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天狼猩紅(Sirius Red)染色

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生物實驗

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北京嘉美臻元生物技術有限公司(嘉美實驗)是一家專注于生命科學領域的高科技企業(yè),公司創(chuàng)立于2005年,由在國內(nèi)科研試劑、實驗技術、質(zhì)量管理領域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)、專家團隊組建而成;2009年在北京重組,先后成立了北京嘉美諾斯生物科技有限公司(主要開展生物相關產(chǎn)品進、出口業(yè)務),北京嘉美紐諾生物科技有限公司(主要為大型藥廠、診斷試劑公司提供服務)。為方便實驗服務項目開展,成立了北京嘉美臻元生物技術有限公司,以“嘉美實驗”品牌提供實驗外包服務。近五年來,公司已為全國各類科研用戶提供了近5000個大大小小的專項實驗外包或整體課題外包項目服務,實驗項目涵蓋了生命科學、醫(yī)學的各研究領域。經(jīng)過多年努力,公司已成為北京地區(qū)Maximum、Most professional、Most efficient的生物實驗外包服務平臺。已成功為協(xié)和醫(yī)院、liberation army總醫(yī)院等全國數(shù)百家醫(yī)院提供了優(yōu)質(zhì)的實驗外包服務。

嘉美實驗面對醫(yī)學院及其附屬醫(yī)院、醫(yī)藥科研院所、大學生命*、中科院、藥企等類型單位提供單項和整體課題實驗外包服務。對于科研任務繁重但工作繁忙而無暇分身的臨床醫(yī)生而言,我們的實驗外包服務尤為需要,只需要實驗委托者將課題交付我們,剩下的工作由嘉美實驗完成,這為實驗委托者節(jié)約了大量寶貴的時間和精力,提高了生活品質(zhì)。對于面臨畢業(yè)的廣大碩士、博士而言,我們樂于一起探討課題方案的合理性并給出建議,Maximum degree上優(yōu)化實驗方案和節(jié)約資金。對于課題也許您還只是個設想,嘉美生物卻能將您的設想變?yōu)橐粋€個成功的實驗碩果。

嘉美實驗所追求的目標不僅僅是一個科研課題實施的過程;我們更多的是關注實驗前后的每個環(huán)節(jié),真正成為實驗委托者在醫(yī)學和生命科學研究路上的良師益友。“專注生物技術,服務生命科學”,為您構(gòu)筑醫(yī)學和生命科學研究的一座座豐碑!

服務特點
結(jié)果可靠:行業(yè)老牌企業(yè),11年技術服務經(jīng)驗沉淀,質(zhì)量全程管控,實驗結(jié)果可靠。
數(shù)據(jù)規(guī)范:326家醫(yī)院,68所高校,近5000個項目的積累,嚴格遵循行業(yè)學術標準。
服務高效:線上線下7X24小時,多渠道響應咨詢及服務需求,確保溝通及時、暢通。
配套齊全:從課題設計、試劑購買、實驗開展、SCI論文發(fā)表,可提供一站式配套服務。
管理精細:公司以客戶需求為中心,管理流程規(guī)范、保密機制嚴格,成本控制有效。

服務流程
1、提供項目方案:客戶根據(jù)課題標書及需做實驗的主體內(nèi)容,擬定并提供初步的項目方案,含課題申請書,實驗方案,實驗設計,實驗思路,實驗文獻等與實驗相關等內(nèi)容和資料;
2、項目評估報價:公司技術團隊根據(jù)客戶提供的相關資料,綜合評估項目可行性,與客戶共同確定準確的實驗項目執(zhí)行方案,給出準確的實驗價格;
3、簽訂服務協(xié)議:簽署服務協(xié)議并預付部分費用,做好實驗初步準備及項目預安排;
4、執(zhí)行服務項目:正式啟動實驗進程,全面展開實驗,確保項目有效執(zhí)行;
5、溝通項目進展:及時溝通反饋實驗的Newest進展,隨時了解掌控實驗的Newest動態(tài);
6、完成項目交付:支付剩余尾款,交付實驗結(jié)果,正確應用實驗結(jié)果,提供售后服務。

生物實驗外包

產(chǎn)地類別 進口

天狼猩紅(Sirius Red)染色


一、天狼猩紅(Sirius Red)染色簡介
利用膠原蛋白聚合及其纏繞螺旋排列不同的特點,使用天狼星紅苦味酸染色法,在偏振光顯微鏡下,可以根據(jù)雙折光性和著色的不同,分別顯示出四型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)膠原纖維。區(qū)分并定量這四種膠原纖維,對于研究病變的發(fā)生機理和演變過程有一定的意義。

二、試劑配制

1、天狼星紅-飽和苦味酸液:0.5%天狼星紅10ml,苦味酸飽和水溶液90ml。

2、天青石藍液:天青石藍B 1.25g,鐵明礬1.25g,蒸餾水250ml。溶解煮沸,冷卻后過濾,加入甘油30ml,然后再加入濃硫酸0.5ml(硫酸一定要后加入)。


三、染色步驟

1、石蠟切片脫蠟至水。

2、天青石藍液5~10min

3、蒸餾水沖洗3次

4、天狼星紅飽和苦味酸液15~30min(可用Harris蘇木素液淡染細胞核)

5、無水乙醇分化與脫水。

6、 二甲苯透明、光學樹膠封固

7、結(jié)果:

  1)普通光鏡觀察:膠原纖維呈紅色,細胞核呈綠色,其他成分呈黃色。

  2)偏振光顯微鏡下觀察:

  3)Ⅰ型膠原纖維:紅色或黃色,排列緊密,具強雙折光性

  4)Ⅱ型膠原纖維:多種色彩,疏松網(wǎng)狀、弱雙折光性

  5)Ⅲ型膠原纖維:綠色、細纖維、弱雙折光性

  6、Ⅳ型膠原纖維:淡黃色、弱雙折光性(基膜成分)

四、樣本說明

1、石蠟切片

取材:1、組織離體后需及時固定;2、組織標本不宜過大、過厚。

固定:1、固定液:10%福爾馬林(4%多聚甲醛)或10%中性甲醛;2、用量:一般固定液的量與組織體積比為10:1~20:1;3、固定:適宜的固定時間,主要根據(jù)材料的大小、松密程度及固定液的穿透速度而定。

保存:切片經(jīng)60℃烤片3-5小時后,可于常溫或4℃干燥保存。
 

2、冰凍切片

取材:取材后需立即置于超低溫冰箱或液氮中保存。

固定:樣本冰凍切片后,應立即放入甲醇、丙酮、95%酒精、4%多聚甲醛等固定液中固定。

保存:固定好的切片自然風干,密封后置于-80℃、-20℃保存,盡快用于后續(xù)實驗。
 

3、細胞塊石蠟切片

細胞量較多的樣品,可離心分離所需細胞,用中性甲醛固定后制作成瓊脂細胞塊,然后按照制作石蠟切片的操作流程進行切片。
 

4、細胞爬片

在孔板里做的細胞爬片,爬片取出后,用PBS洗滌2次(根據(jù)研究目的,PBS洗滌可選擇不做),用4%多聚甲醛4℃固定15分鐘,將表面液體吹干,置于-20℃保存。若在短時間內(nèi)即開展實驗,可在加固定液后,于4℃冰箱中放置一段時間。
 

5、細胞涂片

細胞涂片常用的固定液有95%酒精(為常用)、酒精-冰醋酸液、Ethyl ether-酒精液和Carney’s液等。 

 

五、免疫組化實驗注意事項

1、常用的固定液為中性甲醛和4%多聚甲醛,能使大多數(shù)抗原保存良好,適用于免疫組織化學。

2、病理實驗切片Best是防脫片,以免實驗過程中出現(xiàn)掉片。若客戶提供切片,應告知切片有無防脫處理。

3、骨組織、皮膚組織或脂肪含量較高的樣本,實驗過程中有較高的掉片幾率。

4、客戶可提供組織塊(以10%福爾馬林、4%多聚甲醛或10%中性甲醛固定,如組織塊極小請事先說明)、蠟塊或切片(使用免疫組化切片,以避免實驗過程中掉片)

5、待檢測蛋白的種屬、實驗分組情況及實驗背景資料、其他具體要求等需事先說明。

6、若客戶提供骨組織或鈣化程度較高的組織進行實驗,需進行脫鈣處理。

7、浸泡在固定液中的組織樣本,在運輸中容器需密封,防止破碎、滲漏。



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