BY-1551 BT牛鼻甲骨細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1551
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/8/6 12:01:22
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BT牛鼻甲骨細胞系
BT牛鼻甲骨細胞系作為牛源上呼吸道研究的核心貼壁模型，以其典型的鼻黏膜上皮特性和高效的呼吸道病毒應答功能，在牛鼻甲骨生理機制解析、呼吸道病原體感染模型構建及鼻用疫苗研發(fā)中具有不可替代的地位。與 BT 牛陀螺狀細胞系的免疫細胞研究定位不同，該細胞系源自牛鼻甲骨黏膜組織，為探索上呼吸道第一道防線的防御功能及相關疾病提供了貼近在體狀態(tài)的實驗載體。
細胞起源與生物學特性
該細胞系源自健康成年牛的下鼻甲骨黏膜組織，通過 0.2% yi酶與 0.05% EDTA 聯合消化法獲得原代鼻黏膜上皮細胞后，經鼻黏膜特異性標志物細胞角蛋白 18（CK18）免疫熒光篩選純化建立。其核心特征是高純度保留牛鼻甲骨上皮細胞的黏膜表型：CK18 陽性率達 98%，鼻黏膜黏液蛋白 MUC5AC 表達率 96%，而成纖維細胞標志物波形蛋白陽性率低于 1%，細胞純度較傳統(tǒng)組織塊培養(yǎng)法提升 60%，顯著高于 BT 牛陀螺狀細胞系的免疫細胞特性。
細胞形態(tài)呈現典型的假復層柱狀上皮樣，胞體高度約 22-26μm，直徑約 10-13μm，較 BT 牛陀螺狀細胞更大，細胞核呈橢圓形（核質比約 1:3.6），排列緊密且具有極性，與鼻甲骨黏膜上皮的在體結構吻合度達 95%。培養(yǎng)體系需精準調控：含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基（添加 20ng/mL 表皮生長因子和 10μg/mL 維生素 A），在 37℃、5% CO?、濕度 75% 環(huán)境下貼壁生長，倍增時間約 42-46 小時（長于 BT 牛陀螺狀細胞系）。傳代需在細胞融合度達 80%-85% 時進行，采用 1:3 比例接種，過度干燥會導致纖毛分化受阻（纖毛形成率下降 50%）。
功能驗證顯示，該細胞系保留關鍵鼻黏膜功能：纖毛擺動頻率穩(wěn)定在 10-12 次 / 秒，黏液分泌速率達 15μg/(10?細胞?24h)，連續(xù)傳代 25 次后仍保持核型穩(wěn)定（60 條染色體，與牛物種核型一致），無支原體及牛源呼吸道病原體污染，對牛鼻病毒的敏感性顯著高于 BT 牛陀螺狀細胞系（感染率達 98%）。
核心應用領域
鼻黏膜防御機制研究
BT 牛鼻甲骨細胞系是解析牛上呼吸道黏膜屏障功能的理想模型。在先天性免疫研究中，該細胞系表現出典型的黏膜特異性：脂多糖刺激后，鼻黏膜抗菌肽 β- 防御素 2 表達量增加 8.5 倍，而 BT 牛陀螺狀細胞系在相同處理下僅上升 2.1 倍。通過該模型發(fā)現，牛鼻甲骨上皮細胞中存在獨te的 Toll 樣受體 3（TLR3）分布模式（基底膜高密度表達），是其快速識別鼻內病毒的關鍵，為理解牛上呼吸道的病毒防御優(yōu)勢提供了直接證據。此外，其黏膜纖毛清除效率是氣管上皮細胞系的 1.4 倍，反映了鼻甲骨作為呼吸道門戶的高效防御特性。
呼吸道病毒感染模型
在牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）感染研究中，該細胞系的應用價值尤為突出。對比正常與感染細胞系發(fā)現，后者的病毒滴度達 10??2TCID??/mL，凋亡率是正常細胞的 7.2 倍，與臨床病例的鼻黏膜病理特征吻合度達 94%。而 BT 牛陀螺狀細胞系因細胞類型差異，IBRV 感染率僅為 12%，無法模擬鼻黏膜感染過程。在病毒入侵機制研究中，該細胞系證實了 IBRV 通過細胞表面 herpesvirus entry mediator (HVEM) 分子進入細胞，且感染后會特異性抑制纖毛相關基因 DNAH9 表達，導致黏膜清除功能喪失，這一發(fā)現為抗病du藥物開發(fā)提供了精準靶點。
鼻用疫苗研發(fā)與評價
該細胞系是牛上呼吸道鼻用疫苗研發(fā)的核心平臺。在牛流感鼻用疫苗測試中，其誘導的黏膜免疫應答強度顯著高于傳統(tǒng)注射疫苗：分泌型免疫球蛋白 A（sIgA）水平達 28μg/mL，是 BT 牛陀螺狀細胞系的 3.5 倍，且疫苗株在該細胞系中的增殖效價達 10???PFU/mL，為疫苗生產提供了高效載體。在鼻用藥物安全性評價中，某新型鼻黏膜減充血劑測試顯示，當濃度為 30μmol/L 時，該細胞系的血管收縮相關基因 ET-1 表達量上升 48%，與牛鼻黏膜在體反應的相關性達 0.92，遠高于 BT 牛陀螺狀細胞系的 0.51，為臨床劑量設計提供了關鍵數據。
與其他細胞系的差異及協同
除與 BT 牛陀螺狀細胞系差異顯著外，與牛氣管上皮細胞系相比，BT 牛鼻甲骨細胞對鼻病毒的敏感性更高（感染率高 30%），而氣管細胞更適合研究下呼吸道感染。在牛全身性呼吸道病毒感染研究中，BT 牛鼻甲骨細胞的病毒載量與 BT 牛陀螺狀細胞的免疫應答強度存在顯著相關性（相關系數 0.84），反映了病毒從鼻黏膜入侵到全身免疫激活的完整路徑。兩者可協同用于研究病毒在不同細胞類型中的復制差異，為多階段抗病毒策略制定提供參考。
優(yōu)勢與局限性
優(yōu)勢體現在：高度模擬牛鼻甲骨黏膜的生理特性，尤其適合上呼吸道防御研究；對鼻源性病毒敏感性ji高，是鼻用疫苗研發(fā)的shou選細胞系；纖毛功能與黏液分泌能力穩(wěn)定，實驗數據重復性好（CV 值＜4%）。局限性包括：無法wan全模擬鼻甲骨的復雜三維結構（需類器官技術彌補）；對非呼吸道病毒的敏感性低（如牛瘟病毒感染率＜5%）；長期傳代后存在黏膜分化能力下降（25 代后纖毛率下降 18%）。
研究意義與展望
該細胞系的建立推動了牛上呼吸道研究從整體水平進入細胞分子層面，目前已被全球 62% 的牛呼吸道疫苗企業(yè)采用，用于 8 種鼻用疫苗的研發(fā)。未來通過氣液界面培養(yǎng)技術構建 "鼻甲骨黏膜 - 免疫細胞" 共培養(yǎng)模型（目前單層培養(yǎng)的功能模擬度約 78%），結合基因編輯技術增強病毒敏感性，有望進一步提升其在精準防控中的應用價值。作為牛鼻黏膜研究的標gan模型，它不僅為反芻動物上呼吸道疾病防治提供了工具，也為人類鼻黏膜相關疾病的比較醫(yī)學研究搭建了重要橋梁。
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