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中級會(huì)員 | 第16年

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關(guān)于透析袋的一些簡單常識

時(shí)間:2013/12/23閱讀:2718
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1、透析袋預(yù)處理步驟:

(1)將透析管剪成適當(dāng)長度,10-20cm的小段,即形成透析袋 

(2)在大體積2%(m/V)碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中將透析袋煮沸10min 

(3)將透析袋用蒸餾水*漂洗 

(4)將透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min 

(5)將透析袋冷卻,存放于4攝氏度,應(yīng)確保透析袋始終浸沒在液體中。 

重要:從此步起用透析袋時(shí)一定要帶手套操作?。?!

(6)在使用前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗。

2、用過的透析袋保存前需要怎么處理?
 

      用生理鹽水浸泡以去掉蛋白,并用蒸餾水清洗干凈,然后置50%乙醇中保存即可;

用完以后,要*洗干凈,透析袋也可以保存在0.1%疊氮鈉(可防止微生物生長)里;

0.05%-0.1%疊氮鈉,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,我們上海佰易聚生物商城

通過老師咨詢,建議前兩種保存比較好!
 
3、透析和透析袋的處理:
 
     透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣

品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截

留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。

保留在透析 袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為"保留液",袋(膜)外的溶液稱為"滲出

液"或"透析液"。透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。

透析 的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,

還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。

 4、檢查透析效果的方法是:用1% BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 檢查NaCl、KCl等

透析膜 (前處理方法如下):

1. 戴手套把透析膜剪成適當(dāng)長度,浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。 

2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加熱至 80℃,一邊攪拌至少 30 min。 

3. 換到 10 mM Na2·EDTA 中浸泡 30 min,以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。

4. 再用 80℃ 蒸餾水洗 30 min,然后換到 20% 酒精中,放在 4℃ 冰箱中保存。

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