產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MMP抑制劑（Doxycycline hyclate）

英文名稱：Doxycycline hyclate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1g|5g|10g

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

山茱萸（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole] DNA復(fù)制抑制因子抗體包裝5g

山茱萸新苷I英文名稱： N-(1-Pyrenyl)maleimideG蛋白α抑制蛋白2抗體包裝25g

珊瑚菜內(nèi)酯，珊瑚菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： AlvimopanG蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體包裝5g

珊瑚姜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Myristyl sulfobetaineG基丁B型受體2抗體包裝1g

商陸皂苷T英文名稱： 3-(N,N-Dimethylpalmitylammonio)propanesulfonate(SHDAB)葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體（熱休克蛋白70蛋白5）包裝250mg

商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Lithium Dodecyl Sulfate葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體包裝1mg

商陸皂苷辛英文名稱： Sulfobetaine 8糖原合激-3β抗體包裝10MG

芍藥苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sulfobetaine 10糖原合激-3β抗體包裝25g

芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sulfobetaine 12,SDDAB三磷鳥苷環(huán)解抗體包裝1g

蛇床子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Entacapone促代謝型谷受體5抗體包裝5g

蛇床子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triton X-114生長調(diào)節(jié)致癌基因-1抗體GROa包裝100g

蛇膽汁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triton X-405G蛋白偶合受體激1抗體包裝500g

射干（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CHAPS促胃泌釋放肽抗體包裝100g

麝香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CHAPSO磷化G蛋白通路抑制蛋白1抗體包裝25g

伸筋草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,4-Dithioerythritol 腦糖原磷化抗體包裝5g

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品內(nèi)源性糖皮質(zhì)激試劑盒龍血B ;Loureirin B

黃桿菌Flavobacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：純度≥99.0%（HPLC）內(nèi)源性分泌型糖基化終產(chǎn)物受體試劑盒龍血A;Loureirin A

: =IMI240054=NRRL2771資源名稱: 柱孢犁頭霉根狀變種 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR內(nèi)皮脂肪試劑盒輪環(huán)藤堿;Cycleanine
MMP抑制劑（Doxycycline hyclate）胰島匙羹藤苷元Human, Mouse

重組人胰島因子匙羹藤新苷元Human

胰島樣生長因子-II（抗原）匙羹藤葉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

胰島樣生長因子-I（抗原）匙羹藤皂苷C（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

吲哚-3-乙偶聯(lián)牛血清白蛋白赤脛散（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

白介-17抗原赤芍(川赤芍)（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

豬胰島赤芍（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

間粘附分子-2抗原蟲草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

白介1α/IL-1α臭靈丹（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)