2030046 無血清，無DMSO低溫凍存培養(yǎng)
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 北京聯(lián)立信生物技術有限公司
- 品牌
- 型號 2030046
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2015/9/3 17:25:46
- 訪問次數(shù) 424
產(chǎn)品標簽
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CELLVATION™ CRYOPRESERVATION MEDIUM
（CellVation —無血清凍存培養(yǎng)基）
描述：
Mpbio公司的Cellvation™ 是一款非常*的細胞凍存培養(yǎng)基，不含有DMSO或血清，專門設計用于無血清培養(yǎng)細胞的凍存，已成功用于超過50種細胞的凍存/復蘇實驗，涵蓋原代細胞、有限細胞，懸浮細胞及貼壁細胞。除此之外，cellvation™也是所有血清依賴性培養(yǎng)細胞凍存的理想選擇。
優(yōu)點：
* 不需血清，不需DMSO，不需細胞培養(yǎng)基，只需按1 x 106 - 1 x 107 cells/ml的濃度加入相應體積的cellvation即可實現(xiàn)細胞的凍存；
*不含血清，適用于無血清生長細胞的凍存/解凍實驗，也適用于血清依賴性細胞的凍存；
* 不含DMSO，避免出現(xiàn)由DMSO引起的細胞毒性或形態(tài)分化現(xiàn)象；
**復蘇率與更快的細胞貼壁速度；
* 1X濃度培養(yǎng)基，不需稀釋，即用型。
* 一系列記錄顯示已成功用于50多種細胞的凍存：細胞系或原代細胞。
應用實例：
應用實例：
| 表1 成功使用cellvation™ 進行凍存的細胞名稱 | ||||
| A375 人惡性黑色素瘤細胞 | A549 人肺癌細胞 | D283 人髓母細胞瘤細胞 | Daoy人髓母細胞瘤細胞 | DU 145 人前列腺癌細胞 |
| HeLa 人宮頸癌細胞 | Hep-2 人扁平上皮癌細胞 | LNCaP 人轉移性前列腺癌細胞 | LS 174T 人結腸癌細胞 | MCF7人乳腺癌細胞 |
| MCF 10人正常乳腺上皮 | MRC-5人胚肺細胞 | NCI-H69 人肺小細胞癌 | PC-3 人前列腺癌細胞 | 人原發(fā)性骨髓和外周血干細胞 |
| 人原代淋巴細胞 | Raji人Burkitts淋巴瘤細胞 | 人SF包皮細胞細胞 | ST486 人urkitts淋巴瘤 | U-937 人組織細胞淋巴瘤 |
| 3T3 小鼠胚胎成纖維 | B16BL6 小鼠惡性黑素瘤細胞 | B16F10小鼠惡性黑素瘤細胞 | NSO 小鼠骨髓瘤細胞 | P31NSI/Ag4-1（NS-1） 小鼠非分泌型骨髓瘤細胞 |
| Sp2/0-Ag14 小鼠非分泌型雜交瘤細胞 | Rat2 大鼠胸苷激酶突變體胚胎細胞 | CB 牛主動脈內(nèi)皮細胞（原代） | MDBK 牛腎臟細胞 | CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞 |
| hilDCK 犬腎臟細胞 | CRFK 貓腎臟細胞 | LLC-PK 豬腎臟細胞 | ST 豬胎睪丸（原代） | 非洲綠猴 Vero腎臟細胞 |
| ZF4 斑馬魚胚胎成纖維細胞 | JB6C1 小鼠30-7b 表皮腫瘤細胞 | JB6C1 小鼠 41-5a 表皮腫瘤細胞 | RT 101小鼠表皮腫瘤 | RAW 264.7 小鼠單核巨噬細胞 |
| CPA-47 牛肺動脈細胞 | CPAE Bos Taurus（牛）肺動脈內(nèi)皮 | PU5-1.8（PU5-1R） 小鼠單核巨噬細胞 | IC-21小鼠巨噬細胞 | P388D 小鼠單核巨噬細胞 |
| BL-3 B 白血病懸浮淋巴細胞 | BT 牛鼻甲細胞 | CCD-18Co 人正常結腸成纖維細胞 | EBTr牛胚胎器官細胞 | EJG 牛毛細血管內(nèi)皮細胞 |
| HCT 116人結腸癌 | LB9.K 牛正常腎臟 | 6LBLN牛淋巴結細胞 | LS180 人腺癌細胞 | 293 人轉移性原代胚胎腎 |
| 表2 細胞凍存前后復蘇率比較 | |||
| 細胞系 | % （凍存前細胞活力） | % （使用 cellvation™凍存后細胞活力） | % （使用10% DMSO, 10% FBS, RPMI 1640凍存后細胞活力） |
| SP 2/0 AG 14小鼠骨髓瘤細胞 | * | 95% | 90% |
| A375 人惡性黑色素瘤細胞 | 95% | 85% | 80% |
| U937 人組織淋巴瘤細胞 | 90% | 85% | 60% |
實驗步驟：
√凍存（使用前混合均勻，不需稀釋）
（1）檢測細胞培養(yǎng)物：是否含污染物、是否健康生長、生長密度等
（2）若凍存貼壁細胞，37℃，0.25%胰酶消化細胞1-3min；
注：一些生長在無血清培養(yǎng)基的細胞系可能對0.25%胰酶敏感，此時需用更少的胰酶或添加胰酶抑制劑；
（3）細胞計數(shù)，確定活細胞總量。細胞活力需高于80%且細胞需處于對數(shù)期后期或生長匯合前期；
（4）細胞懸液600-800rpms離心10min，去除上清。保留3-5ml用來做無菌檢測（如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、腦心浸液培養(yǎng)基等）和支原體檢測。
（5）適當體積的cellvation™ 輕輕重懸細胞，使用濃度為1 x 106- 1 x 107 cells/ml.一些細胞種類如雜交瘤或骨髓瘤需要增加細胞密度。
（6）分裝細胞懸液于塑料或玻璃凍存管內(nèi)，每管約1-2ml；
（7）密封管子，室溫儲存20-30min，期間偶爾輕輕搖動，使細胞*與凍存液接觸；
（8）將凍存管放在*緣容器內(nèi)，于 -20℃凍存1 hour。將凍存管取出，轉到-70℃冰箱放置1 hour（至關重要的一步，放到-70℃的時間不要超過2 hours），之后將瓶子轉到放到液氮氣相部分，凍存24 hours后再轉至液氮。對大多數(shù)細胞*的冷凍率1℃/min；
√ 細胞復蘇
（1）從液氮中取出細胞凍存瓶，37℃水浴快速解凍細胞；
（2）70%乙醇插拭瓶子表面；
（3）將細胞轉入培養(yǎng)瓶內(nèi)，輕輕加入合適體積的生長培養(yǎng)基（2-5 ml）；
（4） 37℃細胞復蘇至少2h后開始計數(shù)（如臺盼藍染料排除法）；
（5）細胞貼壁后再更換新培養(yǎng)基，對于懸浮細胞則24 hours后換液。
若有必要，按以下方式清洗去除cellvation™：
（1）轉移細胞到15ml離心管內(nèi)，輕輕加入2-3ml*生長培養(yǎng)基（解凍后的培養(yǎng)基更脆弱）；
（2）400 - 600 rpms離心約5-6min；
（3）輕輕倒出上清，適當體積生長培養(yǎng)基重懸細胞，然后轉入培養(yǎng)瓶內(nèi)；
（4）復蘇至少2h后開始計數(shù)；
！特別重要：終止細胞培養(yǎng)前，建議對細胞做一個全面的凍存/解凍循環(huán)實驗從而確保無菌培養(yǎng)及細胞的活力正常。
產(chǎn)品信息： 4℃-8℃保存，有效期至少1年。
| 品牌 | 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 目錄價 |
| Mpbio | 2030046 | cellvation™ 凍存液 | 20 ml | 1540.00 |
| Mpbio | 20300M2 | cellvation™ 凍存液 | 60 ml | 3850.00 |
其他相關產(chǎn)品：室溫保存，可替代sigma公司的D2650。
| 品牌 | 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | * |
| Mpbio | 196055 | DMSO細胞凍存液（細胞培養(yǎng)級），純度 ≥99% | 100 ml | 480元 |
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