言為了確保操作準(zhǔn)確,必須確保每個(gè)泵都充滿藥物溶液。泵體內(nèi)滯留的氣泡或未能將流量調(diào)節(jié)器插入泵中,可能會(huì)導(dǎo)致泵送速率波動(dòng)不可預(yù)測(cè)。填充泵時(shí),請(qǐng)確保溶液處于室溫。建議在ALZET泵的填充和處理過(guò)程中以及在手術(shù)植入過(guò)程中使用無(wú)菌技術(shù)。填充過(guò)程中溶液或流量調(diào)節(jié)器的意外污染可能會(huì)導(dǎo)致可能破壞活性的微生物生長(zhǎng)、組織刺激和不穩(wěn)定的結(jié)果。如果您擔(dān)心溶液的無(wú)菌性,請(qǐng)通過(guò)0.22µM注射器端過(guò)濾器(例如Millex®-GV)填充泵。在填充和植入過(guò)程中,應(yīng)戴上手術(shù)手套處理ALZET泵。如果皮膚油脂積聚在泵表面,可
  • 2024

    11-01

    一文了解tNGS

    一、tNGS技術(shù)原理tNGS是一種基于超多重PCR擴(kuò)增(或靶向捕獲)與高通量測(cè)序兩種技術(shù)結(jié)合的新一代測(cè)序技術(shù)。它使用大量針對(duì)特定基因序列的引物/探針對(duì)待測(cè)樣品中抽提出的核酸進(jìn)行超多重PCR擴(kuò)增/探針捕獲,獲得大量目標(biāo)核酸片段,再對(duì)這些目標(biāo)核酸片段進(jìn)行高通量測(cè)序,然后對(duì)所得序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)樣本中的核酸進(jìn)行高靈敏以及高分辨率的識(shí)別。二、tNGS優(yōu)點(diǎn)1.針對(duì)性強(qiáng):tNGS只針對(duì)特定基因序列進(jìn)行測(cè)序,因此可以大大減少測(cè)序數(shù)據(jù)量,提高檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性。2.高靈敏度:由于tNGS可以對(duì)
  • 2024

    11-01

    DH5 α感受態(tài)細(xì)胞和Top⑩感受態(tài)細(xì)胞的區(qū)別是什么

    一、前言Top⑩感受態(tài)(E.coli)和DH5α感受態(tài)細(xì)胞是常用的大腸桿菌細(xì)胞系,用于基因克隆、高效表達(dá)和蛋白質(zhì)產(chǎn)量增加等研究。雖然它們都是常用的實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞系,但它們?cè)谝恍╆P(guān)鍵方面存在區(qū)別。二、Top⑩感受態(tài)和DH5α感受態(tài)細(xì)胞基因型和用途對(duì)比1.?DH5α?:基因型為supE44、hsdR17、recA1、endA1、gyrA19、thi-1、relA1、△lacU169(80lacZΔM15)。主要用于分子克隆和質(zhì)粒提取,具有藍(lán)白斑篩選功能?。2.?Top⑩:基因型為F-、galU、galK
  • 2024

    10-31

    大小鼠采血具體操作

    1、尾尖采血這是常用且操作簡(jiǎn)便的方法之一。首先將小鼠固定并暴露其尾巴,通常將其浸泡在40-50℃的溫水中幾分鐘或用酒精棉球擦拭鼠尾,使血管充盈。然后用無(wú)菌手術(shù)刀快速剪去尾尖1-2mm,血液會(huì)自然流出。2、摘眼球采血用左手拇指、食指和中指抓取小鼠的頸部頭皮,小指和無(wú)名指固定尾巴。輕壓需要摘取的眼部皮膚,使眼球充血突出。用眼科剪剪去小鼠的胡須,防止血從胡須處留下引起溶血。用眼科彎鑷夾取眼球并快速摘取,并使血液從眼眶內(nèi)流入0.5mlEP管中。3、眼眶靜脈叢采血:此方法適用于多次重復(fù)采血,具有成功率高、
  • 2024

    10-31

    無(wú)血清培養(yǎng)基配方、使用方法

    一、前言細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生命科學(xué)研究領(lǐng)域是must的。在科研上,細(xì)胞培養(yǎng)基(medium)一般都會(huì)加入血清(Serum)來(lái)補(bǔ)充蛋白質(zhì)(protein)、生長(zhǎng)因子(growthfactor)或其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(nutrients)等,大部分細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)選擇使用胎牛血清(fetalbovineserum,FBS)。近年來(lái)也陸續(xù)有多樣的血清種類,例如:人類血小板生長(zhǎng)因子(platelet-richplasma,PRP)、小牛血清(bovinegrowthserum,BGS)等,中科百抗自研產(chǎn)品:Bestop™
  • 2024

    10-30

    磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)是什么?

    磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)一:?自動(dòng)化、高通量?磁珠法核酸提取適合于自動(dòng)化處理,特別是在高通量實(shí)驗(yàn)室中,使用磁珠法核酸提取試劑配合自動(dòng)核酸提取純化儀可以快速完成大批量樣本的處理,提高工作效率?。?磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)二:?操作簡(jiǎn)便?磁珠法通過(guò)簡(jiǎn)單的震蕩混勻和磁力架磁分離步驟即可完成核酸的捕獲與純化,操作流程簡(jiǎn)化,相對(duì)于其他方法更為便捷?。?磁珠法提取核酸的優(yōu)點(diǎn)三:?核酸回收率高?磁珠表面功能基團(tuán)豐富,與核酸的結(jié)合能力強(qiáng),對(duì)核酸的回收率較高,尤其是對(duì)于微量樣本或低濃度核酸樣品,磁珠法能有效提高回收效率?
  • 2024

    10-30

    磁珠法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有什么?

    磁珠法核酸純化技術(shù)采用了納米級(jí)磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標(biāo)記了一種對(duì)核酸有吸附作用的特定活性官能團(tuán),能同核酸發(fā)生吸附反應(yīng),從而達(dá)到核酸與雜質(zhì)分離的目的,進(jìn)而獲得純化的核酸。那么磁珠法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有什么呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、步驟1、樣本處理:核酸必須從細(xì)胞或其他生物物質(zhì)中釋放出來(lái)。(1)植物組織:液氮研磨或在特殊裂解液中電動(dòng)勻漿;(2)動(dòng)物組織:液氮研磨或裂解液中手動(dòng)/電動(dòng)勻漿;(3)血細(xì)胞:應(yīng)用紅細(xì)胞裂解液處理;(4)細(xì)胞:胰酶處理或蛋白酶K處理。2、DNA純化:磁珠提
  • 2024

    10-28

    小鼠游離皮質(zhì)培養(yǎng)試劑盒怎么使用?

    買(mǎi)到了BrainBits小鼠游離皮質(zhì)培養(yǎng)試劑盒后,該如何使用呢?一、制劑(無(wú)菌罩室溫):1.將80µl臺(tái)普蘭藍(lán)(SigmaT8154)加入0.5ml試管中進(jìn)行下面的步驟4。2.12mlNbActiv1™至室溫。3.將2ml分離的初級(jí)神經(jīng)元管置于30℃水浴中加熱1分鐘。二、細(xì)胞分散(無(wú)菌罩室溫):1.用硅化巴斯德移液管,將整個(gè)試管的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到無(wú)菌15ml離心管中。2.旋轉(zhuǎn)1100rpm(200xG),1分鐘。丟棄上清,留下約50µl含有微球的THRYVE胚胎wanquan液。3.分散細(xì)胞顆粒(用
  • 2024

    10-28

    新生牛血清常用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基中

    新生牛血清常用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基中,為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子,促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖;可用于生物醫(yī)學(xué)研究中的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)等,為實(shí)驗(yàn)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì);還可用于某些臨床診斷試劑的研發(fā)和生產(chǎn),如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒等。新生牛血清的存儲(chǔ)要求:1.儲(chǔ)存條件:應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C或更低的溫度下,避免反復(fù)凍融。同時(shí),應(yīng)避免陽(yáng)光直射和高溫環(huán)境。2.開(kāi)封前檢查:在使用前,應(yīng)仔細(xì)檢查血清瓶是否有明顯的污染或變質(zhì)跡象,如渾濁、異味等。如果發(fā)現(xiàn)異常情況,應(yīng)及時(shí)更換新的血
  • 2024

    10-25

    BrainBits培養(yǎng)基好不好?

    BrainBits培養(yǎng)基是一種無(wú)血清培養(yǎng)基,由Neurobasal、B27和Glutamax預(yù)混合而成,適用于神經(jīng)元的生長(zhǎng)和培養(yǎng)。?BrainBits培養(yǎng)基(NbActiv1)由Neurobasal、B27和Glutamax預(yù)混合而成,這些成分的組合優(yōu)化了神經(jīng)元的生長(zhǎng)條件。它特別適用于4天后的神經(jīng)元存活,并且簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,減少了污染的風(fēng)險(xiǎn)?。一、BrainBits培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn)?無(wú)血清培養(yǎng)?:BrainBits培養(yǎng)基是一種無(wú)血清培養(yǎng)基,避免了血清批次間差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性?。
  • 2024

    10-25

    全蛋白的提取方法和注意事項(xiàng)

    一、全蛋白的提取方法主要包括以下幾種?。全蛋白的提取方法一:?細(xì)胞準(zhǔn)備和清洗?:首先,準(zhǔn)備近乎長(zhǎng)滿的細(xì)胞,例如10cm大皿中的細(xì)胞。使用預(yù)冷的PBS清洗細(xì)胞1-2次,并棄去PBS。全蛋白的提取方法二:?細(xì)胞裂解?:加入適量的裂解液,如RIPA裂解液(強(qiáng)),并加入PMSF以抑制蛋白酶活性。如果需要提取磷酸化蛋白,還需加入磷酸酶抑制劑。裂解液配好后,將細(xì)胞在4℃下裂解15分鐘。全蛋白的提取方法三:超聲破碎?:將裂解后的細(xì)胞用超聲波破碎儀處理1-2分鐘,功率保持在20-30%,保持4℃。全蛋白的提取方
  • 2024

    10-24

    怎么提高PCR擴(kuò)增效率?

    在PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,提高PCR擴(kuò)增效率是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵,下面我們探究一下如何提高PCR擴(kuò)增效率~1.引物的設(shè)計(jì)引物的設(shè)計(jì)是PCR擴(kuò)增效率的關(guān)鍵。引物長(zhǎng)度應(yīng)在18-30堿基之間,通常為20nt。引物序列應(yīng)具有dute性,避免在非目的片段中存在。引物的GC含量應(yīng)在40-60%之間,避免過(guò)多的G+C導(dǎo)致非特異條帶?。2.?優(yōu)化反應(yīng)條件??增加循環(huán)數(shù)?:通過(guò)增加循環(huán)次數(shù)可以提高擴(kuò)增效率。?提純模板?:確保模板DNA的純度,去除雜質(zhì)和抑制劑。?使用高質(zhì)量的Taq酶?:選擇活性高、穩(wěn)定性好的Taq酶。?調(diào)整
  • 2024

    10-24

    原核生物基因表達(dá)的特點(diǎn)及調(diào)控機(jī)制

    一、原核生物基因表達(dá)的特點(diǎn)1.只有一種?RNA聚合酶?原核生物只有一種RNA聚合酶,負(fù)責(zé)所有基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。2.?以?操縱子為基本單位?原核生物的基因表達(dá)以操縱子為單位,將功能相關(guān)的基因組織在一起,同時(shí)關(guān)閉或開(kāi)啟基因表達(dá),既經(jīng)濟(jì)有效,又保證其生命活動(dòng)的需要。?3.轉(zhuǎn)錄和翻譯偶聯(lián)進(jìn)行?原核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯是偶聯(lián)進(jìn)行的,mRNA合成后立即用于蛋白質(zhì)合成,無(wú)需中間存儲(chǔ)。(如需mRNA合成試劑盒可以選擇CELLSCRIPTT7ARCA加帽mRNA合成試劑盒)?4.mRNA翻譯起始部位有特殊的堿基序列——
  • 2024

    10-23

    常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抓拿固定手法

    (一)小白鼠(mouse)習(xí)慣用右手的同學(xué),建議使用右手抓住小鼠尾部,將其提起并放在鼠籠鐵紗網(wǎng)上或粗糙物上。在小鼠向前掙脫時(shí),用左手的拇指和食指抓住其頸部皮膚,并以左手的小指和掌部夾住其尾部??粘龅挠沂诌M(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),習(xí)慣用左手的同學(xué)則相反操作。(二)大白鼠(rat)習(xí)慣用右手的同學(xué),建議戴上防護(hù)手套,用右手抓住大鼠尾巴中部提起,左手按住背部皮膚。可使用手術(shù)臺(tái)固定,將大鼠四肢放入手術(shù)臺(tái)松緊環(huán)內(nèi),收緊環(huán)扣以固定??粘龅挠沂诌M(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),習(xí)慣用左手的同學(xué)則相反操作。(三)豚鼠(cavy)Cavy具有膽
  • 2024

    10-23

    新生牛血清含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分

    新生牛血清主要來(lái)源于剛出生的小牛。在小牛出生后的短時(shí)間內(nèi),通過(guò)無(wú)菌操作采集其血液,經(jīng)過(guò)離心、分離等步驟,提取出血清部分。由于新生牛血清中含有大量的生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和其他生物活性物質(zhì),因此具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和生物活性。新生牛血清的制備方法:1.采血:在無(wú)菌條件下,從小牛頸靜脈或心臟穿刺采血,避免污染。2.離心:將采集到的血液放入離心管中,進(jìn)行高速離心,使血細(xì)胞與血清分層。3.分離:用無(wú)菌吸管將上層血清吸出,避免吸取到下層的血細(xì)胞。4.過(guò)濾:將分離出的血清通過(guò)0.22微米的濾膜過(guò)濾,去除細(xì)菌和病毒
  • 2024

    10-22

    蛋白電泳條帶大小不合的原因

    蛋白電泳條帶大小不合怎么辦,本文為您解答一下。一、蛋白電泳條帶大小不合原因?1.凝膠配制問(wèn)題?:凝膠配制過(guò)程中組分比例不合理、溫度、陽(yáng)光、雜質(zhì)等外界因素的影響可能導(dǎo)致丙烯酰胺聚合不wanquan,從而影響條帶的分離效果?。?2.電泳條件問(wèn)題?:電泳時(shí)電壓過(guò)高、溫度過(guò)高、電泳速度過(guò)快等條件設(shè)置不當(dāng),可能導(dǎo)致條帶大小不合?。?3.樣品處理問(wèn)題?:樣品未wanquan變性或含有未清除的雜質(zhì),也可能導(dǎo)致電泳條帶大小不合?。?二、蛋白電泳條帶大小不合解決方法??1.檢查凝膠配制?:確保凝膠配制過(guò)程中組分比
  • 2024

    10-21

    PEG在核酸提取中的具體應(yīng)用

    一、PEG是什么?PEG,聚乙二醇是一種高分子聚合物,無(wú)刺激性,味微苦,具有良好的水溶性,并與許多有機(jī)物組分有良好的相溶性。具有優(yōu)良的潤(rùn)滑性、保濕性、分散性、粘接性,可作為抗靜電劑及柔軟劑等使用,在化妝品、制藥、化纖、橡膠、塑料、造紙、油漆、電鍍、農(nóng)藥、金屬加工及食品加工等行業(yè)中均有極為廣泛的應(yīng)用。其分子式為HO(CH2CH2O)nH,其中n代表聚合度,決定了PEG的分子量。PEG具有良好的水溶性、無(wú)毒性、生物相容性和化學(xué)穩(wěn)定性,這些特性使得PEG在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。二、PEG在核酸提
  • 2024

    10-17

    qPCR的CT值為何定在15-35之間?

    一、擴(kuò)增曲線擴(kuò)增曲線是描述PCR動(dòng)態(tài)進(jìn)程的曲線,擴(kuò)增曲線一般以循環(huán)數(shù)(Cyclenumber)為橫坐標(biāo),熒光強(qiáng)度(Fluorescenceintensity)或信號(hào)量(Signalamount)為縱坐標(biāo)。典型的擴(kuò)增曲線可以分成四個(gè)時(shí)期:基線期、指數(shù)期、線性期和平臺(tái)期。基線期:擴(kuò)增曲線的水平部分,通常在PCR反應(yīng)的前幾個(gè)循環(huán)(3-15個(gè)循環(huán))內(nèi)。此階段擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物生成量的變化。儀器軟件會(huì)基于這階段的熒光信號(hào)計(jì)算出基線范圍。指數(shù)期:PCR擴(kuò)增的指數(shù)增長(zhǎng)階段,擴(kuò)增曲
  • 2024

    10-17

    同型對(duì)照抗體是什么?如何使用?

    一、什么是同型對(duì)照抗體?同型對(duì)照抗體是一種與檢測(cè)抗體(一抗)相同種屬、相同種型(和亞類)、具有相同標(biāo)記物的但對(duì)目標(biāo)抗原無(wú)特異性識(shí)別能力的一抗。檢測(cè)抗體和同型對(duì)照抗體唯1的區(qū)別在于對(duì)待測(cè)樣本中目標(biāo)抗原的特異性識(shí)別能力。檢測(cè)抗體能在代測(cè)樣本中特異性識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)抗原,而同型對(duì)照抗體不會(huì)特異性結(jié)合任何存在待測(cè)樣本中的抗原,其他屬性二者是完權(quán)一致的。二、為什么需要同型對(duì)照抗體?在流式細(xì)胞術(shù)(FC)和免疫組織化學(xué)(IHC)等實(shí)驗(yàn)中,有很高的背景染色風(fēng)險(xiǎn),我們會(huì)發(fā)現(xiàn)抗體與細(xì)胞的結(jié)合,可以通過(guò)不止抗體-抗原特
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