高GC納米PCR試劑盒選上海戶實(shí)

產(chǎn)品目錄號：NHS21-5

高GC納米PCR試劑盒產(chǎn)品說明：本試劑盒既適用于高GC序列的擴(kuò)增，也適用于一般PCR擴(kuò)增。產(chǎn)品定位于解決目前市場上難于擴(kuò)增的若干PCR反應(yīng)。納米PCR是納米材料輔助的基因擴(kuò)增技術(shù),研究表明某些納米材料可以增強(qiáng)基因擴(kuò)增的總體效率。

高GC納米PCR試劑盒12ul/160次   配置如下：

2×NanoPCR buffer 11-1 (1000ul)；

2×NanoPCR buffer 11-2 (1000ul)；

2×NanoPCR buffer 11-3 (1000ul)；

dNTPs (2.5mM)(300ul)；

MgCl₂ (25 mM) (500ul)；

Taq DNA polymerase (5 U/ul) (60ul)

使用建議:

• 納米材料容易聚集，每次使用前請震蕩均勻再使用。PCR產(chǎn)物中含有的納米材料一般不影響電泳等后續(xù)操作。
• 一個典型的PCR反應(yīng)（舉例：擴(kuò)增一個高GC片段780bp）設(shè)計(jì)如下：

批量PCR需要計(jì)算并規(guī)劃好實(shí)驗(yàn)中所需要混合的mix總量以及需要單獨(dú)加入PCR體系中的成分和加量。例：做以不同基因組為模板的9管12ul體系的PCR。計(jì)入加樣損耗，按10管加量計(jì)算。試驗(yàn)操作全過程建議在冰盒上進(jìn)行。PCR程序舉例：[94℃-5min]；[94℃-30s，56℃-30s，72℃-40s]×35 cycles（循環(huán)數(shù)可按照PCR產(chǎn)物的多少適當(dāng)調(diào)節(jié)）；[72℃-5min]. 如果不確定*退火溫度，可以先做梯度PCR確定*退火溫度。

按照上表所描述的將mix做好，并反復(fù)搖晃15-20下、上下振蕩后離心（大約待離心機(jī)轉(zhuǎn)到7000rpm隨即停下來就好），離心后，用槍頭分別加入相應(yīng)基因組0.2ul的PCR管內(nèi)，每管11.8ul并用槍頭順便混合3下使均勻。放入PCR儀進(jìn)行PCR。

實(shí)驗(yàn)舉例1：擴(kuò)增以人類基因組為模板的38對序列引物。該38對高GC擴(kuò)增產(chǎn)物GC>60%,大小均在700-800bp左右。38對退火溫度基本*。使用上述12ul擴(kuò)增體系， 使用NanoPCR試劑盒進(jìn)行擴(kuò)增的圖片如圖1所示。

保存溫度：-20℃

保質(zhì)期：12個月