BY-1434 PK15-IL2表達(dá)IL2的豬腎上皮細(xì)胞系
- 公司名稱(chēng) 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1434
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/8/1 10:46:12
- 訪問(wèn)次數(shù) 256
聯(lián)系方式：吳含18121041631 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|
來(lái)源與建立背景
形態(tài)與生長(zhǎng)特征
功能特性
懸浮適應(yīng)性特征：高表達(dá)懸浮生長(zhǎng)相關(guān)基因，如細(xì)胞骨架蛋白 β-actin（表達(dá)量是貼壁 PK15 細(xì)胞的 1.5 倍），細(xì)胞間黏附分子表達(dá)下降 60%，避免聚團(tuán)過(guò)大導(dǎo)致的營(yíng)養(yǎng)不均；同時(shí)代謝效率顯著提升，葡萄糖消耗速率達(dá) 50mg/L/h，乳酸代謝能力是 ZYM-DIEC02 細(xì)胞的 3 倍，可維持高密度培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。
病毒受體與敏感性：保留豬腎細(xì)胞的病毒受體譜，如豬瘟病毒受體 CD46（陽(yáng)性率 92%）、口蹄疫病毒受體整合素 β1（陽(yáng)性率 88%），其受體表達(dá)量與貼壁 PK15 細(xì)胞相當(dāng)；對(duì)豬瘟病毒、口蹄疫病毒的感染效率達(dá) 95%，豬瘟病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL（與 ZYM-DIEC02 細(xì)胞相當(dāng)，但產(chǎn)量因密度優(yōu)勢(shì)提升 10 倍）。
無(wú)血清適應(yīng)能力：可在化學(xué)成分明確的無(wú)血清培養(yǎng)基中穩(wěn)定生長(zhǎng)，擺脫對(duì)胎牛血清的依賴(lài)，外源蛋白污染風(fēng)險(xiǎn)降低 90%，且細(xì)胞活性保持 90% 以上，為疫苗純化提供便利。
疫苗工業(yè)化生產(chǎn)
大規(guī)模病毒增殖：在 500L 生物反應(yīng)器中，PK16-U 細(xì)胞密度可達(dá) 8×10?個(gè) /mL，豬瘟病毒產(chǎn)量達(dá) 8×101? TCID??（是 10 層細(xì)胞工廠的 20 倍），單位體積生產(chǎn)成本降低 60%；口蹄疫疫苗生產(chǎn)中，病毒滴度達(dá) 10?.2 PFU/mL，疫苗效力與傳統(tǒng)工藝相當(dāng)，但生產(chǎn)周期縮短 50%，我國(guó)主流疫苗企業(yè)已廣泛采用該細(xì)胞系。
生產(chǎn)工藝優(yōu)化：基于其懸浮特性，開(kāi)發(fā)連續(xù)灌流培養(yǎng)工藝，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞密度維持在 1×10?個(gè) /mL 以上，病毒收獲周期從批次培養(yǎng)的 72 小時(shí)延長(zhǎng)至 14 天，總病毒產(chǎn)量提升 3 倍，且產(chǎn)品質(zhì)量波動(dòng)系數(shù)＜5%（優(yōu)于貼壁培養(yǎng)的 15%）。
病毒學(xué)研究規(guī)?；_(kāi)展
高通量病毒分離：利用 96 孔板懸浮培養(yǎng)體系，單次可處理 1000 份臨床樣本，豬瘟病毒分離效率達(dá) 90%（與 ZYM-DIEC02 細(xì)胞相當(dāng)），但操作效率提升 8 倍，適合疫病暴發(fā)時(shí)的大規(guī)模篩查。
病毒復(fù)制機(jī)制研究：通過(guò)懸浮培養(yǎng)的同步化優(yōu)勢(shì)，精準(zhǔn)分析豬瘟病毒在不同增殖階段的基因表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)病毒非結(jié)構(gòu)蛋白 NS5A 在懸浮細(xì)胞中表達(dá)量提升 40%，揭示懸浮環(huán)境對(duì)病毒復(fù)制的調(diào)控機(jī)制。
藥物篩選與安全性評(píng)價(jià)
抗病du藥物高通量篩選：建立基于懸浮細(xì)胞的自動(dòng)化篩選平臺(tái)，日均可檢測(cè) 5000 種化合物，某抗豬瘟病毒候選藥物的 EC??值在該模型中與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)一致性達(dá) 92%，篩選效率是 ZYM-DIEC02 細(xì)胞的 10 倍。
疫苗安全性評(píng)估：利用其高密度培養(yǎng)特性，快速積累細(xì)胞代謝產(chǎn)物，評(píng)估疫苗潛在毒性，某批次疫苗的內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)間從傳統(tǒng)方法的 48 小時(shí)縮短至 6 小時(shí)，且靈敏度提升 10 倍。
基礎(chǔ)培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基：無(wú)血清懸浮培養(yǎng)基（含重組胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白），pH 維持在 7.2-7.4；為提升病毒產(chǎn)量，可添加 5ng/mL 生長(zhǎng)激素，使細(xì)胞密度提升 20%。
傳代流程：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 8×10?個(gè) /mL 時(shí)，按 1:5 比例稀釋傳代，離心速度 1200rpm，無(wú)需消化處理，操作時(shí)間僅為貼壁細(xì)胞的 1/5，避免酶解對(duì)細(xì)胞的損傷。
凍存保護(hù)：采用含 10% DMSO 的無(wú)血清凍存液，細(xì)胞密度 5×10?個(gè) /mL，程序降溫至 - 80℃過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮，復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴 2 分鐘，直接接種至搖瓶，存活率可達(dá) 95%。
病毒培養(yǎng)與檢測(cè)操作
大規(guī)模病毒培養(yǎng)：生物反應(yīng)器中細(xì)胞密度達(dá) 5×10?個(gè) /mL 時(shí)，按 MOI=0.01 接種病毒，37℃培養(yǎng) 48 小時(shí)，通過(guò)離心收獲病毒液，病毒滴度較貼壁培養(yǎng)提升 30%，且收獲過(guò)程無(wú)需yi酶處理，減少雜蛋白污染。
高通量檢測(cè)：將懸浮細(xì)胞與病毒共孵育后，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)感染率，1 小時(shí)內(nèi)可完成 96 孔板檢測(cè)，結(jié)果變異系數(shù)＜6%，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)顯微鏡觀察法。
優(yōu)勢(shì)：
規(guī)?；囵B(yǎng)優(yōu)勢(shì)：懸浮培養(yǎng)密度是貼壁細(xì)胞的 10-20 倍，生物反應(yīng)器可擴(kuò)展至 1000L 以上，徹di突破傳統(tǒng)培養(yǎng)的空間限制，疫苗生產(chǎn)規(guī)模提升 100 倍以上。
成本顯著降低：無(wú)血清培養(yǎng)減少血清成本（占傳統(tǒng)培養(yǎng)基的 60%），自動(dòng)化操作降低人力成本，且病毒單位產(chǎn)量成本下降 70%，使疫苗價(jià)格更親民。
操作高效便捷：無(wú)需yi酶消化、換液等貼壁操作，傳代時(shí)間縮短 80%，且可實(shí)現(xiàn)連續(xù)培養(yǎng)，適合工業(yè)化流水線(xiàn)生產(chǎn)。
局限性：
病毒譜局限：對(duì)腸道病毒（如 TGEV）的敏感性?xún)H為 ZYM-DIEC02 細(xì)胞的 30%，不適合腸道病毒疫苗生產(chǎn)。
聚團(tuán)控制要求高：過(guò)度聚團(tuán)（＞200μm）會(huì)導(dǎo)致內(nèi)部細(xì)胞死亡，需嚴(yán)格控制搖床轉(zhuǎn)速與接種密度，增加工藝復(fù)雜度。
功能研究受限：缺乏貼壁細(xì)胞的極性與屏障功能，不適合病毒感染機(jī)制的精細(xì)研究，需與 ZYM-DIEC02 等細(xì)胞系配合。
以上信息僅供參考，詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。
采購(gòu)中心
化工儀器網(wǎng)