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熒光素標(biāo)記谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體IgG

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熒光素標(biāo)記谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體IgG

免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟1. 直接免疫熒光法測(cè)抗原
⑴基本原理
將熒光素標(biāo)記在相應(yīng)的抗體上,直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。其優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點(diǎn)是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細(xì)菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。
⑵試劑與儀器
磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4
熒光標(biāo)記的抗體溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進(jìn)行稀釋
緩沖甘油:分析純無熒光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸鹽緩沖液1份配制
搪瓷桶三只(內(nèi)有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)
有蓋搪瓷盒一只(內(nèi)鋪一層浸濕的紗布?jí)|)
熒光顯微鏡
玻片架
濾紙
37℃溫箱等。

熒光素標(biāo)記谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體IgG相關(guān)產(chǎn)品:

Anti-PDGF-A??血小板源性生長(zhǎng)因子-A抗體
Anti-PDGF-B??血小板源性生長(zhǎng)因子-B抗體
Anti-PDGF-BB(plaet derived growth factor-BB)??血小板源性生長(zhǎng)因子-BB抗體
Anti-PDGF-R-A??血小板源性生長(zhǎng)因子受體-A抗體
Anti-PDGF-R-B??血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體
anti-PDI(Protein Disulfide lsomerase)??蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體
Anti-Pdk4(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 4)??丙酮酸脫氫酶激酶4抗體
Anti-PDX1(pancreatic and duodenal homeobox 1)??胰十二指腸同源異型盒基因抗體
Anti-PEA3(polymoma virus enhancer 3)??多瘤促活化因子抗體
Anti-PEDF (pigment epithelium-derived factor)??色素上皮源性因子抗體
Anti-PEG10(Paternally expressed gene 10)??肝癌高表達(dá)基因抗體
Anti-PEG3(Paternally Expressed Gene 3)??PEG3蛋白抗體
Anti-PENK/Enkephalin A(Preproencephalin A)??腦啡肽抗體
Anti-PEPT1 (Peptide-transporters 1)??腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

熒光素標(biāo)記谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體IgG

實(shí)驗(yàn)步驟
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++”以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。

 



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