BY-0776 U27小鼠子宮頸癌瘤株細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
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- 型號 BY-0776
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- 更新時間 2025/7/10 15:27:33
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U27小鼠子宮頸癌瘤株細(xì)胞系
U27小鼠子宮頸癌瘤株細(xì)胞系源自 615 近交系小鼠的誘發(fā)性子宮頸癌，是保留宮頸腺鱗癌特征和深層浸潤能力的惡性腫瘤模型，在宮頸癌侵襲深度調(diào)控機(jī)制及抗浸潤藥物篩選中具有du特jia值，為解析宮頸癌進(jìn)展的惡性程度差異提供了對比工具。
該細(xì)胞系呈現(xiàn)腺鱗混合的形態(tài)與表型特征。顯微鏡下，細(xì)胞同時存在多邊形（鱗狀上皮樣）和柱狀（腺上皮樣）兩種形態(tài)，比例約 2:1，貼壁生長時排列雜亂無章，可見腺管樣結(jié)構(gòu)與角化珠并存，細(xì)胞大小差異顯著（直徑 10-22μm），核質(zhì)比ji高，細(xì)胞核畸形明顯，多核細(xì)胞多見，核分裂象活躍（每 10 個高倍視野 12-15 個），較 U14 細(xì)胞增加 50%。免疫表型分析顯示，細(xì)胞同時表達(dá)鱗狀標(biāo)志物 CK17（陽性率 85%）和腺上皮標(biāo)志物 CK19（陽性率 70%），這與 U14 的單一鱗狀表型形成顯著差異，同時高表達(dá)癌胚抗原（CEA，陽性率 80%），反映其腺鱗癌的分化特征。
體外培養(yǎng)體系中，U27 細(xì)胞展現(xiàn)出更快的增殖速度與更強(qiáng)的侵襲潛能。最適培養(yǎng)條件為含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，在 37℃、5% CO?環(huán)境下，傳代周期約 48 小時，倍增時間約 30 小時，顯著快于 U14 細(xì)胞。Transwell 侵襲實驗顯示，其穿透宮頸全層基質(zhì)的能力是 U14 細(xì)胞的 1.8 倍，這種強(qiáng)侵襲性與其高表達(dá) MMP-2 和 MMP-14 相關(guān)，酶活性分別是 U14 細(xì)胞的 1.5 倍和 2 倍，可高效降解宮頸肌層的 Ⅰ 型膠原。軟瓊脂克隆形成率達(dá) 45%，克隆體積是 U14 的 1.3 倍，連續(xù)傳代 40 次后，雙表型特征與侵襲能力無衰減，凍存復(fù)蘇存活率超 90%。
在動物模型中，U27 細(xì)胞的成瘤與浸潤速度顯著加快。接種 1×10?個細(xì)胞至 615 小鼠宮頸黏膜，8 天形成原發(fā)瘤，15 天穿透基底膜，21 天浸潤至宮頸外膜（U14 需 28 天），30 天宮旁組織侵犯率達(dá) 80%，較 U14 高 30%。病理顯示腫瘤組織破壞宮頸各層結(jié)構(gòu)，伴明顯炎癥細(xì)胞浸潤，免疫組化可見 CK17 與 CK19 陽性細(xì)胞交錯分布，模擬人類腺鱗癌的侵襲模式。熒光追蹤顯示，細(xì)胞通過分泌肝素酶破壞基底膜硫酸肝素屏障，該酶活性是 U14 細(xì)胞的 2 倍，抑制劑處理可使浸潤深度減少 60%。
發(fā)病機(jī)制研究揭示其du特的分子異常?；蚍治鲲@示，細(xì)胞存在 HPV18 E6/E7 整合，同時伴隨 PIK3CA 基因突變，導(dǎo)致 PI3K/Akt 通路激活程度顯著高于 U14 細(xì)胞（p-Akt 水平高 2 倍），mTOR 下游分子 S6 磷酸化增加 3 倍，mTOR 抑制劑處理后增殖率下降 65%，療效優(yōu)于 U14 細(xì)胞。此外，細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子 HIF-1α 表達(dá)量是 U14 的 1.8 倍，在缺氧環(huán)境下可誘導(dǎo)更多腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞（CD44?比例達(dá) 30%），該亞群接種后成瘤時間縮短至 6 天。
轉(zhuǎn)移機(jī)制方面，U27 細(xì)胞除淋巴轉(zhuǎn)移外，血行轉(zhuǎn)移傾向顯著。動物實驗顯示，35 天肺轉(zhuǎn)移率達(dá) 40%（U14 僅 20%），這與細(xì)胞高表達(dá)血管侵襲相關(guān)分子 VEGFR2 密切相關(guān)，其與血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附率是 U14 的 2 倍，VEGFR2 抗體處理可使肺轉(zhuǎn)移率下降 55%。基因芯片顯示，轉(zhuǎn)移灶細(xì)胞中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)基因 Twist1 和 ZEB1 表達(dá)量較 U14 高 1.6 倍，E - 鈣粘蛋白表達(dá)下降 70%，細(xì)胞間連接更松散。
在藥物篩選中，U27 細(xì)胞對傳統(tǒng)藥物敏感性較低，shun鉑 IC50 是 U14 細(xì)胞的 1.7 倍，但對 PI3K/mTOR 雙靶點(diǎn)抑制劑敏感，聯(lián)合用藥可使體內(nèi)瘤體縮小 80%，宮旁浸潤率降至 25%。其高侵襲特性使其成為抗浸潤藥物的理想模型，某中藥提取物可抑制其 MMP-14 活性，使宮頸深層浸潤率下降 50%，展現(xiàn)出治療潛力。
腫瘤微環(huán)境研究顯示，U27 細(xì)胞可招募更多腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM），TAM 分泌的 IL-1β 可進(jìn)一步增強(qiáng)其侵襲能力，二者形成 “侵襲 - 炎癥” 正反饋 loop，IL-1β 拮抗劑處理可使 TAM 浸潤減少 45%，腫瘤侵襲深度降低 50%，這一機(jī)制在 U14 細(xì)胞中相對較弱。
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