BY-0476 CHO倉鼠卵巢細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0476
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/24 16:10:27
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CHO倉鼠卵巢細胞系
CHO倉鼠卵巢細胞系是生物制藥與生物技術(shù)領(lǐng)域的 “主力細胞系”,源于中國倉鼠卵巢組織,因具備高效表達重組蛋白、遺傳穩(wěn)定性強及易于基因編輯等特性,成為重組藥物生產(chǎn)與蛋白功能研究的核心工具,應用價值橫跨基礎(chǔ)研究與產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。
該細胞系建立于 20 世紀 50 年代,由美國科學家 Puck 從成年中國倉鼠卵巢皮質(zhì)組織中分離獲得。原代細胞經(jīng)多次傳代篩選,形成形態(tài)均一的上皮樣細胞群,早期用于遺傳學研究,20 世紀 80 年代后因被成功用于表達重組人gan擾素,逐漸成為生物制藥的shou選宿主細胞,目前已衍生出 CHO-K1、CHO-S、CHO-DG44 等多個亞型,各亞型在蛋白表達效率與代謝特性上略有差異。
生物學特性方面,CHO 細胞呈上皮樣形態(tài),體外培養(yǎng)時為多邊形或短梭形,貼壁生長,部分亞型(如 CHO-S)可適應懸浮培養(yǎng)。細胞核大而明顯,呈橢圓形,位于細胞中央,胞質(zhì)豐富,含多個線粒體以支持高強度蛋白合成。生長特性上,其倍增時間約為 18-24 小時,在含 10% 胎牛血清的 DMEM 或 F-12 培養(yǎng)基中生長迅速,最適培養(yǎng)條件為 37℃、5% CO?環(huán)境,懸浮培養(yǎng)時需添加抗結(jié)團劑以維持單細胞狀態(tài),傳代至 100 代仍保持核型穩(wěn)定,這一特性遠超其他哺乳動物細胞系。
功能特性上,CHO 細胞的核心優(yōu)勢在于重組蛋白表達能力。其具備完整的蛋白折疊與翻譯后修飾系統(tǒng),可對表達的重組蛋白進行糖基化、磷酸化等修飾,修飾模式接近人類細胞,解決了原核表達系統(tǒng)的蛋白活性問題。研究顯示,通過基因工程改造的 CHO 細胞,單克隆抗體表達量可達 10-15g/L,遠超骨髓瘤細胞系,且表達產(chǎn)物的均一性高,免疫原性低。同時,該細胞系對葡萄糖的代謝效率高,可在無血清培養(yǎng)基中高密度培養(yǎng),為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。
在研究應用中,CHO 細胞系的價值體現(xiàn)在多個維度。在生物制藥領(lǐng)域,全球 70% 以上的重組蛋白藥物(如單克隆抗體、胰島素、生長激素)均由其生產(chǎn),阿達木單抗、利妥xi單抗等重磅藥物的生產(chǎn)工藝均以 CHO 細胞為核心,其高表達效率與產(chǎn)物安全性經(jīng)過了數(shù)十年臨床驗證。在蛋白功能研究中,CHO 細胞因背景蛋白干擾少,常被用于外源基因的過表達實驗,通過構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系,可解析膜蛋白的結(jié)構(gòu)功能或酶的催化機制,G 蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)的信號傳導研究中,CHO 細胞是zui常用的表達系統(tǒng)。
此外,該細胞系在基因編輯技術(shù)驗證中也具重要價值。其基因組序列明確,且對鋅指核酸酶(ZFN)、CRISPR/Cas9 等編輯工具的兼容性好,通過敲除或敲入特定基因,可構(gòu)建缺陷型或報告型細胞系,用于藥物靶點驗證或高通量篩選。例如,敲除 CHO 細胞的 GS(谷an酰胺合成酶)基因后,可建立依賴外源谷an酰胺的篩選系統(tǒng),顯著提高重組細胞株的篩選效率。
培養(yǎng)與保存 CHO 細胞需根據(jù)亞型調(diào)整策略。貼壁培養(yǎng)的 CHO-K1 適合用 0.25% yi酶 - EDTA 消化傳代,當細胞融合度達 80% 時傳代,避免過度密集導致接觸抑制;懸浮培養(yǎng)的 CHO-S 則需控制攪拌速度(100-150rpm),使用化學成分明確的無血清培養(yǎng)基以減少污染風險。長期保存時,取對數(shù)生長期細胞,用含 10% DMSO 的凍存液梯度降溫后存入液氮,復蘇存活率可達 90% 以上,且復蘇后 24 小時即可恢復正常生長速率。
與其他表達系統(tǒng)相比,CHO 細胞的優(yōu)勢在于:蛋白修飾接近人類、表達量高、可規(guī)模化培養(yǎng),且無病毒污染風險(與人類細胞系相比);局限性在于培養(yǎng)成本較高,部分復雜糖基化修飾仍與人類細胞存在差異。為此,科研人員通過基因編輯優(yōu)化其糖基轉(zhuǎn)移酶表達,已大幅縮小這一差距。
總之,CHO 倉鼠卵巢細胞系憑借其卓yue的重組蛋白表達能力與遺傳穩(wěn)定性,成為連接基礎(chǔ)研究與生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的關(guān)鍵紐帶,推動了數(shù)千種重組藥物的研發(fā)上市,至今仍是生物技術(shù)領(lǐng)域不可替代的核心工具,其技術(shù)迭代持續(xù)yin領(lǐng)生物制藥行業(yè)的發(fā)展。
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