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16 2018-4

原代細胞培養(yǎng)目的與用途

1、原代細胞科學研究:藥物研究開發(fā)與基礎研究藥物研究與開發(fā)(1)新藥篩選:如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。(2)疫苗研究與開發(fā):如病毒性疫苗的研究與開發(fā)(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)...

13 2018-4

腫瘤細胞染色體數(shù)目異常的原因

腫瘤細胞分裂是指細胞分裂為兩個相同副本的過程。普通人的一生中要經(jīng)歷無數(shù)次的這一過程。為了生成兩個*相同的副本,細胞必須地分離它們的染色體,這一事件依賴于稱之為動粒(kinetochore)的專門結構將...

11 2018-4

原代細胞培養(yǎng)有哪些經(jīng)驗和教訓

原代細胞嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干。不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套。有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測。水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動...

9 2018-4

原代細胞的穩(wěn)定性

除非原代細胞產(chǎn)品說明書上另有特別說明,否則所有PeproTech蛋白產(chǎn)品都為凍干粉形式,在室溫下也能保持很好的穩(wěn)定性。但是,我們推薦凍干產(chǎn)品保存于-20℃。大多數(shù)凍干產(chǎn)品經(jīng)溶解和稀釋后,可短時間保存于...

4 2018-4

原代細胞凍存是保存的主要方法之一

原代細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于一196~C液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞...

2 2018-4

原代細胞的透過性

原代細胞的選擇透過性:這種膜可以讓水分子自由通過,細胞要選擇吸收的離子和小分子(如:氨基酸、葡萄糖)也可以通過,而其它的離子、小分子和大分子(如:信使RNA、蛋白質、核酸、蔗糖)則不能通過。膜蛋白:指...

30 2018-3

細胞系自動化篩選技術

zui常用的細胞系方法是檢測96孔細胞培養(yǎng)板中蛋白的濃度;另外一個方法是讓細胞在軟瓊脂上生長形成集落,然后利用原位免疫沉淀技術獲得高產(chǎn)細胞。近年來,發(fā)展起來的高通量自動化篩選技術也被受關注。為實現(xiàn)克隆...

28 2018-3

細胞株修復特定基因

雖然細胞株DNA突變是物種進化的原動力,但突變帶來的損傷也往往是危害極大的。因此,物種自身進化出了保護自己不受基因突變帶來的損傷的修復機制。其中一類機制叫做“DNA錯配損傷修復”,它能夠改變由于基因在...

26 2018-3

腫瘤細胞無法分裂與再生

腫瘤細胞建立起線粒體這一細胞的發(fā)電所來增加氧化作用。線粒體大量生成氧自由基損害DNA,zui終造成了細胞周期阻滯。Sadek博士說:“我們發(fā)現(xiàn)了以往未知的一個介導心肌細胞周期阻滯的保護機制,其是因氧依...

23 2018-3

如何解決細胞系培養(yǎng)板的密閉和污染問題

細胞系培養(yǎng)板的加樣和操作:細胞培養(yǎng)板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則,各項操作要保證規(guī)范、科學,不對細胞的生長造成額外的影響。這其中zui常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細...

21 2018-3

原代細胞生長的檢查方法

原代細胞是zui簡單的檢測細胞生長的方法。計數(shù)細胞一般利用臺盼藍(錐蟲藍染色,臺盼藍(錐蟲藍)不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色。而死亡細胞的細胞膜通透性增高,可使染料進入細胞內(nèi)而使細胞著...

19 2018-3

原代細胞或可調節(jié)血管口徑和通透性

原代細胞在酶的作用下,由它再進一步生成一組旁分泌激素物質,如血栓素和前列腺素等,這類物質對調節(jié)血管口徑和通透性有明顯的作用,還能引起炎癥反應和疼痛,并影響血液凝固。中性粒細胞內(nèi)含許多彌散分布的細小的淺...

12 2018-3

原代細胞活力評估難度低

傳統(tǒng)的原代細胞培養(yǎng)主要是通過顯微鏡下形態(tài)學變化以及傳代培養(yǎng)周期的變化預估細胞生長生存狀態(tài)。這種主觀判斷既無法量化,也無法進行統(tǒng)計學分析。因此,目前對細胞存活質量的判斷并沒有準確、客觀的統(tǒng)一標準,并且對...

9 2018-3

細胞株為何不貼壁?

總結細胞株不貼壁可能原因如下:●胰蛋白酶消化過度●支原體污染●培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解)●細胞老化●接種細胞起始濃度太低或太高解決方法:●縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度●分離培養(yǎng)物,...

7 2018-3

原代細胞實驗中淋巴細胞轉化的實驗

原代細胞實驗中正常機體的T淋巴細胞在體外培養(yǎng)過程中受到特異性抗原或有絲分裂原刺激??赊D化為淋巴母細胞。細胞免疫缺陷時,患惡性腫瘤或某些其他疾病時。轉化率顯然降低。目前zui常用植物血凝素(PHA)作為...

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