以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

雞葡萄球菌色B抗體Human FAM158A ELISA Kit兔子免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

猴頭菌（猴頭蘑、猬菌）色c氧化1抗體Human FAM160B2 ELISA Kit兔子免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

黑曲霉表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體Human FAM160B1 ELISA Kit兔子免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒

節(jié)桿菌屬表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體Human FAM164C ELISA Kit兔子免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體Human FAM116B ELISA Kit兔子硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌硫軟骨抗體Human FAM114A1 ELISA Kit兔子硫軟骨(CS)免疫試劑盒

球孢白僵菌上皮類癌相關(guān)抗原抗體Human FAM117B ELISA Kit兔子硫類肝(HS)免疫試劑盒

馬鏈球菌馬亞種磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體Human FAM168B ELISA Kit兔子硫角質(zhì)(KS)免疫試劑盒

柱狀田頭菇（茶樹菇、楊樹菇）著絲粒蛋白KHuman FAM118B ELISA Kit兔子可溶性粘附分子(Sam)免疫試劑盒

Geobacter腫瘤/抗原1BHuman FAM119A ELISA Kit兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體Human FANCM ELISA Kit兔子可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌8號染色體開放閱讀框K29抗體Human FAM76A ELISA Kit兔子可溶性P選擇(sP-selectin)免疫試劑盒

大腸埃希菌色P450 3A4抗體Human FARS2 ELISA Kit兔子可溶性E選擇(sE-selectin)免疫試劑盒

*百脈根根瘤菌色CYP2D1抗體Human FARSA ELISA Kit兔子可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒

鴨肝炎病CD33抗體Human FAM84B ELISA Kit兔子抗中性粒顆?？贵w(ANGA)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白8抗體Human FAM78A ELISA Kit兔子抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ Ab)免疫試劑盒

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRToll作用蛋白試劑盒鳥嘌呤

金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRToll樣受體9試劑盒L-鳥鹽鹽

: IFFI2317資源名稱: 黑曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRToll樣受體7試劑盒鳥苷
阿霉素(Doxorubicin)香菇 2-溴苯硫酚抵抗Elisa

香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 2--6-甲抵抗樣分子αElisa

根瘤 2,4,6-三苯甲淀粉Elisa

馬氏副球 4-芐基苯淀粉樣前體蛋白Elisa

谷氨酸棒桿 3,5-二苯凋亡相關(guān)因子Elisa

中國臺灣根霉 3,4-二苯甲凋亡相關(guān)因子配體Elisa

根瘤 二硫烷凋亡誘導(dǎo)因子Elisa

孟加拉副球 2,4-二苯丁酰酯Elisa

茄鏈格孢 2,3-二苯蕈堿型乙酰受體Elisa

鼠李糖乳桿 2-雙環(huán)己基膦-2',6'-二甲氧基聯(lián)苯端粒Elisa

奇異酵母 4--3-三氟甲基芐對苯氨酸Elisa

植物乳桿 L-賴氨酸對氧磷1Elisa

假單胞屬 4-溴-3-氟苯多巴Elisa

裂褶 2,3,4,6-四-O-芐基-alpha-D-吡喃葡萄糖多巴D1受體Elisa

產(chǎn)二鏈霉 4-氟鄰苯二多巴D2受體Elisa