RNA結(jié)合蛋白15抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對(duì)于單克隆抗體尤其如此。

Members of the SPEN (Split-end) family of proteins, including RBM15, have repressor function in several signaling pathways and may bind to RNA through interaction with spliceosome components (Hiriart et al., 2005 [PubMed 16129689]).

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。

4、試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對(duì)異種動(dòng)物而言，是良好的抗原物質(zhì)。可以刺激異種動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

藻類細(xì)胞鹽還原酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

兩步法RT－PCR試劑盒

植物組織膜性囊泡（vacuole）分離試劑盒

載玻片細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

通用型沙眼衣原體（Chlamydia）基因檢測(cè)試劑盒

食物鉀離子（K）濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒

組織多巴胺（dopamine）比色法定量檢測(cè)試劑盒

石蠟切片氧化8-氧鳥苷（8-oxo-G）熒光染色測(cè)定試劑盒

Acetic alcohol固著液

產(chǎn)氣莢膜梭菌腸毒素（Clostridium perfringens cpe）鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

載玻片細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

體液乳糖含量酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化比色法定量檢測(cè)試劑盒

組織JNK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

EDTA二鉀血液抗凝液

脂肪細(xì)胞分化因子24抗體

睪丸分化過程轉(zhuǎn)錄因子MRO抗體

單克隆抗體

LSM14A蛋白抗體

細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白MMRN2抗體

癌/睪丸抗原105抗體

淋巴細(xì)胞抗原Ly6D抗體

RNA結(jié)合蛋白15抗體B淋巴細(xì)胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子2抗體